利用CRISPR/CAS9对人类干细胞系进

近日，来自美国威斯康星大学的华人科学家Su-Chun Zhang在国际学术期刊Cell Stem Cell发表了一项最新研究进展，他们利用CRISPR/CAS9技术实现了对人类干细胞系进行可诱导基因敲除，这一方法的成功对于研究基因在干细胞及分化不同阶段中的作用具有重要推动作用。

对基因表达进行精确的时间调控对于阐明一个基因在生物学系统中的功能至关重要，但到目前为止，在人类多能干细胞中实现可诱导基因敲除，建立可诱导基因敲除的人类干细胞系仍存在很大挑战。

在该项研究中，研究人员结合CRISPR/CAS9介导的基因组编辑和Flp/FRT以及Cre/LoxP系统成功实现建立了可诱导基因敲除的人类多能干细胞系。研究人员发现dual-sgRNA的靶向作用对于将FRT序列进行精确的双等位基因敲入非常重要。除此之外，他们还开发了出一种新的策略将一个可调控活性的重组酶表达体系同时导入细胞，移除了药物抗性基因，利用这种方法可以加快iKO hPSC细胞系的获得速度。

研究人员通过这种两步法敲除策略，对人类胚胎干细胞和诱导多能干细胞中的SOX2,PAX6,OTX2,AGO2等基因实现了可诱导性基因敲除，建立了相关细胞系。

研究人员相信，利用这种方法建立iKO hPSC细胞系将会改变人们以往对人类细胞中基因功能研究的方式，对于推动干细胞研究进展具有重要意义。

人血管紧张素转化酶 (ACE)检测试剂盒

人激活素A(ACVA)检测试剂盒

人脂联素(ADP/Acrp30)检测试剂盒

人Agouti相关蛋白(AgRP)检测试剂盒

人血管生成素(ANG)检测试剂盒

人促血管生成素1(ANG1)检测试剂盒

人促血管生成素2(ANG2)检测试剂盒

人B细胞活化因子 (BAFF/CD257)检测试剂盒 

人脑源性神经因子(BDNF)检测试剂盒 

人骨成型蛋白2 (BMP-2)检测试剂盒 

人骨成型蛋白4 (BMP-4)检测试剂盒 

人骨成型蛋白7 (BMP-7)检测试剂盒 

人上皮型钙黏蛋白 (E-Cad)检测试剂盒 

人碳酸酐酶IX (CA9)检测试剂盒

人胱天蛋白酶1(CASP1)检测试剂盒

人半胱天冬酶3(CASP3)检测试剂盒

人组织蛋白酶B(CTSB)检测试剂盒

人组织蛋白酶V(CTSV)检测试剂盒

人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)检测试剂盒

人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)检测试剂盒

人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)检测试剂盒 

人调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)检测试剂盒 

人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3)检测试剂盒

人嗜酸粒细胞趋化因子(ECF/CCL11)检测试剂盒

人胸腺激活调节趋化因子(TARC)检测试剂盒

人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α)检测试剂盒

人二级淋巴组织趋化因子(SLC)检测试剂盒

人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC)检测试剂盒

人髓样前体细胞抑制因子2(MPIF2)检测试剂盒

人巨噬细胞炎性蛋白4α(MIP4α)检测试剂盒

人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK)检测试剂盒 

人可溶性CD14分子(sCD14)检测试剂盒

人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)检测试剂盒 

人白细胞分化抗原CD40配体(CD40L/TNFSF5)检测试剂盒

人CD163分子(CD163)检测试剂盒

人软骨糖蛋白39(GP39)检测试剂盒 

人丛生蛋白(CLU)检测试剂盒

人睫状神经营养因子(CNTF)检测试剂盒