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CRISPR精品操作指南:如何精确有效完成实验!

沪震生物

2015/03/04 11:43

阅读:41

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生物学家们总是沉迷于对基因组修修补补,而其中一种近期红得发紫的技术就是 CRISPR。自2012年CRISPR/Cas 首次作为一种基因组编辑工具登台以来,关于这种技术的论文数量就大幅增加,最好的证明之一就是2015年两位科学家由于在CRISPR基因组编辑技术方面的重要贡献而获得“科学突破奖”,其中一位获奖者:Jennifer Doudna 最近在范德堡大学进行客座演讲,主会场和分会场都挤满了人,从中可以窥见这一技术的火热程度。

CRISPR全称为clustered regularly interspersed short palindromic repeats,是源于细菌及古细菌中的一种后天免疫系统,它可利用靶位点特异性的RNA指导Cas蛋白对靶位点序列进行修饰。直到近年,科学家们才开始利用这一系统在活体动物基因组中生成靶向突变,删除原有的基因或插入新基因。

这一技术发展迅速,就在去年,研究人员已经发现了利用CRISPR/Cas 治愈小鼠中一种罕见肝脏疾病的方法,并且科学家们也发现可以通过这种方法切除人类免疫细胞中HIV病毒插入的基因,阻止HIV进入血液干细胞。其原因可能在于这种方法比其它基于核酸酶的编辑方法操作简便,研究人员跟着指南操作,进行一轮PCR就能基本完成CRISPR实验了。

但CRISPR/Cas系统也存在自身的一些缺陷,比如进入细胞后,有可能在非目标位点进行酶切,从而导致脱靶,这对于临床应用来说是一大败笔。

我们需要更加精确和有效的CRISPR工具,研究人员也正在研究如何避免这类情况的发生,开发更好的预测编辑工具,或者研发能将CRISPR元件更有效传递到细胞内的方式,以下是The Scientist杂志汇总的新进展。

人补体因子4 (C4)检测试剂盒

人铁蛋白(FE)检测试剂盒

人免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒

人血清转铁蛋白(TF)检测试剂盒

人卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)检测试剂盒

人赖氨酰氧化酶(LOX)检测试剂盒 

人绒毛膜促性腺激素(CG)检测试剂盒

人生长激素(GH)检测试剂盒

人IV型胶原(COL4)检测试剂盒

人纤维连接蛋白(FN)检测试剂盒

人白介素9(IL-9)检测试剂盒

人I型前胶原(PCI)检测试剂盒

人III型前胶原(PCIII)检测试剂盒

人III型前胶原氨基端原肽(PIIINP)检测试剂盒

人基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)检测试剂盒

人I型前胶原氨基端原肽(PINP)检测试剂盒

人肾损伤分子1(KIM-1)检测试剂盒

人腺苷酸环化酶2(ADCY2)检测试剂盒 

人G补缀FHA域血管生成因子1(AGGF1)检测试剂盒

人补体成分4a(C4a)检测试剂盒

人补体成分5a(C5a)检测试剂盒

人白介素5(IL-5)检测试剂盒

人白介素6受体(IL-6R)检测试剂盒

人免疫球蛋白G Fc段受体I(FcγR I)检测试剂盒 

人神经钙黏蛋白(NCAD)检测试剂盒 

人I型前胶原羧基端原肽(PICP)检测试剂盒

人血小板衍生生长因子受体样蛋白(PDGFRL)检测试剂盒

人基膜聚糖(LUM)检测试剂盒

人泪腺富脯氨酸蛋白4(PRR4)检测试剂盒

人鞘脂激活蛋白原(PSAP)检测试剂盒

人前列腺素E合成酶(PTGES)检测试剂盒

人干扰素刺激基因15(ISG15)检测试剂盒

人氨酰tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)检测试剂盒


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