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一、货号:CR2639(50mL纯化量)
二、试剂原理:
本试剂盒利用不同蛋白需要的沉淀试剂和沉淀条件不同,通过大量实验分析验证而得到的一个与传统沉淀纯化完全不同的精细的具有高活性、高产率、快速以及良好重复性的单克隆抗体的纯化方法。
三、试剂特点:
本试剂盒特点在于纯化操作的简单化、所得抗体的高活性和高纯度。实验表明,本试剂盒可以得到90%左右纯度的抗体;并且由于配方考究,抗体在纯化过程中几乎没有损伤,完全保持应有的活性,实际应用极好。
四、适用范围:
本试剂盒适用于小鼠IgG1和2亚类单克隆抗体腹水的纯化,不能用于IgM和IgA类和其它IgG亚类的单克隆抗体腹水的纯化实验。
五、试剂组成:
试剂名称 | 数量 | 试剂名称 | 数量 |
纯化液A | 50ml | 透析试剂 | 8L量 |
纯化液B | 50mL | 透析袋 | 1根 |
纯化液C | 50mL | 说明书 | 1份 |
纯化液D | 50mL | 空白不干胶标签 | 2片 |
六、纯化步骤:
1、将单克隆抗体腹水从冰箱中取出,室温避光放置15分钟,然后用凉水边冲边摇匀快速解冻。
2、将化开的单克隆抗体腹水12000RPM 室温离心10-20分钟。
3、先吸弃最上面浮沫和油脂,然后将上清转出到另一个干净容器或离心管;按每1毫升单克隆抗体腹水加入纯化液A 1毫升,室温避光倒转20分。
4、8000-12000RPM 室温离心10-20分钟,沉淀用纯化液B溶解到原单克隆抗体腹水1/2体积;再按每毫升加入纯化液C 1毫升,室温避光倒转10分钟。
5、8000-12000RPM 室温离心10-20分钟,弃沉淀收集上清;每1毫升上清液加纯化液D 1毫升,室温避光倒转20分钟。
6、8000-12000RPM 室温离心10-20分钟,收集沉淀用纯化液B收集溶解沉淀到原单克隆抗体腹水体积的1/2。
7、透析袋用PBST浸泡3-5分钟,然后用手揉捏数次,自来水冲净后接纯水冲洗干净,将纯化好的抗体放入用透析夹或绳扎紧。
8、透析试剂用纯水溶解配成透析液,将要透析的抗体袋子放入。抗体体积:透析液体积=1:50,4℃搅拌透析每次0.5-1小时,共3-4次。
9、8000-12000RPM 室温离心10-20分钟,收集上清测蛋白浓度最后加10/万NaN3防腐并除菌过滤加50%甘油冷冻在-20℃存放保存。
七、 注意事项:
1、本试剂对未溶血的小鼠多抗血清的纯化也有比较好的效果,但不建议您这样做,因为溶血的抗血清纯化效果欠佳。
2、离心温度不能超过37℃。
3、操作和量取试剂要细致精准。
4、溶血严重和腐败的腹水不得用于纯化。
5、不搅拌透析每次时间不得低于2小时。
特别提示:如果您在实验过程中遇到任何困难,请在第一时间联系我们技术团队获取支持。
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大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA检测试剂盒操作步骤
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断 大鼠(Rat)γ干扰素(IFN-γ)ELISA检测试剂盒使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被γ干扰素(IFN-γ)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
生物产业
2023/12/06
企业名称
上海远慕生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
有限责任公司(自然人独资)
信用代码
91310120071207690P
成立日期
2013-06-19
注册资本
人民币300.0000万元整
经营范围
从事生物科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,实验室设备、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)、仪器仪表、五金交电、电子产品、机械设备、计算机、软件及辅助设备(除计算机信息系统安全专用产品)、电动自行车的批发、零售.(依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动)
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