RNA酶抑制剂使用说明书

产品名称：RNA酶抑制剂
品牌：远慕
货号：C6101
用途范围：科研
规格：1000U，2000U，10000U
储存条件及有效期：-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融少于 5 次，有效期 12 个月

PCR是以参照物为标准，对PCR终产物进行分析或对PCR过程进行监测，从而达到评估样本中靶基因的拷贝数，称为定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。

【PCR优点】：
1、特异性好，使用特异性探针对定量分子进行识别，具有很高的准确性。同时，靶序列由引物和探针双重控制，特异性好、假阳性低。
2、灵敏度高，荧光PCR检测技术是综合了PCR技术、荧光标记技术、激光技术、数码显象技术为一体的技术，因此它的检测灵敏度很高。
3、线性关系好、线性范围宽，由于荧光信号的产生和每次扩增产物成一一对应的关系，通过荧光信号的检测可以直接对产物进行定量；定量范围可在0－1010拷贝/毫升。
4、操作简单、安全、自动化程度高、防污染。扩增和检测可以在同一管内检测，不需要开盖，不易污染；同时扩增和检测一步完成，不需要后期处理，不再需要担心放射性污染。
5、速度快、高通量，可在2－3小时完成96个样品的定量分析。

【注意事项】：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。


1.RNA酶抑制剂具有广谱的RNA酶抑制作用，包括中性的真核生物的RNA的抑制作用。分子量是50kDa的蛋白质通过非共价键与RNA酶以1：1的比例结合发挥它的抑制作用。RNA酶抑制剂与RNA酶结合的有效浓度时10-14M。相比之下，抗体的结合浓度是10-6-10-8M。而且，RNA酶抑制剂的动力学结合是非常迅速的，确保与RNA酶的迅速络合，并对其产生迅速的抑制作用。Promega提供两种不同的实验方案：天然的RNA酶抑制剂和重组的RNA酶抑制剂。这些产品都是应用离子交换和亲和色谱法结合得到，所以都是纯净的。她们都不含有DNA外切酶、核酸外切酶活性和RNA酶活性。RNA酶抑制剂除了具有对RNA酶活性抑制作用的能力外，已经被证实，在血管生成素的诱导下可以抑制血管的生成。

重组RNA酶抑制剂：为实验人员提供一个额外的水平，保证试剂的纯度和连续性。从重组大肠杆菌中提取，氨基端是一个已经解锁的丝氨酸残基。一般考虑：分子和核糖核酸酶结合，因为核酸酶在变性的情况下保持活性，所以必须注意避免RNA酶抑制剂变性。如果被稀释或储存一段时间，为了防止活跃核酸酶的释放，应该避免温度高于50℃，以及尿素或者其他变性剂的浓度过高。RNA酶抑制剂在一定pH变化范围内是非常活跃的。

2.标准使用程序重组和天然RNA酶抑制剂在体外转录和翻译时可以互换，具体介绍如下。

A.体外转录（未标记RNA）下面的体外转录系统分析使用最终浓度在1u/ul的RNA酶抑制剂。经过合适的修改，这个反应可以用于各种实验的体外转录分析。
B.体外转录（32P标记RNA探针）
C.体外翻译包括RNA抑制酶和体外翻译，确保RNA酶作用物的完整性。

（1）兔网织红细胞溶解产物参与的简单体外翻译反应：
（2）三硝基甲苯网织红细胞溶解产物或者小麦胚芽提取物系统参与的简单体外翻译3．缓冲液和溶液的成分4.参考文献