人5羟色胺（5-HT）ELISA试剂盒操作步骤

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中文名：人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒
别名：人5羟色胺(5-HT)ELISA Kit
供应商：上海远慕
规格：48t/96t
检测方法：酶免法/酶联免疫法(ELISA)
保存条件：2-8℃
有效期：6个月
适用范围:仅供科研使用,不得用于临床
用途：用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中的含量或活性。
特点：灵敏性高、特异性强、重复性好。
检测目的:用于测定血清，血浆及相关液体等样本，例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒技术原理：
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

人5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒样本的处理方式：
1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般现采现用，胃液、唾液最好的采集时间是空腹采集，一般隔夜尿不采集；
2、采集血清时，一般要加入总体积1%的抗凝剂，采集后先室温或4℃静置半小时后，800-1000rmpx5min分离，取上清，-20℃或4℃保存备用；
3、组织提取液、肺泡灌洗液等，采集后离心分离，800-1000rmpx5min，取上清，-20℃或4℃保存备用；
4、采集血浆时一般不加抗凝剂，采集后立即离心800-1000rmpx5min分离，取上清，-20℃或4℃保存备用；
5、不贴壁细胞(分泌性蛋白)，将培养基和细胞转移至10ml离心管，500-800rmpx10min，吸取上清至另一10ml离心管中，10000rmpx10min，-20℃或4℃保存，作为标本进行检测，如有需要可进行透析或纯化处理。

人5羟色胺（5-HT）ELISA试剂盒操作步骤：
1、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2、温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
5、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
6、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
7、终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

人5羟色胺（5-HT）ELISA试剂盒操作步骤注意事项：
1．人5羟色胺ELISA检测试剂盒，人5-HT试剂盒检测前，检查各种仪器，打开酶标仪，稳定20分钟左右。
2．检测样本要澄清，不能含杂物，否则会直接影响结果。
3．实验开始前要将试剂盒取出，室温放置30-40分钟，使各种试剂都恢复到室温，以使检测结果更为稳定。
4．尽量做双标准实验，这样可以保证数据的准确性。
5．底物具有毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，要避免接触。
6．人5羟色胺ELISA检测试剂盒，人5-HT试剂盒实验中，要使底物避光保存，酶标板均可拆卸，多余的部分应密封好，低温保存。

人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒组成：
1.30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ；
2.酶标试剂 6ml×1 瓶；
3.酶标包被板 12 孔×8 条 ；
4.样品稀释液 6ml×1 瓶；
5.显色剂A 液 6ml×1 瓶 ；
6.显色剂B 液 6ml×1/瓶；
7.终止液 6ml×1 瓶；
8.标准品（48ng/ml） 0.5ml×1 瓶；
9.标准品稀释液 1.5ml×1 瓶；
10.说明书 1 份；
11.封板膜 2 张；
12.密封袋 1 个；

人5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒使用优点：ELISA试剂盒可特异性定量测定疾病相关蛋白，包括细胞因子、趋化因子、β淀粉样蛋白与信号转导靶标。

1.灵敏，准确和一致的性能

2.用血清、血浆、组织培养上清或裂解产物进行过验证

3.在半天内可完成的现成，方便的检测

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