鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒检测目的

鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒检测目的，用途，特点，规格，型号，说明书，价格等详情由上海远慕生物提供详细介绍，本司专业经营进口/国产ELISA检测试剂盒，培养基，动物血清，新生牛血清，蛋白质，抗生素， 微生物，细胞株，抗体，标准品，化学试剂，染色液，缓冲液，酶联免疫试剂盒，白介素试剂盒，提供ELISA试剂盒免费代测服务，ELISA试剂盒种属成千上万，欢迎来电洽谈！

中文名：鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒
别名：鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA kit
供应商：上海远慕
保存：2-8℃
有效期：6个月
检测原理：狗胆囊收缩素(CCK)ELISA试剂盒采用双抗体夹心ABC-ELISA法
用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。
鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒检测目的:用于测定血清，血浆及相关液体等样本，例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。

鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒标本的采集与保存：
1.  血清：
将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4oC 过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20oC 或-80oC 保存，但应避免反复冻融。
2.  血浆：
用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8oC 1000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20oC 或-80oC 保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：
1） 取适量组织块，于预冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，称重后备用（组织块较大需先剪碎后再匀浆）；
2） 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入5-10mL 预冷PBS 进行充分研磨，该过程需在冰上进行（有条件实验室可选用机器匀浆）；得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融 进一步处理（超声破碎过程中注意冰浴降温；反复冻融法可重复2 次）。
3） 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟，留取上清即可检测。
4. 细胞裂解液：
1）贴壁细胞需要先用胰酶消化，离心收集细胞（悬浮细胞可直接离心收集）；
2）将收集到的细胞用冷PBS 洗3 次；
3）物理方法裂解细胞（可先超声破碎细胞，再反复冻融）：
i 超声破碎：取适量PBS 重悬细胞，用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂。
ii 反复冻融：将待破碎的细胞在-20 oC 以下冰冻，室温融解，反复3 次，使细胞溶胀破碎。
4）将标本于2-8 oC 1500×g 离心10 分钟，收集上清备用。
5. 细胞培养上清或其它生物标本：
请 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20oC 或-80oC 保存，但应避免反复冻融。

特异性：
本试剂盒用于检测鸡骨成型蛋白4(BMP4)，经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

实验原理：
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒检测目的说明：
1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒操作步骤：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。?
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。?
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。?
（6）洗板，同（4）。?
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。?
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。?
（9）洗板，同（4）。?
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。?
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。?
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

鸡骨成型蛋白4(BMP4)ELISA检测试剂盒注意事项：
1.使用前 TMB 显色液应为无色透明溶液，若发现颜色异常，请及时与厂家联系。
2.用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
3. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
4.建议所有标准品、样本都做双份检测。标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5.要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活！
6.为免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和试管。
7.禁止混用不同批次试剂盒内的试剂。
8.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
9.为避免酶标板在恒温箱中由于温度的不匀所带来的边缘效应（位于边缘的孔总是反应强 一些），已稀释好的 ABC 和 TMB 显色液在加入酶标板孔前都应预先在 37℃中平衡至少 30 分钟。
10.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
11.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
12.底物请避光保存。
13.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
14.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
15.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。