人ELISA试剂盒,人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA检测试剂盒 上海远慕ELISA试剂盒供应商!
上海远慕生物科技有限公司供应:人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA试剂盒 人ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒等。 货号:YM-YM0258 规格:48T/96T
人ELISA试剂盒,人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA检测试剂盒 ELISA试剂盒技术流程 双抗体夹心法(检测未知抗原) 1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
间接法(检测未知抗体) 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) 3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 人ELISA试剂盒,人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA检测试剂盒
ELISA试剂盒需自备的设备及试剂 1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热) 2. 单道或多道微量加液器及吸头 3. 稀释样品的EP管 4. 蒸馏水或去离子水 5. 吸水纸 6. 盛放洗液的容器 人ELISA试剂盒,人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA检测试剂盒
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