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DNA提取中各类试剂的作用

上海远慕生物科技有限公司

2023/09/27 10:20

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  Tris-HCL:缓冲体系。提供稳定pH;

  NaCl:可以降低DNA在水中的溶解度,并且不破坏DNA的结构;

  EDTA: Ca2+ Mg2+ 的螯合剂,抑制DNase活性;

  SDS:使蛋白变性,促进蛋白质和DNA的分离;

  巯基乙醇:抗氧化剂,防止酚氧化成醌,保护DNA;也有人说可以用来消泡;

  醋酸钾:钾离子置换SDS的钠离子,形成不溶于水的PDS,将大量蛋白同步沉淀下来。

  氯仿:异戊醇:使蛋白变性。氯仿的作用是变性剂、抽提脂溶性物质;

  异戊醇作用是A.降低表面张力、阻止气泡的产生;B.有助于分相(使离心后水相、有机相稳定)

  (剧烈震荡时容易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用);

  异丙醇:沉淀DNA;

  70%乙醇:洗涤DNA;(盐、蛋白等溶于70%乙醇,而DNA不溶)

  100%乙醇:可以用于沉淀DNA,也可以用于使DNA快速干燥
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