缓冲液大量稀释后pH变化在什么范围内
缓冲液大量稀释后pH只是比原来的溶液有很少的变化。因为稀释之后,会促进缓冲溶液加速水解,其ph值会因此得到补偿,而不会发生剧烈的变化。
由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响,从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为缓冲溶液。缓冲体系由:
1、弱酸和它的盐(如HAc---NaAc)
2、弱碱和它的盐(NH3·H2O---NH4Cl)
3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐(如NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液组成。
常用缓冲液的缓冲范围
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲液。
下图展示了一些我们常用的一些缓冲液的缓冲范围以及相应的pKa值,供选择不同PH值的缓冲液时作为参考。
这些常用的缓冲液包括:MES、ADA、ACES、PIPES、MOPSO、BES、MOPS、TES、HEPES、TRIS、EPPS、TRICINE、BICINE、TAPS、GLYGLY、CHES、CAPS。
使用缓冲液注意这些问题
1) 缓冲液使用前必须过滤。
2) 溶剂、样品易受到细菌和霉菌的影响,要注意清洁。
3)一般不能直接用有机溶剂做清洗冲洗。
4)梯度洗脱时,选低吸收值的缓冲液 :
例如:梯度洗脱时,缓冲液与有机相应预混,以防止析盐。在保证峰不拖尾的情况下,尽可能选用低浓度的缓冲盐,防止析盐; 缓冲盐浓度,一般用20~30mM基本上就可以了,如果流动相中有机相含量高的话,流动相中的盐类缓冲液浓度就不能过高,盐的浓度起码要保证在流动相条件下不会析出。离子对缓冲液浓度要高一点,一般50~100mM。
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