细胞抱团是利用细胞培养瓶进行细胞培养时的常见问题,细胞成团后将影响细胞的正常生长与繁殖,那么,如果出现这种情况该如何解决呢?
首-先,细胞成团并不一定都会影响细胞培养进程。如果细胞轮廓清晰胞体通透,呈串状均匀聚集,证明细胞的生长状态良好。但多数情况下,聚团的细胞都是轮廓模糊、透光性差,甚至会出现合胞体,伴有细胞碎片,这证明细胞已经衰老或产生病变,状态不佳。解决细胞成团问题可以通过以下几种方式:
1、如果细胞抱团不影响生长就没问题,只是计数时较麻烦。在消化时,可在细胞由多角形变成圆型之前,用手轻磕细胞培养瓶的侧壁,使细胞从壁上脱落(最好不要吹打,对细胞形状和生长都不好)。
2、如果感觉有死细胞的 DNA,在细胞悬液中加入几滴无菌的 DNAse(1mg/ml 溶于水)将 DNA 链打断。轻柔地吹打细胞,防止对细胞膜造成物理损伤。
3、如果细胞抱团是肉眼可见的,可让细胞静置半分钟左右,然后吸取上半部分没有抱团的细胞悬液来传代。如果细胞抱团肉眼不可见,目前还没有特别好的分离方法,只能等细胞状态改善后将这部分细胞慢慢排除出去。
细胞培养瓶内的细胞出现抱团现象,可以按照以上方法进行处理,在细胞培养过程中需要及时观察细胞的生长状态,并针对所出现的情况做出相应的调整。
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