HEPES缓冲液的配制方法主要有哪些

缓冲液的品种非常多，比如常见的有HEPES缓冲液，磷酸盐缓冲液，Tris缓冲液，甘氨酸缓冲液，虽然我们都知道这些缓冲液有很多的优点，但同时也有着不可避免的缺点；本文将为您一一进行揭晓，我们只有把这些问题弄清楚了，才可以更加清楚的去选择适合的缓冲液。

HEPES缓冲液的配制方法主要有哪些

HEPES缓冲液的配制方法

一、500ml 1 MHEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制

119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH 范围是6.8~8.2)，然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。

二、加少量盐的HEPESBuffer配方(500ml)

HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值，最后定容。

三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制

将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸馏水，用0.5M NaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。

HEPES使用方法有两种：

A、HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中，再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH 调pH至7.2，滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L。

B、亦可配成 100 x 贮存液(l mol/L)，使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液，最终应用浓度仍为10mmol/L。l mol/L(100 x)HEPES贮存液配制方法：取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中，用lN NaOH调pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml，过滤除菌，分装小瓶(2ml/瓶)，4℃或-20℃保存。

需要注意的是，HEPES缓冲液的使用终浓度为10-50mmol/L，对细胞无毒性作用。一般情况下，浓度为20mmol/L的HEPES即可达到缓冲能力。现在市售HEPES为约10g包装的小瓶，大家根据实际情况正确灵活配制就可以。

看完如何选择缓冲液，HEPES缓冲液的配制方法这篇文章后，相信你对缓冲液也有进一步的了解，由于缓冲液多见用于科研实验上，所以我们在实验过程中一定要保证产品的质量，了解相关的配制方法及使用方法等都是每一个实验人员需要知道的，如果你对缓冲液还有什么好的见解，欢迎和我们一起来讨论。
 

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