养过细胞的人都知道优质血清的重要标准之一是内毒的含量。血清由于其复杂的成分是不可代替的，但它也难以控制外界因素的影响内毒素过高会是实验室珍贵的细胞凋零。例如：干细胞体外培养实验，由于干细胞的原始性，它们对内毒素非常敏感，所以，当血清内毒素偏高时，细胞很容易死亡，需要在试用前提早参看该批次《检测报告》，以决定是否入围进行试用。又例如：基因敲除相关的细胞实验，培养的细胞要尽可能保持其原始状态，任何引导细胞衰老或凋亡的试剂，都会让后续的实验结果“失之毫厘，谬以千里”。所以，选择极低内毒素的血清，至关重要。同样，例如：原代培养，杂交瘤融合，细胞转染，难养细胞在体外的增殖（肝细胞，神经细胞，内皮细胞等）....这些细胞的培养都需要内毒素更低的血清，如果内毒素过高，对细胞造成的损害，会大大影响后续实验结果。还有一些细胞，实验室比较常用，经常复苏，培养，冻存，如此，血清会经常作用于细胞；还有的细胞需要培养的时间较长，血清会长时间作用于细胞；还有细胞典藏等项目，都需要使用更低内毒素的血清，以避免内毒素长久对细胞的毒性影响。因此，我们在挑选优质血清的时候内毒素是我们应该优先考量的条件之一。

实验室的试剂耗材种类品种繁杂，不管是在申购还是在入库管理都是比较繁琐的事，尤其是化学试剂。所以对于试剂耗材管理是实验室管理非常重要的工作，因为能否管理好试剂耗材管理关系到了实验室的安全。下面就化学试剂分类和管理做个简单概述，希望能帮助到大家。1、化学试剂的分类对实验室的试剂规格分类是按纯度划分，一共分为高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯7种。而主要质量指标分类一般是优级纯、分级纯和化学纯这3种。2、对化学试剂的管理对于试剂耗材管理的工作第1项是申购，所以实验室首先应该有一套完整的从申购到入库管理全流程制度。要特别注意采购时必须去正规试剂店购买按照国家标准和化工部行业标准生产的试剂。试剂标签上应注有名称、类别、产品标准、含量、规格、生产厂家、出厂批号;有的试剂还应标明保质期。对有经验的实验人员来说，观察试剂标签是判断试剂真伪的重要手段，可以避免买到伪劣试剂而影响实验。验收、入库工作也是一个认真、细致的工作，由于化学试剂种类繁多，同一种化学试剂还有优级纯、分析纯、光谱纯、化学纯等不同的纯度，使得它们的含量、价格、用途都不相同，因而要注意验收、登记和分类存放。试剂耗材管理是实验室人员的日常工作，需要管理人员有较高的试剂尤其是化学试剂知识。一般的化学试剂按照单质、无机物、有机物、指示剂等分别存放。3、对危险试剂的管理在试验过程中，要接触各种化学试剂及化学反应过程所产生的气体、挥发物、烟雾等，这些物质中有的对人体有毒害作用，有的有强腐蚀性，有的具有易燃易爆性。实验过程中除了对学生加强安全教育外，实验室管理人员本身也应具有扎实的安全管理知识和试剂管理知识。化学实验室用到的危险试剂主要包括剧毒-品、强腐蚀品和易燃易爆品三类。实验室的危险品还包括放射性试剂和某些生化类试剂，由于一般实验室不多使用，在此不多说了。 危险试剂管理比较专业而且复杂，在购置、搬运、保存、领用等环节都应需要有专业知识的人员管理或现场指导，保存危险品的试剂室也必须有明确的警示牌且严禁无关人员进入，以确保实验室的安全。4、对各种化学药品的管理实验室的化学药品及试剂溶液品种很多，其中化学药品大多具有一定的毒性及危险性，对其加强管理不仅是保证分析数据质量的需要，也是确保安全的需要。化学药品建议按无机物、有机物、生物培养剂分类存放，无机物按酸、碱、盐分类存放，盐类中按金属活跃性顺序分类存放，生物培养剂按培养菌群不同分类存放，其中属于危险化学药品中的剧毒-品应锁在专门的毒-品柜中，由专人加锁保管、领用需要先申请、审批、双人登记签字等严格管理制度。关于实验室试剂耗材管理，尤其是化学试剂药品管理主要就给大家分享这4点。从上面大家也都知道，光靠传统人工管理确实很难做好管理的工作，必须结合专业的试剂耗材管理系统才行。

1、使用适当的试剂冷库。如果有放射性物质或生物危害物质存放其中，则严禁放置食物，冰箱门上要作清楚的标记。易燃物质(如乙醇)必须存放在防爆冷库内，这种防爆冷库可以消除电火花。2、只有在取试剂的时候才打开冰箱门。如果要在冷库内寻找某个试剂，先将放置其他试剂的盒子或架子放在冰上后再找。3、试剂冷库内所有容器都必须有标签，盖子都必须盖好，不要将没有拧紧盖子的试管放在冰箱内的聚苯乙烯杯子里或者放鸡蛋的凹槽内。每个管子都必须经受得住摇动而不会从架子上翻落(以防粗心的实验员在冰箱内乱翻东西时将试管打翻)。4、把所有试剂放置的位置记录下来。这样做能迅速地在盒子里找出试剂，并且在稍后能放回原处。把试剂放置的位置系统的记录下来，能够使寻找试剂变得更加容易。5、定期清理那些已经不用的试剂。只剩10ml培养基的瓶子、细菌培养基的皮氏培养皿、以及那些“以备万一”备用的样品，它们会占据许多空间而不容易找到需要的物品。6、尊重私人空间。冰箱是公用的但通常会一个人一层，因此不要占用别人的位置。当你整理好自己的东西，发现地方还是不够时，和管理试剂冷库的人讲，让他给你更多的地方。

一、 贴壁细胞接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片， 显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的) 。严格无菌操作，打开细胞培养瓶。将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)，放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。用PBS 2-3mL轻轻洗细胞表面，洗1-2遍，吸走PBS，加入0.25%胰酶EDTA 1ml,37度培养箱消化，消化到显微镜下观察细胞变圆但未完全脱落时，吸取正在消化的胰酶轻轻吹打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止消化，混匀细胞。900rpm, 3min离心，加新的培养基重悬细胞。传代换新的细胞培养瓶，放置于37℃，5% CO?的培养箱中培养。二、 悬浮细胞接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。严格无菌操作，打开细胞培养瓶。细胞培养瓶内的细胞吹打均匀,用吸管将培养基完全吸出(严禁直接倾倒)。900rpm, 3min离心，加新的培养基重悬细胞。换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，放置于37℃，5% CO?的培养箱中培养。

蛋白纯化似乎是生物学“研究僧”们躲不过的一个“劫”，很多童鞋开始就难住了，微珠怎么选？选哪一种？小朋友你是否也有很多问号？不用担心，远慕生物为您解惑！长久以来，多孔的琼脂糖珠 （也称琼脂糖树脂） 作为免疫沉淀实验中的固相支持物常用的材料。琼脂糖珠海绵状的结构 （直径 50-150 μm） 可以结合抗体 （继而结合靶蛋白），它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。图 1. 琼脂糖珠在无需抗体饱和的情况下，琼脂糖珠能很好的结合极大量目的蛋白。但值得注意的是，在免疫沉淀实验中，抗体的量常常不足以满足琼脂糖珠的饱和荷载量，没有被抗体覆盖的琼脂糖珠的部分则可以自由地结合任何可粘附的物质，这种非特异性结合升高引起背景信号升高，这时，“高荷载量优势”会变成“高荷载量劣势”。对裂解样本进行预处理操作，是去除非特异性结合物最为简单有效的方法。■ 预处理裂解样本是蛋白质、脂质、碳水化合物和核酸的混合物，与抗体、蛋白 a/g、微珠材料会发生非特异性结合，从而对免疫沉淀结果造成影响。主要方法有两种：a. 排除由于微珠本身材质引起的非特异性结合：将裂解样本与微珠单独混合孵育，随后去除微珠并收集上清液，再进行免疫沉淀实验。b. 排除由细胞成分引起的非特异性结合：使用相同抗体亚型类别但不靶向目的蛋白的抗体，在相同的组分条件中与裂解样本混合孵育，再进行免疫沉淀实验。目前，超顺磁性微珠已经大幅取代琼脂糖珠，成为免疫沉淀和其他微量亲和纯化方法的首先选择。与琼脂糖珠不同，磁珠是固体，抗体的结合仅限于磁珠的表面。磁珠 （直径 1-4 μm） 明显小于琼脂糖珠，尽管磁珠没有多孔中心增加结合能力，但每体积的磁珠数量比琼脂糖珠多，使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合。图 2. 磁珠■ 结合能力由于琼脂糖珠直径较大且具有海绵状结构，因而比磁珠有更大的表面积和更大的结合能力。但是琼脂糖珠的可变多孔径会使抗体会落入孔内，导致结合受限，尤其是超大蛋白 （一般是蛋白复合物） 的结合，并且抗体可能会在洗涤步骤 （离心） 中流失。相反，绑定在磁珠表面的抗体均能与目的蛋白结合，并且抗体很少会在温和的洗涤步骤 （磁性分离） 中流失。另外，琼脂糖珠的非特异性结合能力大于磁珠。琼脂糖珠的非特异性结合不限于其表面抗体结合位点，抗体的任何表面或参加免疫沉淀反应的成分均可与样品中非目的蛋白成分结合，即使使用完全饱和的珠子，仍会发生非特异性结合。因此，进行免疫沉淀之前预处理样品极为重要。■ 成本免疫沉淀中设计微珠的成本主要取决于免疫沉淀方法和每个免疫沉淀反应所需要的微珠量。琼脂糖珠：琼脂糖珠必须通过离心浓缩在管底部，并在每次孵育和洗涤除去上清液，通常需要肉眼识别管底部的琼脂糖珠，因此，每个免疫沉淀实验至少需要使用 25-50 μl 的琼脂糖珠。磁珠：采用磁性分离，无需设定最小体积的的磁珠使用量，用量仅取决于目的蛋白和免疫沉淀抗体。当然，在使用琼脂糖珠的过程中，可以使用过滤离心柱代替普通的微量离心管，该离心柱包含一个过滤器，允许通过短暂的离心使除珠子外的所有免疫沉淀成分流过，因此可以显著减少每个反应所需的琼脂糖珠使用量。■ 简单快速由于琼脂糖珠免疫沉淀需要较长的孵育时间，预处理步骤和多次离心，所以其需要大量的手动操作，总时间为 1-1.5 小时。相反，磁珠免疫沉淀反应不需要离心，配合使用磁性分离架磁性分离，在 30 分钟内即可完成实验，因此可以在较短时间内轻松处理并获得较多样本的分析数据。■ 自动化磁珠操作简便，因此可以使用自动化免疫沉淀设备，不仅节省了工作量和时间，还可以应用于高通量。当样品体积当样品体积> 2 ml，建议使用琼脂糖珠。当抗体成本较低并且想要纯化大量目的蛋白用于多种下游分析时，琼脂糖珠是最佳选择。

试剂的品级与规格应根据具体要求和使用情况加以选择 。在中国国家标准（GB）中 ，将一般试剂划分为3个等级：一级试剂为优级纯，二级试剂为分析纯，三级试剂为化学纯。定级的根据是试剂的纯度（即含量）、杂质含量 、提纯的难易，以及各项物理性质。有时也根据用途来定级 ，例如光谱纯试剂、色谱纯试剂，以及pH标准试剂等等。相信很多人对于进口试剂存在一定的疑问及问题，现在小编为大家介绍一下关于试剂进口报关手续及流程的进口知识，希望对大家有所帮助！一、试剂进口税率是多少?（仅供参考）试剂进口商品编码：3822009000试剂进口关税税率：5%试剂进口增值税税率：13%二、试剂进口报关手续资料：1、进出口经营权；2、官方原产地证书；3、中文成份表；4、MSDS 中文报告；5、危险品包装证明 （危险品需要提供）；6、危险品等级分类鉴定报告（危险品需要提供）；7、装箱单、发票及合同等；8、产品信息：品名、数量、包装、重量及体积等；三、试剂进口报关流程：1、到达港口；2、支付运费、船代处换单；3、报检、报关及审报价格；4、海关审价出税单；5、缴纳税金；6、海关查柜；7、放行货物；8、提货；9、送货至国内指定地点；四、化工类进口报关注意事项:由于化工货物均属于易燃易爆产品，因此在选择装柜运输与产品包装时，请注意妥善处理。另外如果是少量自用的涂料油漆（天那水，清洁剂等化工水剂）或者是样品，可以考虑通过香港中转的方式来操作油漆涂料的进口，这样缩短货物进口的时间，减低货物进口成本，还有将进口的手续尽量简单化。

常见抗生素和其稳定性如下：注射用青霉素钠青霉素水溶液在室温不稳定，20 单位/ml 青霉素溶液 30 ℃ 放置 24 小时效价下降 56% ，青霉烯酸含量增加 200 倍，因此应用本品须新鲜配制。邦达邦达 (注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠)说明书中明确表示：溶解后的药物应当立即使用，没有使用的部分在室温下（20～25 ℃ ）放置 24 小时后应当丢弃，或在冷藏保存（～8 ℃ ）48 小时后丢弃。静脉输液袋中的药物稳定性研究表明，本品在室温条件下 24 小时内化学性质（溶解后药物的效价、溶解后药液的 pH 值和溶液的澄清度）保持稳定，冷藏条件下溶解的药液在一周内保持稳定。罗氏芬罗氏芬 (注射用头孢曲松钠)新配制的溶液能在室温下保持其物理及化学稳定性达 6 小时，或在 2-8 ℃ 冰箱里保持 24 小时，但按一般原则，配制后的溶液应立刻使用。依其浓度及保存时间的不同，溶液呈现为淡黄色到琥珀色。溶液颜色对药物有效性或耐受性并无意义。丽扶欣丽扶欣（注射用头孢呋辛钠）肌内注射：用灭菌注射用水配制时，本品混悬液在室温 24 小时，冰箱 5 ℃ 保存 48 小时可保持活性。过了这个期限，任何未用的溶液都应丢弃。静脉注射：用灭菌注射用水配制时，0.25 g，0.75 g，1.5 g 配制后的溶液在室温 24 小时，冰箱 5 ℃ 保存 48 小时可保持活性。本品在室温下与以下一些溶液可以 24 小时内保持相容性，肝素（10～50μ/ml），氯化钾（10～40mEq/L），碳酸氢钠，0.9% 氯化钠。每 0.75gZINACEFADD-Vantage 瓶，用 50 ml 5% 葡萄糖注射液，0.9% 氯化钠注射液，0.45% 氯化钠注射液稀释，可以在室温存放 24 小时，冰箱存放 7 天。如溶液发生浑浊或有沉淀不能使用。不同浓度的溶液可呈微黄色至琥珀色，本品粉末、混悬液和溶液在不同的存放条件下颜色可变深，但不影响其疗效。美平美平 (注射用美罗培南)配制好静脉点滴注射液后应立即使用，建议在 15～30 分钟之内完成给药。使用前，先将溶液振荡摇匀。如有特殊情况需放置，仅能用生理盐水溶解，室温下应于 6 小时内使用（本药溶液不可冷冻）。希舒美希舒美 (注射用阿奇霉素)药品原液的准备：向 500 mg 希舒美 (注射用阿奇霉素) 瓶中加 4.8 ml 灭菌注射用水，振荡直至药物完全溶解。因希舒美 (注射用阿奇霉素) 为真空包装，建议使用标准的 5 ml 注射器 (非自动的) 以确保准确抽取 4.8 ml 灭菌注射用水。使每毫升溶液中含 100 mg 阿奇霉素。该溶液在 30 ℃ (或 86℉) 以下可保存 24 小时。胃肠道外给药在使用前须用肉眼观察是否有颗粒状物，如溶液中有明显的颗粒物，应将药物溶液丢弃。稳可信稳可信 (注射用盐酸万古霉素) ：室温（1 至 30 ℃ ）下保存配制后的溶液应尽早使用，若必须保存，则可保存于室温、冰箱内，在 24 小时内使用。科塞斯科塞斯（注射用醋酸卡泊芬净） 输注液储存于 25°C 或以下温度的环境中，必须在 24 小时内使用；如储存于 2 至 8°C 的冰箱中，则必须在 48 小时内使用。输注液须用大约 1 小时经静脉缓慢地输注。注射用两性霉素B脂质体注射用两性霉素B脂质体(上海新先锋) ：本品不可用生理盐水溶解，滴注液应新鲜配制，滴注速度宜缓慢（滴速不得超过 30 滴/分）。每剂滴注时间至少 6 小时。以上为常见的抗生素使用说明，均参照药品使用说明书，为临床患者静脉输液提供参考。

常用的电泳实验载体：1、醋酸纤维素薄膜电泳 ：醋酸纤维素薄膜电泳是以醋酸纤维素薄膜为支持物，它是纤维素的醋酸酯，由纤维素的羟基经乙酰化而制成。2、 琼脂糖凝胶电泳 ：琼脂糖凝胶电泳是一种以琼脂糖凝胶为支持物的凝胶电泳。3、聚丙烯酰胺凝胶电泳 ：聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂又称为共聚体的N,N’-甲叉双丙烯酰胺（简称Bis）在加速剂和催化剂的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶，以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称PAGE)。4、等电聚焦电泳 ：等电聚焦电泳是利用具有pH梯度的电泳介质来分离等电点(pI)不同的蛋白质的电泳技术。琼脂糖凝胶电泳其分析原理与其它支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构，直接参与带电颗粒的分离过程，在电泳中，物质分子通过空隙时会受到阻力，大分子物质在泳动时受到的阻力比小分子大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅依赖于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就大大地提高了分辨能力。琼脂糖系天然的琼脂加工制得，天然琼脂是一种多聚糖，主要由琼脂糖（约占80%）及琼脂胶组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质，不带电荷。而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖，由于这些基团带有电荷，在电场作用下能产生较强的电渗现象。所以常用于血清蛋白、血红蛋白、脂蛋白、糖蛋白、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶等同工酶的分离和鉴定，为临床某些疾病的鉴别诊断提供了可靠的依据。与免疫化学反应相结合发展成为免疫电泳技术，用于分离和检测抗原。可对目前常用的琼脂糖进行某些修饰，如引入化学基团羟乙基，则可使琼脂糖在65℃左右便能熔化，被称为低熔点琼脂糖。该温度低于DNA的熔点，而且凝胶强度又无明显改变。以此为支持物进行电泳，称为低熔点琼脂糖凝胶电泳，主要应用于DNA研究。如DNA鉴定，DNA限制性内切酶图谱制作等，为DNA分子及其片段分子量测定和DNA分子构象的分析提供了重要手段。总结琼脂糖凝胶电泳的优点如下：1. 琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，样品不需事先处理就可以进行电泳。2. 琼脂糖凝胶结构均匀，含水量大(约占98%~99%)，近似自由电泳，样品扩散较自由电流，对样品吸附极微，因此电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好。3. 琼脂糖透明无紫外吸收，电泳过程和结果可直接用紫外光灯检测及定量测定。4. 电泳后区带易染色，样品极易洗脱，便于定量测定。制成干膜可长期保存。

血清分离胶最开始的作用也是为了分离血清和血块，从而让检测更加的迅捷和便利，现在更是演变出更多的作用，其中不得不提到的提取动物的血清，虽然鲜少听说，但是通过比重和其他指标数据的控制，是可以实现更加快速提取动物血清的。常规血清分离胶常用血清分离胶的比重基本就是1.045-1.065g/cm3之间，间于血细胞和血清之间，专用于体外人体血液样本分离，在采血后能够更完整的进行保存和运输，离心后短时间内符合医院检测要求。动物专用血清分离胶这是近几年来提取动物血清的一项进步，远慕生物在近几年接触到的动物专用血清分离胶的要求也是不少，由于提取动物一般都比较小，全血其实也没有太多，所以在尽可能的情况下是希望能够达到完全的提取血清，这就要求血清分离胶的比重要非常的精确，并且触变性能要非常好，这样才能达到这样的效果，到目前为止，如兔子，老鼠，猴子等动物的血清分离胶已经使用，提取效果还不错，但是在这个全新的领域还需要更多的探索。动物专用血清分离胶所要面临的问题虽然动物血清分离胶已经属于试用阶段，但是很多没有专业研发团队的血清分离胶生产厂家，势必会对动物血清分离胶有一定的影响，之前就有接触过说是能够完整的提取动物血清，但是最后交付的是体外人体血液的分离胶，完全不能满足动物血清提取。市场上真假需要甄别，不然还在萌芽阶段的动物专用血清分离胶就有可能被扼杀。辨别动物专用血清分离胶主要看什么其实血清分离胶在国内并不算发展太长时间，满打满算也才三四十年，现在在真空采血管中的发展还算是平稳，在动物提取血清上可以算作尝试，必须要重视的一点就是比重的问题，常规采购需要注意，一般厂家生产不可能一下子就提供动物专用的血清分离胶，因为这项技术并没有完整的形成一套体系，甚少有生产厂家知道，所以咨询动物专用血清分离胶，有实力的厂家都是需要进行比重的测试和实验室小试，短时间不可能拿货出来，这个周期需要根据其厂家实力而定。

血清为细胞生长提供必要的营养成分，可以说血清的品质直接影响细胞状况。市面上有着对血清进行辐照让实验更安全准确的说法，实际事这样的吗？我们来对比下血清辐照前后有什么区别。早在2004年之前，西北民族大学生命科学与工程学院的研究人员就用已知大肠杆菌噬菌体为阳性的同批新生牛血清进行过测试。他们选择了一系列不同的辐照剂量，具体为4、8、12、18、24、28、32、40、44、48kGy(所用剂量率为4.37Gy/min），检测了新生牛血清辐照前后的总蛋白含量，发现其总蛋白含量没有显著变化。他们又检查了辐照前后的大肠杆菌噬菌体。发现在辐射剂量≥8kGy时，能完全杀灭大肠杆菌噬菌体。他们还检测了辐照后血清的促细胞生长效应。他们把血清按10%比例添加到MEM中。在96孔板中，细胞培养接种浓度为1X104个/ml，每孔加0.2ml。结果发现，辐照剂量＜16kGy时，辐照后的新生牛血清和辐照前比，Vero细胞的最大增殖浓度无显著性差异（P＞0.05）。在辐照剂量＜24kGy时，Vero细胞的倍增时间也无显著性差异（P＞0.05）。但辐照剂量＞24kGy时，Vero细胞的倍增时间则明显延长1。血清产品使用注意事项（仅供参考）：血清解冻采用逐步解冻法（-20℃→2—8℃→25℃或37℃），解冻过程中必须随时轻摇，使血清受热温度均匀。血清凝絮物，血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出，这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物，实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活，请严格按照56℃30分钟（水浴）处理已解冻血清。常温状态下短期融化并不会影响血清质量。产品有效期，检定合格之日起有效期5年。

现如今生命科学事业蓬勃发展，国内越来越多的实验室开始做细胞培养相关实验，如果你打算活着正在打算做下面的内容一定会对你有所帮助。1、选择正确的培养基在养细胞之前，就要了解，你所养细胞的来源以及种类和名称，查阅一定量的文献，确定所需培养液种类以及是否需要添加特殊成分，常用的细胞培养液有DMEM、RPMI1640、F12等等，一些常见的细胞基本可以使用这几种培养基中的一种来培养，有的需要加入一定其他成分，这需要根据不同的细胞类型，查ATCC细胞库或者查文献，才能找到所需最佳培养液。选择正确的培养液是养好细胞的第一步。2、了解细胞的生长习性不同的细胞生长习性不同。如成纤维细胞是贴壁生长，有一定的密度依赖性，密度小可能会出现不增殖，状态差的情况，接种密度大时则需要隔天传代，频繁传代则影响细胞状态；再如RPMI-8226人多发性骨髓瘤细胞，是悬浮生长的，传代需离心弃去上清即可。总之，了解细胞生长习性，再加上正确的计数，才能掌握好传代的密度。3、选择优质的血清血清中含有细胞生长所必须的生长因子，作为哺乳动物细胞培养的附加物，血清的添加是十分重要的，因此，选择优质的血清，是细胞养殖成功与否的关键！4、及时传代和更换培养液在细胞增殖到一定的密度后，要及时传代，根据细胞的生长速度和密度，及时更换培养液。更换过勤，浪费培养液，更换不够及时，则细胞状态转差，一般需隔天更换培养液，具体可根据所养细胞种类予以调整。5、绝对的无菌意识前面林林总总全部都注意好了，如果无菌意识差，细胞中混入了微生物，则千里之堤溃于蚁穴，细菌的生长速度和破坏力，将迅速占领培养皿，破坏细胞结构，有些初学者会在培养液中加入1%的双抗，但是，无菌意识不强，双抗亦无法拯救你的细胞！6、倾心的呵护，频繁的观察做到以上几点，就可以开始养你的细胞了，但是再次重申细胞娇弱，在养细胞的过程中，难免会出现一些意想不到的问题，要想成功养好细胞，时时惦记它 ，频繁地观察，初期一天观察2次都不足为过，出现任何预料外的情况，及时处理，才能保障收获一盘“漂亮”的细胞。

是不是在质粒提取过程中总会碰到提取的质粒浓度不够或者纯度不够的情况？其实经常提质粒之后，会发现提质粒是一项非常简单且基本的实验操作。但如果真问起一些质粒提取的一些细节，可能很多人回答不了。不信随我看看。首先，质粒的提取可分为质粒小提、质粒中提、质粒大提。目前大多数实验室都选用试剂盒方法来提取质粒，可以根据不同的实验需求，来选择相应的试剂盒。质粒小提主要是对于1ml-5ml的大肠杆菌菌液中质粒DNA进行小量提取，获得的质粒用来进行常规的载体构建实验。而质粒中提，是在质粒小提的基础上进一步去除菌液中的内毒素，获得的质粒可以用于细胞转染，常规需要菌液量为10-15ml。质粒大提与中提方法相同，一次可对100ml-200ml菌液进行抽提，从而获得大量质粒。10大问题，帮您解决在质粒提取过程中遇到的最基本的困惑1.质粒制备的基本原理是什么？在分子生物学实验中，大多数人都做过质粒提取，但并不是所有的人都知道质粒制备的基本原则。碱裂解法是提取质粒最常用的方法。质粒先是被转化到大肠杆菌中，然后挑选单菌落接种到含有特定抗生素的培养基中，当培养的大肠杆菌达到生产的平台期时（一般为12到16个小时），通过高速离心开始收集大肠杆菌；使用试剂盒的悬浮液把菌体全部重悬并用SDS-NaOH进行裂解。因为SDS是一种很强的去污剂，可以把细胞膜中的蛋白质和磷脂抽提出来，从而使细胞内的物质得到释放，而NaOH是强碱，可以让蛋白质、染色体DNA和质粒DNA进行变性；当菌体彻底裂解了以后，再加入酸性醋酸钾,用来中和碱性裂解液，同时变性蛋白质、变性基因组DNA和细胞碎片形成沉淀，但是在上清溶液中，存在正确复性的质粒DNA，通过离心，可以收集上清溶液。最后通过试剂盒的核酸吸附材料，来对上清液中的质粒DNA进行回收。2.质粒DNA制备的关键是什么？使用碱裂解法制备质粒的关键是把握好SDS-NaOH处理菌体的时间。如果质粒长时间处于碱性环境，就有可能出现不可逆的变性反应，使得最终提取出来的质粒中含有变性质粒。这些变性质粒，由于不能进行酶切反应，所以无法进行实验。3.质粒中基因组污染是怎么产生的？当在质粒提取过程中变性和中和的步骤处理不当时，就会参数基因组污染。如果在提取中进行溶液混合时，操作过于剧烈，就会导致基因组DNA被剪切成小片段，最后在中和时同质粒DNA一起复性保存在上清溶液中，同时被回收出来。4.如何确定质粒小抽细胞的用量？对于一般的载体构建等常规实验，几微克的DNA就足够使用了。因此一般小提5ml菌液，都能够满足要求。如果使用过量的细胞，由于试剂盒的限制，会很难把菌液裂解等，而且DNA的纯度和得率并不会显著提高。所以对于需要大量的质粒时，因考虑更换提取试剂盒或者按比例提高各溶液的用量。5.电泳分析抽提的质粒会看到什么？如果是制备出来纯度非常差的质粒，那么从电泳加样孔往下，您看到的条带依次是基因组DNA，开环环装质粒（opencircularplasmid），超螺旋质粒(SuperCoiled)，变性的超螺旋质粒（denaturedsupercoiledplasmid），细菌RNA。高质量质粒胶图主要部分为超螺旋质粒，没有RNA等的污染。6.质粒制备的得率是由哪些因素决定的？属主细胞类型、大肠杆菌的数量、质粒的拷贝数和提取过程中使用纯化方式（试剂盒类型）。7.您的质粒需要什么样的纯度？同样对于一般的载体构建等常规实验和送去测序检测的话，用手工和试剂盒制备的DNA都能达到要求。如果是质粒需要用来做细胞转染实验的话，则需要无热源，无内毒素（LPS）。8.为什么酶切鉴定“有插入片段”的质粒测序却发现是空的？产生这种现象的最主要的原因是提取质粒的过程中产生了变性的超螺旋质粒，限制性内切酶无法对它进行酶切。所以在判断酶切效果时通过电泳进行分析，变性的超螺旋质粒常常被误认为是酶切下来的片段，导致误判。其实只需要在酶切后的电泳分析增加一个原始质粒进行对照就可以避免误判。9.如何判定DNA的纯度和浓度？使用试剂盒抽提的质粒DNA，可以通过仪器检测OD260和OD280浓度，通常OD260/OD280的比值在1.7-1.8之间。估算质粒浓度可以通过琼脂糖电泳来判断会更准确一些。10.为什么有些纯化的质粒时间长了会发生降解？如何解决？产生这个问题的原因有很多，主要还是因为核酸酶的污染。除了在质粒提取过程中会带入核酸酶外，根据有关报道发现，质粒属主细胞的种类也会影响到抽提质粒的质量。如果提取的质粒需要长期保存，可以使用内含丰富的核酸酶活性的大肠杆菌，比如DH5α,DH1,HB101等。

原理：在受体细胞经过化学试剂或者电击处理等方法处理后，受体细胞的膜通透性发生改变，质粒DNA或者以其为载体的重组DNA分子，进入到细菌体内而实现扩增。感受态细胞：是指细胞自然或者经过诱导处于容易吸收外源DNA的一种生理状态。在基因工程中，用于转化的受体菌（Restriction-Modification 缺陷变异株，以防止对导入外源DNA进行切割）一般通过诱导的方式实现。主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大，直观的说，使得细胞膜表面出现一些孔洞，便于外源基因或载体进入感受态细胞。由于细胞膜的流动性，这种孔洞会被细胞自身所修复。质粒的转化主要包含Ⅰ感受态细胞制备Ⅱ质粒DNA转化Ⅲ质粒DNA的提取（Ⅰ）感受态细胞制备1）从新活化的大肠杆菌（常用DH5a）平板上挑取一个单菌落，接种于3ml LB培养基的试管中，37℃振荡培养过夜。2）将该菌悬液按照1:100转接到液体培养基中，100ml，37℃振荡扩大培养，2~3h。当培养液开始浑浊时，间段性测试OD600，在数值为0.3-0.5时停止培养。3）培养好的菌液转移到离心管中，冰上放置20min，0℃-4℃离心10min（4000r/min）。4）弃掉上清，管口倒置以便培养液弃除干净。5）加入0.1mol/L冰冷的氯化钙溶液30ml，小心悬浮沉淀细胞，冰浴30min。（氯化钙的浓度和纯度非常重要，不同批次不同厂家的产品均可影响感受态转化率）6）4℃离心10min（4000r/min）。7）弃掉上清，用0.1mol/L氯化钙2ml冰浴悬浮细胞（冰上放置）片刻，感受态细胞制成。8）可直接用于实验，4℃保存。也可分装长期保存，加入总体积15%的灭菌甘油，-70℃条件下保存。（Ⅱ）质粒DNA的转化1）取100ul新鲜制备的感受态细胞，加入质粒1ul DNA混匀,同时设置对照组（未加质粒，未加受体菌，已知具有转化活性的DNA）。冷冻的感受态细胞要在冰上解冻，待管中zui后一点冰融化后，迅即加入DNA. 解冻感受态细胞温度高于0℃，会降低转化效率。2）冰浴30min，离心管放到42℃保温90s（不要摇动离心管）。冰浴时间短于30min ,可能影响转化率。然后迅速冰浴2min。3）向离心管加800ulLB液体培养基，37℃振荡培养1h（150r/min）。37℃生长1小时能够对于细胞恢复和抗生素抗药性表达具有zui佳效果。4）取适当（50ul）的复苏细胞培养液，涂布在含抗性的选择性培养基上，将培养皿放置在37℃恒温培养箱中，正置30min。等菌液完全被培养基吸收后，倒置培养皿，在37℃恒温培养箱中，培养12~16h，出现菌落。5）菌落结果：① 无菌落失败或者培养条件不充分② 布满菌落,呈苔样，失败。可能是抗生素浓度不够或失败。出现大菌斑，大多是由于霉菌污染所致③ 布满菌落浓度太高，失败④ 出现菌落符合要求Ⅲ）质粒DNA的提取质粒DNA的提取，由于其本身分子量小，一般采用碱裂解法提取。目前已研发出多种质粒提取试剂盒，实验操作简单，只需按照产品操作说明操作即可。不过对于其中主要试剂和作用的理解，能够避免实验过程中的一些问题，或者能够geng好的解决问题。

一、病毒载体系统病毒载体介导基因技术，一种的基因转移工具，将外源基因包装到天然病毒的外壳中，利用病毒对宿主细胞的感染性，将外源基因导入特定细胞中，广泛应用于基因诊断和基因治疗。二、慢病毒包装简介病毒有很多种，常见的有慢病毒和腺病毒。慢病毒(Lentivirus)载体是以人类免疫缺陷丨型病毒(HIV-1)为基础发展起来的基因载体。慢病毒是一种逆转录病毒，能使外源基因整合入宿主的基因组稳定、长期表达，比一般的逆转录病毒具有更高的滴度和更广的宿主范围。携带外源基因的慢病毒载体与包装载体(产生病毒颗粒所需的辅助蛋白)一同转染包装细胞，即可进行病毒的包装；包装好的慢病毒为假型病毒（毒感染目的细胞后不会再感染其他细胞，也不会利用宿主细胞产生新的病毒颗粒，慢病毒中的毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代），然后分泌到细胞外的培养基中，经过离心取得上清液，再浓缩后的慢病毒液可以直接用于宿主细胞的感染，目的基因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，从而实现外源基因在宿主细胞中的表达。三、慢病毒载体系统慢病毒载体系统：包装成分和载体成分。产生慢病毒颗粒的辅助成分：慢病毒包装质粒和包装细胞系。慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息，与包装成分互补，即含有包装、逆转录和整合所需的HIV顺式作用序列，同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。慢病毒包装成分：由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建，能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白。包装成分通常被分开构建到两个质粒上，一个质粒表达Gag和Pol蛋白，另一个质粒表达Env蛋白，其目的也是降低恢复成野生型病毒的可能。将包装成分与载体成分的3个质粒共转染包装细胞(如人肾293T细胞)，即可在细胞上清中收获只有一次性感染能力而无复制能力的、携带目的基因的HIV-1载体颗粒。四、病毒包装实验步骤1、目的基因真核表达载体构建流程图2、质粒DNA和其他包装质粒共转染293T细胞3、慢病毒感染细胞感染步骤：①铺板：将对数生长期的细胞消化重悬后，按1*105/L密度接种于12孔板，生长过夜。②感染：将70-80%铺满12孔板中的培养液吸除，换新鲜的培养液，同时加入PBS浓度梯度稀释的病毒液，混合均匀后即可放入孵箱培养。③24h左右可换液，48小时即可看荧光，具体根据细胞状态来看。4、感染后细胞检测方法蛋白提取及Western检测western-Bloting：蛋白免疫印迹，一般由凝胶电泳、样品的印迹和免疫学检测三个部分组成。步是做 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳，使待测样品中的蛋白质按分子量大小在凝胶中分成带。第二步把凝胶中已分成条带的蛋白质转移到一种固相支持物上， 用得多的材料是硝酸纤维素膜(NC 膜)和 PVDF 膜， 蛋白转移的方法多用电泳转移 （转移电泳），它又有半干法和湿法之分，现在大多用湿法。第三步是用特异性的抗体检测出已经印迹在膜上的所要研究的相应抗原。免疫检测的方法可以是直接的和间接的。现在多用间接免疫酶标的方法，在用特异性的抗体杂交结合后，再用酶标的第二抗体（碱性磷酸酶（AP）或辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗抗体的抗体）杂交结合，再加酶的底物显色或者通过膜上的颜色或 X 光底片上暴光的条带来显示抗原的存在。该技术被广泛应用于蛋白质表达水平的检测

实验室生物污染的消毒(1)实验室安全柜、实验台面及地面污染后消毒。实验时如果发现微生物污染了实验地面,应立即停下实验,进行消毒处理。首先将局部暴露部位用含有消毒剂吸水性好的多层纱布(或纸巾)覆盖暴露表面，覆盖面积要超过暴露面积25%,然后喷洒消毒剂(如0. 8%~1%过氧-乙酸或0.5%的次氯-酸钠),覆盖30 min后，小心地将吸水材料及被其吸收的液体或/和覆盖的试验样品一起放人到事先准备好的耐高压污物袋中。意外污染 消毒遵循有机材料原则,0.8%~1%过氟-乙酸(或0.5%的次氯-酸钠)、75%乙醇溶液或0.05%新洁尔灭几种消毒剂选择使用。(2)离心管破损后的消毒。装有含微生物液体的离心管如果发生破裂或机器正在运行时怀疑发生破裂，应关闭机器电源,让机器密闭静置30 min。如果机器停止后发现破裂,应立即将盖子盖上，让机器密闭30 min。当清理玻璃碎片时应当用镊子或用镊子夹着棉花进行。所有破碎的离心管、玻璃碎片、吊篮、十字轴和转子都应放在75%酒精消毒液内浸泡24h后,然后高压灭菌。未破损的带盖离心管应放在不同容器内75%酒精消毒液中,浸泡60 min后再取出。离心机内腔应当用75%酒精消毒液擦拭，放置过后再擦拭一次，然后用水擦洗并干燥。清理时所使用的所有材料都应当按感染性废弃物处置。（3)可能污染冰箱的消毒处理。将可能污染的冰箱、冰柜外表面用0.05%的将冰箱:冰柜放置在特制的大托盘上，托盘面积大于消毒粉剂,使消毒粉与化冻水混合后有效氯的含量大于1000 mg/Le打开冰箱、冰柜，清点内在物品,并根据需要对样品作相应的处理。清点光平后，格林箱冰柜存电化冻将化冻水小心地收集在容器内，按有效氯1g/L的量将消毒剂投入污水中。搅匀，作用30 min,冰箱冰柜内、外表面用0. 05%的新洁尔灭或0.8%的过氧-乙酸喷洒或擦拭消毒，作用30min,用清水擦洗冰箱、冰柜内外表面，然后用干布擦干。在清理消毒过程中，如有不小心打碎容器或污染环境的地方应进行喷洒0.8%过氧-乙酸溶液或2 g/L的含氯消毒剂，覆盖污染区域，进行消毒处理。如操作者所穿戴的防护用品受到污染时,应立即停止工作，进行消毒处理。处理方法为:对于防护服应立即向污染的部位喷洒0. 5%过氧-乙酸溶液或2 g/L含氯消毒剂,然后将其小心地脱下,放人黄色塑料袋中。对其他污染的防护用品应小心脱摘下,浸人0.5%过氧-乙酸溶液或2g/L的含氯消毒剂中浸泡30min。

底物显色是最后一步，也是最有文章可做的一步。显色的标记方式有生物素标记、地高辛标记、各种酶标记等等，酶标的底物又有各种生色底物、化学发光法底物和荧光底物可供选择，显色方法多种多样，下面我们针对常用的几类方法进行总结对比分析，供大家方便在以后实验中根据自己需求进行选择。酶促反应较生物素安全且反应快速，是wb 中的主流显色方法。酶促反应根据不同底物显色方法又包括化学发光和底物显色。化学发光法灵敏度高，可以达到pg级，而底物显色由于直接显色而操作简单且成本低。最为大家所熟悉的底物显色当数hrp（辣根过氧化物酶，horseradish peroxidase ）和ap（碱性磷酸酶，alkaline phosphatase ）。hrp这是最常见的酶促发光或显色的交联酶，由于hrp 比活高、分子量小、特异性强、稳定性好和作用底物范围广的优点而得到广泛使用。hrp的底物主要包括化学发光底物和生色底物两大类，对于底物的选择，主要考虑的是灵敏度、背景和使用的方便性和稳定性。1 生色底物生色底物显色主要是利用底物在有hrp 和h2o2的存在下失去电子而呈现出颜色变化积累这一过程检测wb 的结果。生色底物主要包括dab、4-cn、cn/dab、aec和tmb等。表1对这4种生色底物从不同方面进行比较。其中，dab应该是最熟悉的底物，灵敏度高，特异性好，缺点就是需要现配现用，显色后光照数小时会褪色，不能永久保存，而且有毒。4-cn反差大容易拍照，可与dab联用。tmb的信噪比高，成分安全，特别合适于灵敏度要求高的wb，但是也要避免由于灵敏度高而引起的高背景，因此可以相应的延长封闭的时间和注意洗涤的次数。aec各方面性质与dab相似，但灵敏度要差一点。 2 化学发光底物化学发光底物最常用的是鲁米诺（luminol ），化学发光法由于仅在酶和底物都存在的时候才会发光，不同于生色反应，所以特别适合在同一张膜上对不同的目标蛋白分别进行多次检测。目前最高检测灵敏度已经达到低飞克（femto）级别，成为安全且灵敏度最高的wb检测方法。ecl 在许多研究人员心目中的几乎成为化学发光法的代名词，也是文章的保证之一。一般含有鲁米诺、h2o2和发光增强剂等物质。发光试剂中的鲁米诺被hrp 和h2o2氧化，产生荧光，这个过程被发光增强剂加强。其中，增强剂在体系中扮演着核心角色，决定着ecl 化学发光的发展。化学发光的常见问题主要是抗体浓度过高，所以抗体用量要比规定的稀释倍数放大，确保不会因为hrp过量导致底物过快消耗完而引起结果不稳定。apap 作为一种经典常用的显色交联酶，自有其优点，如ap的底物显然更稳定。ap显色的灵敏度已经可以达到低pg级，但前提是封闭要做得好。常用的ap包括bcip（5- 溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐）、nbt（四唑硝基蓝）和int （硝基四紫唑），以及它们之间的组合使用，如表2。 这其中，bcip/nbt是碱性磷酸酶最佳的底物组合之一，其灵敏度最高，显色比较锐利，成像性也比较好，因此最常被用到。各种显色方法均有其优缺点和适用范围，上面这些介绍让大家对各种产品的优点缺点一览无遗，希望这些内容可以给大家带来帮助，早日成为一个wb 高手。当然，还要提醒大家，注意操作时佩戴手套，部分显色试剂有毒性，避免与皮肤直接接触，记得用后及时彻底冲洗。

验收的方式可以是：(1)采用不同标准物质间相互比对,如不同制造商、同一制造商的不同批号、用一级标准物质对二级标准物质进行核查;(2)通过实验室间比对确认量值;(3)送有资质的校准机构进行校准;(4)测试近期参加过水平测试结果满意的样品、检测足够稳定的不确定度与被核查对象相近的实验室质量控制样品,采用t 检验法进行确认。其他抗生素标准品、对照品的使用保存，还需注意以下几点：(1)正确开启 抗生素标准品、对照品大多置玻璃安瓿中保存，启开时必须严格防止玻璃屑掉入瓶中。具体可按如下操作：轻微震敲安瓿，尽量使内容物聚集于底部，砂轮切割几圈后，平置或头部略向下斜置安瓿，带好防护手套，双手拇指顶住颈部发力，注意拇指与食指不要捏得过紧，以免捏碎头部。启开安瓿后，将安瓿稍许向下倾斜，轻微振敲，因玻璃屑较重，若混入内容物中，此法可将其振出。(2)开启使用过后，应严格密封，或转移至经100℃以上烘干后并置干燥器中冷却至室温的西林瓶中，密封，置干燥器中，某些品种应按使用说明再置冰箱中冷藏。对于易吸潮的标准品、对照品，如西索米星等，若用于含量测定，应启开后立即使用，剩余部分日后可用于鉴别，但建议不要再用于含量测定;对于引湿性较弱、稳定性良好的品种，如氯霉素等，启开后若保存得当，亦可用于含量测定，使用时间视储存条件而定，必要时做期间检查。(3)对于过期的标准品、对照品，如欲继续保存，则需单独放置，以免混淆。必要时(如中检所缺货)，亦可应急使用，可用于鉴别。如用于定量，则需有溯源核查数据保证。

无特殊规定时，有效期及复标期如下：1、如无特殊情况，工作标准品的含量每半年复标一次或另取新生产的样品标定。当标准品暂不使用时，复标周期可能超过规定周期，在使用前进行复标，合格后可以继续使用。2、对于特定市场使用的工作标准品，复标可以按照当地药政局或者药典的规定的周期来进行。3 、标准品若在使用过程中发现异常或者较大变化，应停止使用该标准品，并考虑采用geng严格的包装和保存方式或缩短其复标期等措施。4、若老的基准标准品批号过期，则用此批基准标准品标定过的相应的工作标准品应按照新批号基准标准品进行重新标定，用此批标准品配制的储备溶液也应同时失效，应用新的批号基准标准品重新配制。5、基准标准品 按说明书要求，若标签或者化验单上没有指明有效期(失效期)，可以到网站上查询，如USP，EP 标准品目录单，若无法查到，同本厂规定此种药品的有效期，若无法得知此批的标定日期，可以从收到标准品日期算起。6、对于省药检所，兽药检所标定的工作标准品，有效期(失效期)同该产品的有效期。标准品一般在0℃~10℃之间冷藏保存（原则上保存在15℃以下的阴凉处），但相对于产品运输时，并不是所有产品的运输温度与储存温度一致，冷冻保存的温度在0℃以下。有些产品在运输时有暂时升温的可能性，个别产品特殊要求，我们将冷藏运输。为了增加稳定性，化学对照品的包装应能防潮、避光和抗氧化。一般固体韧应分装在可重新封闭的容器内，以便于多次使用.液体或易潮解物质分装在熔封的玻璃安瓶内。易氧化的物质可充氮包装。化学对照品的保存应以提高物质稳定性为原则.尽可能在干燥、低温条件下储藏。但易吸湿潮解的样品在普通冰箱或冷库中保存会因相对湿度较高而降低其稳定性.必须置密封容器中。

标准品分为基准标准品、工作标准品和杂质标准品，那么基准标准品和工作标准品有什么区别呢?下面小编来给大家介绍。1、基准标准品又分为法定基准标准品和内部基准标准品两类。法定标准品包括：中国药品生物制品检定所(NICPBP)提供的国家标准品(CP 标准品)、美国药典委员会(USP)提供的USP标准品、欧洲EDQM委员会提供的EP标准品、JP标准品、BP标准品及其它WHO、ISA标准品等官方渠道得到的标准品。 2、工作标准品包括：企业内部标定的工作标准品、科研单位或合同实验室标定的工作标准品、其他厂家在认证实验室标定的标准品。3、杂质标准品分为定性用杂质标准品及定量用杂质标准品，来源于法定标准品或自制杂质对照品。远慕生物专注标准物质研发与生产,供应标准物质,标准品,标准溶液,对照品,标准样品,滴定标液,单标,混标定制服务。

提起化学试剂的使用，不得不先从它们的流通管理说起，否则，都不知道它们是从哪儿来的不是吗？化学试剂的流通管理化学试剂的购买：每月由负责人，根据库存量及化学试剂检验需要量提出购买计划，经批准，由物资部采购员购买。化学试剂的入库：购买后由化学试剂管理员接收并入库，入库后填写入库记录。化学试剂的发放：化验室人员提出领用申请，经负责人批准后，到化学试剂库领取，化学试剂库管理员填写领用记录，化学试剂库管理员与领用人分别签字。领用时注意：化学试剂也是有等级的，别弄混！化学试剂回收处理1、固体废弃物分类：干燥的固体试剂；色谱分离用的吸附剂；用过的滤纸片；测定熔点的废玻璃管，一些碎玻璃。处理方法：回收；盛放在指定的容器中；有毒性的，先经过处理，减少其毒性。2、水溶性废弃物特点：水溶性；具有一定的毒性。处理方法：化学处理，酸性或碱性物质先中和，并且用大量水冲洗干净。不随便倒入下水道。3、有机溶剂特点：通常是不溶于水的；有很高的易燃性。处置方法：倒入贴有合适标签的容器分类存放；在合适的地方将这些溶剂点燃，而不应当倒入下水道。化学试剂安全守则在实验室工作时，必须在思想上十分重视安全问题，决不能麻痹大意。1、所用药品、标样、溶液都应有标签。绝对不要在容器内装入与标签不相符的物品。2、对于易燃、易爆的物质要安放在离火较远又安全的地方，操作时要严格遵守操作规程。3、涉及有毒、有刺激性气体都要在通风橱内或室内通风较安全的地方进行。有时要借助于嗅觉判别少量的气体，决不能将鼻子直接对着瓶口或管口，而应当用手将少量气体轻轻扇向自己的鼻孔后再嗅。4、加热、浓缩液体的操作要十分小心，不能俯视加热的液体、加热的试管口，更不能对着自己或别人。5、有毒-药品（如重铬酸钾、钡盐、铅盐、砷的化合物、汞及汞化合物、氰-化物等）不得进入口内或接触伤口，剩余的废液及金属片不许倒入下水道，应倒入回收容器内后集中处理。6、浓酸、浓碱具有强腐蚀性，使用时，切勿溅在衣服或皮肤上，尤其是眼睛上。稀释时应在不断搅拌（必要时加以冷却）下将它们慢慢倒入水中。特别是稀释浓硫酸时更要小心，千万不可把水加入浓硫酸里，以免溅出烧伤。7、实验结束后及时将所剩余试剂放回试剂室。8、严格按照实验的操作规程进行实验，绝对不允许随意混合各类化学药品。9、水、电及其他各种气体使用完毕应立即关闭。10、实验室内严禁饮食、吸烟。实验完毕应洗净双手后再离开实验室。如何预防化学试剂变质预防化学试剂变质的10种小妙招：1、防氧化：亚硫酸钠、硫酸亚铁、硫代硫酸钠均易被氧化，瓶口应涂腊。2、防碳酸化：硅酸钠、过氧化钠、苛性碱均易吸收二氧化碳，应该涂腊。3、防风化：晶体碳酸钠、晶体硫酸铜应进行腊封，存放在地下室中。4、防分解：碳酸氢铵、浓硝酸受热易分解，涂腊后，存放在地下室中。5、活性炭能吸附多种气体而变质，（木炭亦同），应放在干燥器中。6、黄磷遇空气易自燃，永远保存水中，每15天查水一次：磷试剂瓶中加水、置于有水水糟中，上加钟罩封闭。7、钾、钠保存在煤油中。8、硫酸亚铁溶液中滴几滴稀硫酸，加入过量细铁粉，进行腊封。9、葡萄糖溶液容易霉变，稍加几滴甲醛即可保存。10、甲醛易聚合，应开瓶后立即加少量甲醇；乙醛则加乙醇。基准物质应该如何保存冰箱4℃以下保存，有效期一般2年左右，超过有效期的基准试剂一般我们用来自己内部考核使用，没有过保质期的当作标准使用。小结：为安全起见，在使用化学试剂时必须对其全面了解，在使用时采取有针对性的防范措施，切不可麻痹大意，避免由于使用不当造成对实验人员及实验设备的危害！ 

　　关于化学试剂的分类，一般分为易燃易爆类、有毒类、腐蚀性类、强氧化性类、遇水易燃类、放射性类等六种。大家都知道在工厂、学校、医院和研究所的日常工作中，都离不开化学试剂，而且它本身也具备一定的危险性，该怎么管理好，以及它本身具有什么特性都需要特别清楚，下面小编就来给大家简单介绍下。　　1、易燃易爆类　　一般都将闪点在25℃以下化学试剂列入易燃化学试剂，它们多是极易挥发的液体，遇明火即可燃烧。闪点越低，越易燃烧。使用易燃化学试剂时绝不能使用明火，加热也不能直接用加热器，一般不用水浴加热。在使用易燃化学试剂的试验人员，要穿好必要的防护用具，最好戴上防护眼镜。　　2、有毒类　　大部分化学试剂对人体都有毒害，在使用时一定要避免大量吸入; 在使用完试剂后，要及时洗手，洗脸洗澡，更换工作服，对于一些吸入或食入少量即能中毒致死的化学试剂，如: 氰化钾、氰化钠及其氰化物；三氧化二砷等砷化物、二氯化汞及某些汞盐等，在使用时一定要了解这些试剂中毒时的急救处理方法，剧毒试剂一定要有专人保管，严格控制使用量。　　3、腐蚀性化学类　　当这些试剂碰到皮肤、粘膜、眼、呼吸器官时都要及时清理，特别是对皮肤、粘膜、眼睛、呼吸器官有极强腐蚀性的化学试剂，如各种酸和碱、三氯化磷、溴、苯酚等。在使用前一定要了解接触到这些腐蚀性化学试剂的急救处理方法，如酸溅到皮肤上要用碱液清洗等。　　4、强氧化性类　　强氧化性类都是过氧化后是含有强氧化能力的含氧酸及其盐，如过氧化氢、硝酸钾、高氯酸及其盐、高锰酸钾及其盐过氧化苯甲酸、五氧化二磷等。再适当的条件下可放出氧发生爆炸，并且与有机物、铝、锌粉硫等易燃物形成爆炸性混合物，在使用时环境温度不高于30℃，通风要良好，并不要与有机物或还原性物质共同使用。　　5、遇水易燃类　　这类化学试剂有钾、钠、锂、钙、电石等等，遇水即可发生激烈反应，并放出大量热，也可燃烧，在使用时要避免与水直接接触，也不要与人体直接接触，以免灼伤皮肤。　　6、放射性类　　使用这类化学试剂时，一定要按放射性物质使用方法，采取保护措施。其它类的危险化学试剂，无论常用不常用，在使用前一定要了解它的安全使用注意事项，方可使用。　　在试验过程中由于操作不当或疏忽大意必然导致事故的发生，所以在遇到事故发生时要能正确处置，具备冷静的头脑，1不要惊慌失措，2要及时正确处理，3要严格按规范操作，尽量避免事故发生。例如，浓硫酸稀释时，浓硫酸应沿着容器的内壁慢慢注入水中，边加边搅拌使热量均匀扩散。在做有毒气体的实验中，应尽量在通风橱中进行。不慎将苯酚沾到手上时，应立即用酒精擦洗，再用水冲洗等。　　以上就是给大家整理的六类化学试剂基本注意事项，不知道有没有给大家带来一些帮助呢？作为实验室工作人员，不但要了解化学试剂的注意事项，还要及时做好各种试剂管理。对于传统的人工管理来说，确实费时费力。

　　化学试剂是通过合成或半合成的方式制成的原料及其制剂，其产品质量涉及国民健康、社会稳定和经济发展。化学试剂检测、成分分析广泛用于物质的合成、分离、定性和定量分析，与工厂、学校、医院和研究所等日常工作息息相关。　　化学试剂检测范围：　　化学试剂、通用试剂、分析试剂、诊断试剂、教学试剂、实验试剂、分离工具、缓冲溶液、指示试剂、生物染色素、感光材料、合成试剂、中间体、化工原料、水质分析、残留农药测试、分子生物学试剂等　　化学试剂检测项目：　　性能检测：澄清度试验、色度、易碳化物质、水不溶物、水混溶性试验、蒸发残渣、灼烧残渣、灰分、密度、比旋光度、折光率、沸程、沸点、熔点、结晶点、砷、硅、磷酸盐、硫酸盐、氯化物、草酸盐、硫化合物、铵、羟基化合物等　　分析项目：含量测试、成分鉴定、成分分析和配方还原等　　化学试剂检测标准：　　GB 605-88《化学试剂色度测定通用方法》　　GB 611-88《化学试剂密度测定通用方法》　　GB 613-88《化学试剂比旋光度测定通用方法》　　GB 615-88《化学试剂沸程测定通用方法》　　GB 616-88《化学试剂沸点测定通用方法》　　GB 617-88《化学试剂熔点范围测定通用方法》　　GB 618-88《化学试剂结晶点测定通用方法》　　GB 9727-88《化学试剂磷酸盐测定通用方法》　　GB 9728-88《化学试剂硫酸盐测定通用方法》　　GB 9729-88《化学试剂氯化物测定通用方法》　　GB 9730-88《化学试剂草酸盐测定通用方法》　　GB 9731-88《化学试剂硫化合物测定通用方法》

　　什么是溶液，什么是标准溶液?事实上有很多人经常将两者混淆，常规来说，溶液指的是多种或最少两种物质组成的混合物，而标准溶液则是具有准确已知浓度的试剂溶液，但标准溶液是属溶液，虽然两者有着明显的区别。下面小编来给大家详细介绍一下标准溶液与溶液的区别。　　标准溶液与溶液的区别：　　溶液是由至少两种物质组成的均一、稳定的混合物，被分散的物质(溶质)以分子或更小的质点分散于另一物质(溶剂)中。物质在常温时有固体、液体和气体三种状态。　　溶液的均一性包含密度，组成，性质都一样，除此外，溶液还分为饱和溶液和不饱和溶液。　　标准溶液是容量分析中常用的一种滴定溶液，靠它测得待测物的含量。靠它求得未知溶液的浓度。在其他的分析方法中用标准溶液绘制工作曲线或作计算标准。　　有些标准溶液由于很不稳定，以至难以配制和使用，因此是不能利用的。　　这样的标准溶液包括硫化氢(H2S)、二氧-化氯(ClO2)、溶解氧(DO)和臭氧(O3)。液-氯标准溶液只能配制成高浓度溶液，所以必须加入高纯水进行稀释，并且使用不会消耗液-氯的玻璃器皿。　　远慕专注标准物质研发与产,供应标准物质,标准品,标准溶液,对照品,标准样品,滴定标液,单标,混标定制服务。

　　微生物，地球上历史最为悠久的生物，存在于地球超过30亿年之久，见证了地球数十亿年的变迁，是地球上“元老级”的生物。　　它个体微小，与人类关系密切。涵盖了有益跟有害的众多种类，广泛涉及食品、医药、工农业、材料、环保、体育等诸多领域。　　微生物是指个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称，包括细菌、病毒、真菌和少数藻类等。　　在中国大陆地区的教科书中，均将微生物划分为以下7大类：细菌、病毒、真菌、立克次氏体、支原体、衣原体、螺旋体。　　最近蔓延全球的新-冠疫-情，掀起了一股科普的风潮。想要真正探究微生物的奥秘，就从细菌、真菌、病毒三类最常见的微生物开始了解吧！　　细菌　　细菌，我们日常接触最多的微生物，其基本形态呈杆状、球状、螺旋状，由细胞壁、细胞膜、细胞质等构成，是细胞内没有成形细胞核的单细胞原核微生物。[ii]　　在温暖潮湿且营养丰富的环境中，细菌以极快的速度繁殖，如二分裂的繁殖方式，就是一个变两个，两个变四个。　　千百年来，人类时时刻刻在与细菌共存。细菌在生物圈中作为分解者，部分有害，部分有益。许多细菌还是人类的朋友，比如酸奶中的乳酸菌、益生菌都属于对人体有益的细菌。　　能够致病的细菌被称为致病菌，致病菌主要在细胞之外活动，靠与人体细胞争夺营养并释放毒性物质为生，抗生素就是细菌最大的克星。　　病毒　　病毒是所有微生物中结构最简单，形态最微小，仅有蛋白质和遗传物质组成的非细胞微生物，必须在活细胞内寄生并通过复制方式增殖。　　形态呈多面体（大蚊病毒），杆形（烟草花叶病毒），蝌蚪状（噬菌体）等。病毒个体十分微小，多数病毒在10--300纳米之间（百万分之一毫米），三万个拼接起来才有一个杆菌大小，所以病毒只能用电子显微镜才能看见。　　病毒没有细胞结构，因此它们不能独立生活，必须寄生在其他生物的细胞里才能体现生命活动，并通过接触、空气、水、伤口、血液和蚊虫叮咬等途径进行传播。　　病毒表面的蛋白质外壳使它更容易进入人体细胞内部进行增殖、遗传、变异，进而入侵我们体内的其他细胞，对抗生素并不敏感，这也是新冠病毒依然没有对抗药的最大原因。　　灭活后的病毒可以制成疫苗，注射后促使人体产生相应病毒的抗体，帮助人类抵抗病毒的侵害。　　真菌　　另一种常见的微生物为真菌，包括单细胞真菌（如酵母菌、类酵母菌等）和多细胞真菌（如青霉、曲霉等），细胞内有成形细胞核的真核微生物。　　真菌通过寄生和腐生吸取营养，其繁殖方式包括芽殖、裂殖、产生孢子、复制，在潮湿的环境下更易大量繁殖，如潮湿的地方容易长出剧毒的“蘑菇”。　　日常生活中，我们所接触的许多真菌对人类是有益的，如面粉发酵、做酱油、醋、酒等都是用真菌发酵，蘑菇、木耳、灵芝等也是属于真菌。　　真菌的致病性则体现在真菌性感染、条件性真菌性感染、过敏性真菌病、真菌毒素中毒症等。 真菌一般寄生在人体皮肤，是引起皮肤性疾病的元凶之一，皮癣就是最典型的真菌性疾病。　　简单来说，在日常生活中，我们所遇到的大部分疾病都是由微生物引起的，这种生物的存在的确给我们带来了不少的麻烦和困扰。　　但归根到底，我们无法完全躲避微生物的侵害。　　我们能做的是，在与微生物共生共存的条件下，最大程度减小微生物对我们的危害，增强免疫力、合理膳食、适量运动，或是购买高科技加持的抗菌产品，为日常生活提供多层保障。

 微生物研究领域在过去的几十年里发展迅速，已经成为一个重大的科学和公众利益的话题。然而我们对“微生物组”一词缺乏一个公认的明确定义。从微生物到微生物群落的历史许多技术发明推动了微生物的研究，导致我们对健康和疾病的理解发生了范式转变。显微镜的发明，让我们得以发现一个全新的未知的微生物世界。罗伯特·科赫（Robert Koch）对由于微生物感染而导致的人类和动物疾病起源的解释以及病原性概念的发展是微生物学的重要里程碑。DNA的发现，测序技术，PCR和克隆技术的发展使人们能够使用与培养无关，而是基于DNA和RNA的方法研究微生物群落。这些新的可能性彻底改变了微生物生态学，因为以高通量的方式进行基因组和宏基因组分析提供了有效的方法来解决单个微生物以及整个自然栖息地中整个群落的功能潜能。多项综述已强调了结合多种“组学”技术分析宿主微生物相互作用的巨大潜力和巨大潜力。微生物组定义通常将微生物群落定义为生活在一起的微生物的集合。更具体地说，微生物群落被定义为多物种集合，其中（微生物）有机体在连续的环境中彼此相互作用。微生物组的首次定义1988年，Whipps及其同事研究了根际微生物的生态学，首次定义了微生物组。他们将“微生物组”描述为“微生物”和“生物组”的组合，并在“具有明确的理化特性的合理定义的栖息地”中将“特征微生物群落”命名为“活动剧场”。该定义代表了微生物群落定义的实质性进步，因为它定义了具有不同特性和功能的微生物群落及其与环境的相互作用，从而形成了特定的生态位。微生物组的常用定义但是，在过去的几十年中，还发布了许多其他的微生物组定义。当前最常引用的定义是Lederberg将生态环境中的微生物群落描述为生物体空间或其他环境中的共栖，共生和致病微生物群落。Marchesi和Ravel集中在对特定环境下的基因组、微生物(和病毒)基因表达模式和蛋白质组以及生物和非生物条件的定义。所有这些定义暗示着宏观生态学的一般概念可以很容易地应用于微生物-微生物以及微生物与宿主的相互作用。然而，这些为大型真核生物开发的概念在多大程度上可应用于原核生物，这些原核生物具有不同的生活方式，如休眠，表型变异和水平基因转移以及目前尚不清楚的微型真核生物。这就提出了一个挑战，即要考虑一种全新的微生物组生态学概念生态模型和理论体系，特别是在微生物相互之间以及与宿主生物和非生物环境相互作用的不同层次上。许多当前的定义未能捕捉到这种复杂性，并且将术语“微生物组”描述为仅涵盖微生物的基因组。 例如，Merriam Webster发布平台提出了两种微生物组定义：一种描述宏基因组，另一种是微生物群落，但仍然无法将宿主和环境作为微生物组的整体生态成分而不是一个独立的实体来捕获。微生物组成员微生物群包括形成微生物组的所有活的成员。 下表解释了这两个词源的词源学和差异。细菌，古细菌，真菌，藻类和小的原生生物应被视为微生物组的成员。大多数微生物组研究人员都同意这一定义。噬菌体，病毒，质粒和移动遗传元件的整合是微生物组定义中最具争议的问题之一。 参与者在“微生物组定义”在线调查中的评论也证实了这一点。 受访者对病毒和噬菌体是否应属于微生物组这一问题的回答没有给出明确的答案，并且从“无论如何”延伸到“绝对没有”。关于来源于死细胞的细胞外DNA（所谓的“遗留DNA”）是否属于微生物组还没有明确的共识。在更广泛的生境分析中，残留DNA最多可占土壤中测序DNA的40％，平均占细菌总DNA的33％，在某些样品中最高比例为80％。有意思的是，尽管它非常丰富且无处不在，但遗留DNA对分类学和系统发育多样性的估计影响很小。 当使用特定术语时，微生物组和微生物群之间的清晰区分有助于避免有关微生物组成员的争议（下图）。微生物群通常被定义为存在于特定环境中的活微生物的集合。由于噬菌体，病毒，质粒，病毒，类病毒和游离DNA通常不被视为活微生物，因此它们不属于微生物群。

随着新-冠疫情的持续，越来越多的人意识到疫苗的重要性。目前，多个国家都在积极研发新-冠疫苗，并将其作为控制疫情、防止其扩散和反弹的“终-极杀器”。为什么要接种疫苗？有的人会说，疫苗可以产生抗体，抵御疾病。那么，什么是抗体呢？抗体就是我们每个人身体里的“小士兵”，是保护身体、消灭各种病原体的“好东西”。抗体可以通过 自然感染疾病痊愈后和 接种疫苗来获得，但两种途径获得的抗体水平、持久性因不同病原体而不同。今天我们来看看，接种各种疫苗后，产生的保护性抗体可以持续多久呢？接种疫苗后抗体的持续时间乙肝疫苗约95%的儿童接种乙肝疫苗后会免疫成功，有抗体应答者（抗-HBs≥10mIU/ml）的保护效果一般至少可持续30年。一般人群不需要进行抗体检测或加强免疫。卡介苗可达15-20年。国外部分研究发现可达50-60年。甲肝疫苗接种2剂甲肝灭活疫苗，模型预测抗体可持续30年甚至40年以上。麻疹疫苗在免疫成功的前提下，至少能够维持26～33年。我国研究表明，接种麻疹疫苗25年后，85%以上者仍有保护性抗体。脊髓灰质炎疫苗全程接种后，循环抗体可存在数十年甚至终生。但不同国家结论不同。乙脑疫苗部分亚洲国家研究显示，可产生至少11年的长期保护。破伤风疫苗接种4剂百白破疫苗可提供3-5年保护。6周岁加强后可以持续至育龄期（约25-30岁）。成年后每加强1剂可维持约10年。水痘疫苗研究显示，接种2剂水痘疫苗的7-10年后仍有抗体。但只接种1剂则仍会发病。带状疱疹疫苗上市时间较短，数据有限。目前认为接种后5年内的效果较好。流感嗜血杆菌（Hib）疫苗现有数据表明可持续5-10年。五价轮状病毒疫苗现有数据表面全程接种后3-7年依然可以有效保护。13价肺炎结合疫苗目前数据有限。目前认为婴幼儿接种后保护效果可持续2-6年不等。根据使用经验及持久性资料看，可能会geng长。23价肺炎多糖疫苗一般可维持5年以上。具有肺炎球菌高感染风险者（如患慢性疾病、免疫缺陷、肿瘤等）的老年人可能在5年后加强接种1剂。流感疫苗接种灭活流感疫苗可有效保护6至8个月。1年后抗体水平显著降低，但部分毒株可持续geng久。HPV（宫颈癌）疫苗二价和四价HPV疫苗接种后12年、九价HPV疫苗接种后至少7年，疫苗相关型别的抗体阳性率仍＞90%，且未发现相关癌前病变。模型预测可维持20-50年。EV71（手足口病）疫苗现有数据表明可持续至少5年。6岁以上儿童感染风险低。狂犬病虽然目前认为全程接种狂犬病疫苗后，抗体可以持续至少1年（部分研究发现接种9年后，80%的受种者依然可以查到抗体）。但鉴于狂犬病的致死率，再次受伤（II级暴露及以上）需要加强接种。非“上限”，也非“下限”特别提醒，上面各个数字是动态的，是因人而异的，受 接种年龄、疾病和健康状况、生活习惯等多方面因素影响，需要通过长期的、持续的、科学的 人群抗体水平监测研究来获得。即不代表该疫苗产生的抗体 “只能”维持这么久，也不表示每个人“都能”维持这么久。没有抗体，不等于没有保护目前还没有一种疫苗可以做到“接种了就肯定有抗体”。部分个体就算反复接种、频繁接种，也未必能达到100%的保护。不过，即便接种疫苗后未产生足够抗体，或者产生过抗体但转为阴性，也并不意味着没有免疫力。人体的免疫机制是多元的，主要有细胞免疫（A）和体液免疫（B）两部分。抗体检测仅能反映B，不能反映A。因此 并不是检测不到抗体就没有保护。此外，人体免疫系统也有免疫记忆，当再次接触到同一种病原体时，可以快速产生强大的免疫力。如果绝大多数人接种了疫苗，即便少数人没有接种疫苗或者免疫失败，只要身处于有免疫力的人群中，也不容易感染生病——从而预防、控制甚至消灭某种传染病。 这才是真正的群体免疫（Herd Immunity），这才是疫苗的真正作用！

　　“中和”"抗体”（Nautralizing Antibody）应该分两部分理解。首先是抗体，在这个层面上和普通抗体的概念重合，是机体免疫细胞被抗原激活后，由B淋巴细胞分化的浆细胞分泌的，能与相应抗原特异性结合的免疫球蛋白。除此之外，中和抗体显然还应该有专门针对“中和”的更进一层的含义，这里的中和是指该抗体能和病毒结合，进而阻断病毒感染。　　“中和抗体”如何阻断病毒感染　　主要通过三种方式来实现：　　阻断病毒与细胞表面受体的结合；　　阻断病毒侵入细胞；　　阻断病毒在细胞内脱衣壳。　　目前对于这种阻断的机制还不明确，但主流观点认为是中和抗体与病毒结合导致的空间位阻效应阻断了感染。　　“中和抗体滴度”是衡量抗体有效性的一个重要指标　　我们知道抗体通常会使用ELISA试剂盒来进行效价评估，那中和抗体也是通过ELISA来检测么？　　通常中和抗体是使用中和试验来评估其中和病毒的效力的。　　“中和抗体滴度”评估方法　　中和试验是指在体外适当的条件下，将病毒和中和抗体进行混合孵育，使他们发生反应，然后将二者的混合物接种到敏感的宿主体内（包括动物、鸡胚、细胞等），测定残存的病毒的感染力的方法。

要选一款合适的支原体检测试剂盒，有如下几个评价指标：1. 灵敏度。灵敏度常用支原体基因组的拷贝数或支原体菌株的CFU表示。2. 特异性和广谱性。质量好的试剂盒应检测的支原体物种越多越多，并且特异性强，即只针对支原体，不针对其他细菌等微生物，没有交叉反应。3. 稳定性。冻干粉比液体试剂的稳定性高。4. 样本类型及样本处理。一款好的试剂盒，会标出它适合的样本类型，也会说明如何处理样本。要注意有的样本含有抑制PCR反应的物质，因此需要处理。5. 对照品。一个好的试剂盒，会带有阳性对照和内控对照。内控对照是用于监测PCR是否正常。如果样本含有抑制PCR的物质，则内控对照的条带会发生缺失。有严重支原体污染的样本由于样本中的支原体对内控对照产生了竞争性抑制，因此支原体条带越强，内控条带越弱（下图）。图. 1. 100 bp DNA Ladder；2. 阴性对照，有内控条带；3. 阳性对照，有支原体阳性条带；4. 样本有PCR抑制剂；5.阴性样本；6.阳性样本，支原体污染较轻；7.阳性样本，支原体污染较重。图片来自Minerva Biolabs公司生产的Venor®GeM Advance支原体检测试剂盒说明书但支原体核酸检测法（NAT）并没有载入我国药典。我们药典指定的是支原体培养法和DNA染色法。但2018年《中国药事》第8期上，中国食品药品检定研究院刊发了一篇文章——《支原体检查的核酸检测方法及方法学验证的思考》，提出提出要与国际接轨，逐渐推进NAT的开展，因其“具有快速、灵敏、便捷等特点”。欧洲药典规定，核酸法如替代培养基，核酸法的灵敏度需达到10 CFU·mL-1；如替代DNA染色法，核酸法的灵敏度需达到100 CFU·mL-1。该文也提出，需对NAT进行特异性、最低检出限和耐用性的验证。因此，对于需要NAT法检查支原体的生物制品和细胞治疗产品企业，可选择试剂盒已经验证并提供有参比物质的知名品牌厂家，尽管后续仍需按照待测样本类型进行方法的适用性验证，并同步开展药典方法的平行检测研究，但已为NAT法检查支原体带来极大的方便。

    试剂的有效日期是影响实验结果准确性的重要因素。在实际使用过程中，人们总是习惯于用生产日期来判断化学试剂的有效性，其实这是不对的。今天为大家整理了化学试剂性质对有效期的影响，并在最后为大家介绍了一些有效的解决方案！    化学试剂不像食品和药品有严格的保质期，化学试剂一般没有保质期的具体要求和界限，这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关；要根据化学性质、保存条件等，再结合工作的实际情况判断试剂是否出现变质、能否继续使用。    化学试剂性质对有效期的影响    化学试剂一般没有注明保质期，确定试剂是否变质主要是凭经验和做新旧试剂对比试验。    化学试剂的有效期随着化学品的化学性质的改变，有着很大的区别。一般情况下，化学性质稳定的物质，保存有效期就越长，保存条件也简单。    一般遵循以下几个原则（一般原则，不是绝对原则）：    1、无机化合物    无机化合物，只要妥善保管，包装完好无损，理论上可以长期使用。但是容易氧化（如亚硫酸盐、苯酚、亚铁盐、碘化物、硫化物等应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放；水溶液亚硫酸、氢硫酸溶液要密封存放；钾、钠、白磷更要采用液封形式）、容易潮解的物质，在避光、阴凉、干燥的条件下，只能短时间（1～5年）内保存，具体要看包装和储存条件是否符合规定。    2、有机小分子量化合物    有机小分子量化合物一般挥发性较强，包装的密闭性要好，可以长时间保存（3～5年）。但容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等，在避光、阴凉、干燥的条件下，只能短时间（1～5年）内保存，具体要看包装和储存条件是否符合规定。    3、有机高分子    有机高分子，尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料，极易受到微生物、温度、光照的影响，而失去活性，或变质腐败，故此，要冷藏（冻）保存，而且时间也较短。    4、基准物质、标准物质和高纯物质    基准物质、标准物质和高纯物质，原则上要严格按照保存规定来保存，确保包装完好无损，避免受到化学环境的影响，而且保存时间不宜过长。一般情况下，基准物质必须在有效期内使用。在常（15℃~25℃）下保存时间一般不超过2个月。超过两个月要重新标定或检查之后再用。    5、培养基    培养基：按规定配制并消毒好培养基，冷至室温，保存在阴暗处（尽可能贮藏在冰箱内），配制好的培养基应在1个月内用完。    除另有规定外、试液、缓冲液、指示剂（液）的有效期均为半年。    液相用的流动相、纯化水有效期为15天。具体要看有机相合水相的比例。    除另有规定外，液体试剂开启后一年内有效，固体试剂开启后三年内有效。    试剂保存环境对有效期的影响    1、空气的影响：空气中的氧易使还原性试剂氧化而破坏。强碱性试剂易吸收二氧化碳而变成碳酸盐，水分可以使某些试剂潮解、结块；纤维、灰尘能使某些试剂还原、变色等。    2、温度的影响：试剂变质的速度与温度有关。夏季高温会加快不稳定试剂的分解；冬季严寒则促使甲醛聚合而沉淀变质。    3、光的影响：日光中的紫外线能加速某些试剂的化学反应而使其变质（例如银盐、汞盐、溴和碘的钾、钠、铵盐和某些酚类试剂）。    4、杂质的影响：不稳定试剂的纯净与否、对其变质情况的影响不容忽视。例如纯净的溴化汞实际上不受光的影响，而含有微量溴化亚汞或有机物杂质的溴化汞遇光易变黑。    5、贮存期的影响：不稳定试剂在长期贮存后可能发生歧化聚合，分解或沉淀等变化。在贮存期和有效期内液体如发现有分层、浑浊、变色、发霉等异常现象，流动相用于样品检测时，样品的保留时间或相对保留时间发生明显变化，固体如发现吸潮、变色等异常现象则应停止使用。    化学试剂的使用要求对有效期的影响：    依据使用的要求对化学试剂的有效期做出判断，最重要的一点是判断试剂对结果是否有影响，有影响需要缩短有效期，甚至是报废。    化学试剂的变质与防护    化学试剂在贮存过程中是否会发生变质，取决于内外两个方面的因素，内因是试剂本身化学结构所决定的理化性质；外因则是试剂所处的环境条件。要做到合理保管，一要了解试剂结构与性质间关系，二要创造适应试剂贮存的外部环境。    1、引发和促使化学试剂变质的原因    环境主要是指贮存的温度、光照和介质。介质一般是指空气和混有的杂质。贮存室里除空气中含有的氧、二氧化碳和水蒸气以外，还往往含有存放的各种挥发性试剂扩散到空气中的蒸气，常见的有氯化氢、硝酸、硫化氢、二氧化硫、溴、碘、乙烯、甲醛等蒸气；另外还有飘混在空气中的尘埃，其中有无机物也有有机物及各种微生物。    化学试剂在一定的温度、光照、介质条件下会逐渐变化以致变质，该过程有物理变化，亦有化学变化。前者使化学试剂产生损耗，后者则能使试剂完全变质失效。    引发和促使化学试剂发生变化的原因，大致可归纳如下。    a.挥发    挥发是挥发性试剂造成试剂损耗、浓度改变、规格下降的最常见的原因。挥发性试剂的一般特点是：分子量较小、沸点较低。常见的无机试剂有：浓盐酸、浓硝酸、发烟硫酸等，有机试剂则有碳原子数较少的液态物质，如：甲醇、乙醇、石油醚、汽油等。    b.升华    具有升华性质的一类试剂一般是升华热较少的分子晶体。实验室里一般有室温下升华的试剂（如碘萘等）和受热条件下升华的试剂（如硫与氯化汞）两种。这类试剂的升华主要造成损耗和污染空气。    c.潮解和稀释    能发生潮解的化学试剂为数不多，它们大部分是易溶性化合物，一般阴离子半径远小于阳离子半径，也有阴阳离子半径相近而阳离子所带电荷较多。此类试剂吸收水分在表面形成饱和溶液后，若产生的水蒸气气压小于空气中的水蒸气分压，潮解将继续进行，直至全部形成溶液。如：氢氧化钠、碱石灰等，有机物中易潮的有醋酸钠、醋酸铵等。稀释是指试剂溶液吸收空气中的水分导致浓度下降变稀的现象。发生原因与潮解一样，是外界水蒸气分压大于试剂的水蒸气分压所致。易发生稀释现象的常见试剂有浓硫酸、正磷酸、乙二醇等。    d.风化    风化的原因和潮解相反，是结晶水合物的水蒸气分压高于空气中水蒸气分压的缘故。空气越干燥，风化速度越快。    实验室中常见的易风化剂有：Na2CO3·10H2O、Na2SO4·7H2O、CuSO4·5H2O、MgSO4·7H2O、ZnSO4·7H2O等。发生风化虽未波及试剂的化学性质，但使试剂外观改变，质量减少。    e.浓缩和析晶    浓缩和析晶产生的原因是在环境干燥的条件下，试剂溶液的水蒸气压高于外界空气中水蒸气压，造成溶液水分的蒸发而浓缩、析晶，各种固体溶质的试剂一般均有此类现象，特别是一些浓度较大的溶液，浓缩和析晶虽对瓶中试剂性质影响不大，但也会改变其浓度、规格和外观。对某些溶点较低的有机物，在外界温度下降较大的情况下，也会发生析晶现象，比较明显的例子是冰醋酸。    f.水解    容易水解的盐类试剂大都具有共价键，凡是强酸和弱碱和弱酸和弱碱所生成的盐，遇水都会发生不同程度的水解。实验室中一些金属元素的卤化物很容易水解，如：TiCl 4、AlCl 3、FeCl 3、SnCl 2等，它们是带电荷高、半径小的阳离子化合物或是非惰气型的阳离子化合物。此类试剂可因易吸水水解而变质，易水解的有机物是含有酰基的化合物，如：酯、酰卤等物质。    g.分解    分解反应也是引发和促进试剂损耗和变质的原因。试剂的分解速度通常和环境温度密切相关。温度高分解速度加快，通常易分解的二元化合物其化学键键能较低。键能越低，越易分解，例如：碘化合物就比溴化物更易分解。有的分解反应还和试剂的含水量有关，如：硫酸氢铵，含水量越大，温度越高分解速度也越快。而含氧酸盐，如：硝酸盐、高锰酸盐则要在受热时才发生分解。    h.氧化和还原    通常易被氧化的是标准电极电位低，具有还原性的试剂，它的名称中常常带有“低”或“亚”字。还有部分活泼金属和非金属单质，过氧化物及某些有机试剂，常见的有硫酸亚铁、硫酸亚铁铵、亚硫酸、无水亚硫酸钠、钠、钾、钙、锌粉、还原铁粉、乙醛等。还原性越强的试剂越易因氧化而变质。使其氧化的原因是空气中的氧和具有氧化性的杂质所为。    标准电极电位较高的试剂，在以固态形式存在时，通常在空气中比较稳定，如：高锰酸钾、重铬酸钾等。但以溶液存在时就易和空气中的一些还原性杂质，如H2S，SO2等作用而变质，如：KMnO 4，Na 2S2SO4，K 3Fe（CN）6等溶液。    i.非氧化——还原反应    有些试剂的变质并非一定要引起元素价态的变化，即发生非氧化——还原反应也能使其失效。实验室中最常见的实例，如：生石灰因吸收水分变成熟石灰，进一步吸收二氧化碳而失效；氢氧化钠和氢氧化钾固体也因吸收二氧化碳而带有杂质，若长期暴露在空气中则完全转化成碳酸盐；此外氧化镁、氧化钡、氢氧化钡也应防止它们和空气中二氧化碳反应。    J.聚合和缩合    分子结构中含有不饱和双键或叁键的有机物质容易发生聚合，如：甲醛溶液常会聚合生成白色的三聚甲醛，氰化钾试剂也易聚合。有电荷高、半径小的中心离子形成的含氧酸盐溶液则能因缩合而析出多酸盐沉淀，如：钼酸铵溶液能缩合析出四钼酸铵沉淀，三聚甲醛经加热处理尚可重新释放出甲醛气体，但有些试剂，一旦发生聚合或缩合反应，往往是不可逆的，从而造成变质失效。    k.光化学反应    光作为一种能量也能使某些试剂反应而变质。光能引发分解反应导致银盐分解就是实例。光也能引发氧化反应，如：苯甲醛在光照下，易被空气氧化成苯甲酸，苯胺则能从无色变成棕色。此外，碘化汞、邻苯三酚、氯仿，硫酸汞、亚铁氰化钾等也易发生光化学反应。    l.霉变    所谓霉变则指在化学试剂中霉菌滋生繁殖的现象。在空气中尘埃里含有无数菌类微生物，在一定温度条件下就能繁衍。实验室中的碳水化合物，酯类、蛋白质类试剂，含有氮、硫、磷的有机试剂正是菌类繁衍的良好营养物质和温床。上述试剂只要密闭不严与空气有所接触皆可发生霉变。化学试剂因上述原因发生各种变化，通常借助颜色、形态、气味、数量增减均可察觉，而有的变化则需用实验方法方可判别，如：无水酒精是否已含有水分，只能用专门的试剂标准和检验方法加以测定才能确定。因此，科学贮存各类试剂乃是一种用心细致的工作，其中大有学问和文章可作。    2、防止与缓解化学试剂变质的方法和措施    为了保证化学教学、科研和化工生产的正常开展，降低试剂损耗，缓解试剂的变质，通常可采取以下方法与措施：    a.密封    这是最普遍通用的方法。试剂瓶的材料和密封程度应根据试剂性质而定。如：强腐蚀的“三酸”和液溴，可用带磨口玻璃的试剂瓶，或是有塑料衬垫的螺旋盖的玻璃瓶，氢氟酸则应密封贮藏在银制或塑料制容器内，等等。密封适用于易挥发、升华、潮解、稀释、风化、水解和氧化还原、霉变的所有化学试剂对于极易分解产生气体的试剂，一般不完全密封，要适当留有余地，否则可能使容器破裂。除了一般密封外，可再加蜡封，或用自制硝罗酊封口，如：三氯化铝、五氧化二磷等。    b.隔离    能和空气、水作用的试剂，如：很活泼的金属和非金属应隔离存放在对试剂相对而言稳定的液体或惰气之中，钾、钠、钙浸没在机油中，黄磷则浸没在水中贮放。这种隔离方法也称液封法，前者叫油封，后者叫水封。水封存也可使某些容易挥发的试剂减少损耗。    如：在装有液态溴、二硫化碳的试剂中加一薄层水，就能大大减少挥发损失和空气污染。实验室中无机、有机试剂种类繁多，性质各异，应注意合理分类存放。有机物、无机物分开，普通药品和危险的分开，氧化剂和易燃物、还原剂分解、易挥发性酸和碱分开。做到这几个分开，一可避免药品间的不良影响，二则即使有意外事故发生，也能免除药品的相互作用，而产生更大的隐患。    c.避光    通常采用遮光性能较好的深棕色试剂瓶。将试剂放在暗处或遮光的专用试剂柜中。也可用照相纸的黑色厚纸包裹试剂瓶，如：浓硝酸、碘化钾、碘化钠、氯化汞的贮存就是如此。    d.低温    普通挥发性试剂常放置在阴冷处，如：浓硝酸、浓盐酸、氨水等。某些特殊的生化试剂则要贮放在水箱或冰箱之中，如：酶试剂等。    e.通风    尽管装化学试剂的容器一般都处于密封状态，但也难免有跑、冒、漏、泄发生，在夏季高温天气，更易形成爆炸性混合气体，因此，贮藏室必须通风良好，应安装专用排风扇，并经常开启，使空气流通。    f.适时    这是根据某些试剂的特性，特别是一些极易变质失效的试剂应采取适当措施，应做到适时配制、适时使用和及时处理。如：极易氧化的氢硫酸溶液、氯水、溴水、碘水最好适时制备及时使用；做银镜反应的硝酸银溶液、氨水、乙醛溶液配好后，应及时使用才不致影响效果；硫酸亚铁溶液配好后应加些还原铁粉才能使其不被氧化；淀粉、蔗糖、蛋白质的溶液在使用后应及时清洗试剂瓶，以防霉变。上述诸种试剂在配制时除应注意适时外，配制数量也应根据需要而定，以免过剩造成浪费。

    傻傻分不清楚的化学试剂，你选对了吗？今天小编就带大家来了解一下国内外的化学试剂都是怎么分类标识的：    我国化学试剂的分类方法    我国的化学试剂基本上按纯度(杂质含量的多少)划分，共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要有优级纯、分级纯和化学纯3种。    (1)优级纯(GR)，又称一级品或保证试剂，99.8%，这种试剂纯度最高，杂质含量最低，适合于重要精密的分析工作和科学研究工作，使用绿色瓶签。    (2)分析纯(AR)，又称二级试剂，纯度很高，99.7%，略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作，使用红色瓶签。    (3)化学纯(CP)，又称三级试剂，≥ 99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。    (4)实验试剂(LR)，又称四级试剂。    (5)基准试剂(PT)，专门作为基准物用，可直接配制标准溶液。    (6)光谱纯试剂(SP)，表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出，所以有时主成分达不到99.9%以上，使用时必须注意，特别是作基准物时，必须进行标定。    (7)高纯试剂(≥ 99.99%)。纯度远高于优级纯    国外试剂的分类方法    目前，国外试剂厂生产的化学试剂常按用途划分，常见的如下： 生化试剂 (BC：Biochemical) 、生物试剂 (BR：Biological reagent) 、生物染色剂 (BS：Biological Stain) 络合滴定用 (FCM：For Complexometry) 、层析用 (FCP：For chromatography purpose) 、荧光分析(FIA)、 微生物用(FMB) 、显微镜用 (FMP：For microscopic purpose)、 合成用 (FS：For synthesis) 、气相色谱 (GC：Gas chromatography)、 高效液相色谱 (HPLC：High Pressure Liquid chromatography) 、指示剂 (Ind：Indicator) 红外吸收(IR)、 液相色谱(LC) 、核磁共振(NMR) 、有机分析标准 (OSA：Organic analytical standard) 、分析用(PA：Pro analysis)、 实习用 (Pract： Practical use) 、合成(SYN) 工业用（Tech：Techincal grade) 、薄层色谱(TLC：Thin Layer chromatography) 、分光纯、光学纯、紫析分光光度纯(UV：Ultra violet pure）。    生化学试剂购买小贴士：    1.购买时要注意试剂标签的名称(包括俗名)、类别、产品标准、含量、规格、生产厂家、出厂批号(或生产日期)。    2.到货后及时填写验收、入库、领用记录。试剂开瓶时写上开瓶日期和限用日期（根据自己的使用情况规定3-5年）然后用不干胶贴在不遮挡标志的空白处。    3.购买化学试剂一定要在有正规进货渠道的正规供应商处购买按照国家标准和化工部行业标准生产的试剂。