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明胶液化试验步骤

2021-11-05 15:43

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原理:指细菌把明胶胶分解成液状的现象。这种能力可因细菌种类不同而有显著差异,因此很早以来就被用来作为鉴别、测定细菌的一种特征。例如:葡萄球菌属、变形菌属、芽孢杆菌属均具有液化能力,而大肠杆菌就无这种液化能力。由于明胶是在热水中溶解胶原(collagen)而成的蛋白质,因此,它是由产生于体外的蛋白酶进行分解的。用血清或蛋清清蛋白代替明胶也可看到大致相同的现象。 试验方法:挑取18~24h待试菌培养物,以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度或点种于平板培养基。于20~22℃培养7~14天。明胶高层亦可培养于36±1℃。每天观察结果,若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再观察其是否被细菌液化,如确被液化,即为试验阳性。平板试验结果的观察为在培养基平板点种的菌落上滴加试剂,若为阳性,10~20min后,菌落周围应出现清晰带环。否则为阴性。 注意事项: (1)如有的菌在20℃不生长则在30℃培养生长后,观察时放冰箱或冷水中降温,待对照管凝固后再记录。 (2)灭菌过高或过低易影响结果,一般用115℃蒸汽灭菌15min较为合适。

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