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乳酸手性拆分标准及案例分享

广州绿百草

2021/07/02 11:01

阅读:196

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乳酸,化学名为2-羟基丙酸,其结构中含有手性碳原子,存在旋光异构体,可分为L-乳酸和D-乳酸。


由于人体只有代谢L-乳酸的L-乳酸脱氢酶,所以WHO规定人体对D-乳酸的日摄入量应少于100mg/kg,对L-乳酸无限制。

                                     

因此,在食品和医药行业中往往需要对L-乳酸及D-乳酸进行拆分与定量。


目前乳酸手性分离常用的方法有酶法、GC法、毛细管电泳法和HPLC法等等

其中HPLC法的精密度和准确度较好,能快速、灵敏和高效地分离L-乳酸和D-乳酸,企业与研究单位多选择此法来测定。




However,小编遇到过许多刚做乳酸手性分离的同学,

在选择了HPLC方法后,却不知道应该如何选柱子??


甚至有大意的同学买了根做有机酸的柱子回去做实验,在实验室忙活大半天都做不出来,问了小编才知道是柱子选错了。


为了帮助各位刚做乳酸手性分离的朋友能正确选择色谱柱,小编在这里给大家分享:


乳酸分析对应的国家标准和几个常用手性柱的应用,看看哪款色谱柱趁手?


 食品安全 国家标准食品添加剂乳酸 

1.GB 1886.173-2016


图片

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根据标准,符合标准要求有以下4款色谱柱:


01

乳酸对映异构体的痕量测定



  色谱条件  

色谱柱:Astec CLC-L(4.6*150mm,5μm)

柱温:25°C

流动相:5mmol/L CuSO4

流速:1mL/min

检测波长:254nm

进样量:10 μL  



1

Sigma Astec CLC-L(4.6mm*150mm,5μm)

货号:53123AST

固定相:硅胶表面共价键合L-脯氨酸衍生物(L32)


02

L-乳酸与D-乳酸含量测定




   色谱条件   

色谱柱:飞诺美Chirex 3126(D)-penicillamine(4.6 ×150 mm)

流动相:1mmol/L CuSO4溶液

流速:1mL/min

检测波长:254 nm



2

飞诺美Chirex 3126(D)-penicillamine(4.6 ×150 mm)

货号:00F-3126-E0

固定相:硅胶表面键合青霉胺


03

高效液相法对L-乳酸与D-乳酸的测定



   色谱条件   

色谱柱:CHIRALPAK MA(+)(4.6×50mm,3μm)

流动相:2mmol/LCuSO4

流速:0.35mL/min

柱温:15°C

检测波长:254nm



3

大赛璐CHIRALPAK MA(+)(4.6×50mm,3μm)

货号:21822

固定相:硅胶表面涂敷有N,N-二辛基-L-丙氨酸


04

秸秆发酵液中L-乳酸与D-乳酸含量测定


发酵液样品


   色谱条件   

色谱柱:三菱化学MCIGEL CRS10W(4.6×50mm,3μm)

流动相:0.5g/LCuSO4

流速:0.7mL/min

柱温:40°C

检测波长:254nm

进样量:20μL



4

三菱化学MCIGEL CRS10W(4.6×50mm,3μm)

货号:CRS10W

固定相:硅胶表面键合光学活性体N,N-二辛基-L-丙氨酸




有一个点大家一定要注意!!(敲黑板)


除了乳酸外,乳酸盐也有相应的国家标准,色谱条件可是和乳酸有稍稍不同的哦~


 食品安全 国家标准食品添加剂乳酸钠(溶液) 

2.GB 25537-2010


图片

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根据标准,符合标准要求的色谱柱有:


   

乳酸盐测定



1

大赛璐CHIRALPAK MA(+)(4.6×50mm,3μm)

货号:21822

固定相:硅胶表面涂敷有N,N-二辛基-L-丙氨酸


2

三菱化学MCIGEL CRS10W(4.6×50mm,3μm)

货号:CRS10W

固定相:硅胶表面键合光学活性体N,N-二辛基-L-丙氨酸



图片


接着我们还可以看看关于乳酸锌的标准


 食品安全 国家标准食品营养强化剂乳酸锌 

3.GB 1903.11-2015



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根据标准,符合标准要求的色谱柱有:


   

营养强化剂乳酸锌中L-乳酸锌的测定


(乳酸锌样品)


   色谱条件   

色谱柱:SUMICHIRAL OA-5000(4.6×150mm ,5μm)

流动相:1 mmol/L CuSO4•5H2O

检测波长:254 nm

流速:1.0mL/min

柱温:30°C

进样量:5 μL



1

住友SUMICHIRAL OA-5000(4.6×150mm ,5μm)

货号:OA-5000

固定相:硅胶表面键合青霉胺


看到这里,总有过目即忘的同学已经不记得小编推荐的色谱柱了!
都不知道心疼人的……好气!


宝,看看下面的表,什么表?小编的体贴溢于言表!
图片.png
看到这里的都是爱学习的好宝宝!
宝,懂得如何选乳酸手性拆分分析柱了吗?


小编平时经常会收到客户问各种有关色谱柱的问题,例如:

1.OA-5000和OA-5000L有什么区别?

2.新柱子如何活化?

3.有什么方法可以延长色谱柱寿命?

4.如何缩短保留时间,提高峰形的对称性?

5.色谱柱进了甲醇还有救吗?

如果大家需要解决色谱柱使用的问题,或者担心柱子做不出漂亮的谱图想试用,或者想色谱柱的使用说明书,都可以加微信撩我们的技术猿哦~

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