经典PBS配方

PBS配方 经典配方

A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：

磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。

B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：

酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。

pH －－ A液 （ml） －－ B液（ml）

5.60 －－ 9.50 －－ 0.25

5.91 －－ 9.00 －－ 1.00

6.24 －－ 8.00 －－ 2.00

6.47 －－ 7.00 －－ 3.00

6.64 －－ 6.00 －－ 4.00

6.81 －－ 5.00 －－ 5.00

6.98 －－ 4.00 －－ 6.00

7.17 －－ 3.00 －－ 7.00

7.38 －－ 2.00 －－ 8.00

7.73 －－ 1.00 －－ 9.00

8.04 －－ 0.50 －－ 9.50

一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4?12H2O（磷酸氢二钠）
NaH2PO4?2H2O（磷酸二氢钠）Nacl
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾

称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M

PBS缓冲液
称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。

PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是我的总结：

母液的配制：

0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制：
先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可，如：
0.1M PB（PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。


若需要 NaCL 的话，加入 NaCL 至0.9%（g/100ml）即可。

另：其它各种另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方 ：
pH       0.2M NaH2PO4（ml）   0.2M Na2HPO4（ml）
5.7             93.5                          6.5
5.8             92                             8            
5.9             90                             10
6.0             87.7                          12.3
6.1             85                             15
6.2             81.5                          18.5
6.3             77.5                          22.5
6.4             73.5                          26.5
6.5             68.5                          31.5
6.6             62.5                          37.5
6.7             56.5                          43.5
6.8             51                            49
6.9              45                           55
7.0              38                           62
7.1              33                           67
7.2             28                            72
7.3              23                           77
7.4              19ml                         81ml
7.5              16                           84
7.6              13                           87
7.7             10.5                          0.5
7.8              8.5                          91.5
7.9             7                              93
8.0             5.3                           94.7

磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB），磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液配方

磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）

试剂： NaH2PO4·2H2O    Na2HPO4·12H2O

配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

（1）0.2mol/L的 Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取NaHPO4.·12H2O 71.632g（或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。

（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。

0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）

pH  0.2mol/L NaH2PO4(ml)   0.2mol/L Na2HPO4(ml)

5.7          93.5                       6.5

5.8          92.0                       8.0

5.9          90.0                     10.0

6.0          87.7                     12.3

6.1          85.0                     15.0

6.2          81.5                     18.5

6.3          77.5                     22.5

6.4          73.5                     26.5

6.5          68.5                     31.5

6.6          62.5                     37.5

6.7          56.5                     43.5

6.8          51.0                     49.0

6.9          45.0                     55.0

7.0          39.0                     61.0

7.1          33.0                     67.0

7.2          28.0                     72.0

7.3          23.0                     67.0

7.4          19.0                     81.0

7.5          16.0                     84.0

7.6          13.0                     87.0

7.7          10.5                     89.5

7.8             8.5                     91.5

7.9            7.0                    93.0

8.0            5.3                    94.7

[font=黑体][font=楷体_GB2312][font=宋体][size=2]关于磷酸缓冲溶液的知识，我在网上搜索了好多帖子，但是还是不能确定正确的答案。现在把他们链接过来，希望有高手们参与讨论，我会把最终的正确解答整理出来，提供给大家。

PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是
1.磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）、
2.磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline）及
3.磷酸盐缓冲钠（phosphate buffered sodium），
其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。
如无特殊说明，生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）。
(来自百度知道)

无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）
（0.15Mol/L PH 7.2）
NaCl 8.0g
KCl 0.2g
Na2HPO4 1.15g
（如为Na2HPO4·12H2O，则为2.89g）
KH2PO4 0.2g
将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。