大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒厂商报价测定中,应对包被抗原或抗体的浓度和酶标抗原或抗体的浓度予以选择,以达到最合适的测定条件和节省测定费用。
1.酶标抗抗体工作浓度的选择
(1)用100ng/ml人IgG进行包被,洗涤。
(2)将酶标抗人IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗涤。
(3)加底物显色。加酸终止反应后,读取吸光度(A),绘制曲线如图15-10。读取A值在1.0时的酶标抗稀释度,作为酶标抗体的工作浓度。该酶标抗人IgG的工作浓度应为1/1600。
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒厂商报价测定方法
n 制定测定方案
n 正确制备试剂
n 包被缓冲液、洗涤液、标本稀释液、结合物稀释液、底物工作液和酶反应终止液等,都要小心配制。
n 蒸馏水最好使用新鲜重蒸馏的。不合格的蒸馏水可使空白值升高。
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒厂商报价常用酶辣根过氧化酶(HRP)
1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。
2. 是一种糖蛋白,含糖量约18%;分子量为44kD。
3. 是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合而成的一种卟啉蛋白质。
4. 主酶为无色糖蛋白,在275nm波长处有最高吸收峰;辅基是深棕色的含铁卟啉环,在403nm波长处有最高吸收峰。
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