一、DLD-1 人结直肠腺癌上皮细胞(STR鉴定)基本信息
细胞名称
| DLD-1 人结直肠腺癌上皮细胞(STR鉴定) |
别称
| DLD-1,人结直肠腺癌细胞 |
货号
| XY-H251 |
规格
| 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 |
种属来源 | 人
|
组织来源 | 结直肠 |
细胞类型
| 肿瘤细胞 |
生长方式
| 贴壁生长 |
描述
| 详见说明 |
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
冻存液配方
| 无血清细胞冻存液(XYC90100)
|
换液频率
| 2-3天
|
传代周期
| 详见说明 |
传代比例
| 1:2至1:3,每周 3次 |
供应限制
| 仅供研究之用。
|
细胞货期
| 2-3天左右
|
二、细胞培养操作
1. 细胞复苏
1.1 离心法
第一步:准备一个 T25 的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,一支 15ml离心管,离心管中加入 4-5ml 细胞完全培养基。
第二步:取出细胞冻存管,在 37 度水浴中快速解冻,将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
第三步:将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中,1000 转离心 5 分钟。
第四步:倒掉上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
第五步: 将重悬好的细胞转移到 T25 细胞培养瓶,补充培养基到 8ml 左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
1.2 不离心法
第一步:准备一个 T25 的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,培养瓶中加入 8ml 左右培养基。
第二步: 取出细胞冻存管,在 37 度水浴中快速解冻,将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
第三步:将细胞悬液转移到加有培养基的培养瓶中,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养,接种 16 小时后更换培养基。
2. 细胞传代
第一步:准备细胞完全培养基,细胞培养瓶,胰酶(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA),DPBS。
第二步:弃上清,并加 2-3mlDPBS 轻柔冲洗培养瓶内细胞 1-2 次。
第三步:加入 1ml 胰酶,室温或者 37 度消化,直到细胞成片脱落,加入 3-4ml 完全培养基终止消化,如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。
第四步:收集细胞悬液,1000 转离心 5 分钟,弃上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
第五步:将重悬好的细胞按比例分装至 T25 细胞培养瓶,补充培养基到 8ml 左右,十字摇晃, 将细胞铺匀后放入培养箱培养。
3. 细胞冻存
第一步:准备细胞冻存液,细胞冻存管,胰酶(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA),DPBS。
第二步:弃上清,并加 2-3mlDPBS 轻柔冲洗培养瓶内细胞 1-2 次。
第三步:加入 1ml 胰酶,室温或者 37 度消化,直到细胞成片脱落,加入完全培养基终止消化,如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。
第四步:收集细胞悬液,1000 转离心 5 分钟,弃上清。
第五步:加入冻存液,重悬细胞,并分装到冻存管,冻存密度 0.8-1.5×106 细胞/ml。
第六步:将冻存管放入程序降温盒,并放到-80℃冰箱,过夜后将冻存管转移到液氮保存。
三、细胞系收货须知
收到的货物会包含以下几种类型,您的货物属于:
1. 细胞冻存管:收到货物后,请检查箱子里面是否还有干冰。
1.1 若干冰已剩余不多,不能掩埋冻存管,请及时拍照,并第一时间联系销售。
1.2 若干冰充裕,可以安排复苏细胞;不安排复苏,请将细胞冻存管转移到液氮进行保存。短期(一周内)的存放可以放在-80 冰箱,建议最好保存在液氮中。
2. 培养瓶的活细胞:收到请检查培养瓶是否完好,是否有漏液,培养基是否浑浊
2.1 若出现以上问题请于当天和我们销售取得联系,我们会第一时间为您处理。
2.2 若以上问题都没有出现:拆掉培养瓶的外包装,在显微镜下对细胞进行多个视野,不同倍镜拍照。然后用酒精对瓶身进行彻底消毒,放在 37 度二氧化碳培养箱中进行复温。1-2 小时后,拿出在显微镜下观察,并进行多个视野不同倍镜拍照。若细胞达到了可以传代的密度,请及时进行传代。若细胞密度不能进行传代,请回收培养瓶中的培养基,留适量培养基在瓶中,并将培养瓶放在培养箱继续培养即可。
3. 消化后的细胞悬液:收到请检查管子是否有漏液
3.1 若漏液,请当天和我们销售取得联系,我们会第一时间为您处理。
3.2 若完好,将管子用酒精彻底消毒,收集细胞悬液到离心管,1000 转,离心 5 分钟,弃上清,加入培养基重悬,按照比例分装到 T25 培养瓶,并补充培养基到 ml 即可。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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