LB培养基的作用及配置

LB培养基的作用及配置

LB培养基是微生物学实验中最常用的培养基，用于培养大肠杆菌等细菌。其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。早LB培养基中加入抗生素还可用于大肠杆菌为宿主的克隆。LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源於英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤.

LB培养基的配置：

成分：

胰蛋白胨(tryptone) 10g；

酵母提取物(yeast extract) 5g；

氯化钠(NaCl) 10g；

配制方法：

　　（1）称量 分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl，置于烧杯中；

　　（2）溶化 加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中，用玻棒搅拌，使药品全部溶化；

（3）调pH 用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2；

　　（4）定容 将溶液倒入量筒中，加水至所需体积；

　　（5）加琼脂 加入所需量琼脂，加热融化，补足失水；

　　（6）分装、加塞、包扎；

　　（7）高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min；

固体培养基另加 琼脂粉 15-20g；

LB固体培养基1L和液体一样，加10g~15g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗

生素，并且倒好板。

LB固体培养基倒板：

1.配制：100mlLB培养基加入1~1.5g琼脂粉

2.抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置于55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时（手可触摸）加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。

3.倒板：一般15ml-20ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟。

4.保存：用封口胶封边，并倒置放于4℃保存，一个月内使用。

LB培养基与琼脂培养基之间的两大区别：

区别一：琼脂培养基就是加了琼脂粉凝结成固体的LB培养基。固体的培养基用于细菌涂板，抗性筛选挑选单克隆之用 液体的用于单克隆菌种扩大培养，提取目的基因或者蛋白之用。

区别之二：就是LB培养基是液体的，而营养琼脂培养基(牛肉膏蛋白胨培养基)是固体 具体的配方问题—— LB培养基的配方如下: 胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 5g/L。另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4，然后来培养E-coli。 营养琼脂培养基配方： 牛肉膏 0.3g 蛋白胨 1g 氯化钠 0.5g 琼脂 2g 自来水 100mL pH 7.0～7.2。