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ELISA实验需要注意温育问题
ELISA实验需要注意温育问题
ELISA实验中影响测定成败最为关键的一个因素,那就是温育。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，如果要让液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，需要在一定的温度条件下反应一定的时间。
在使用Elisa试剂盒进行实验时，需要注意温育问题。
温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。
一些操作者，擅自改变说明书操作，使用自己喜欢的温育时间和温育温度，这样造成一些不必要的麻烦。因为，不同试剂盒有不同的温育时间和温育温度的选择，随意更改温育时间或者温育温度将导致试验结果出现偏差。
保温方式: ELISA仪器附有特制的电热块，水浴。
若用保温箱: ELISA板放在湿盒内，在盒底垫湿的纱布，最后将ELISA板放在湿纱布上。反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。
室温温育的反应，操作时的室温应严格限制在规定的范围内，标准室温温度是指20-25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板同时测定。
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