本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上[1],标记完后取上清用Sephedex G200 凝胶层析进行纯化,洗脱液为0.2mol/L pH7.4的PBS,流速为15ml/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度计测A280吸光度值,以洗脱体积为横坐标,吸光值为纵坐标做图,收集第一峰即为酶标抗体峰。小鼠亚硫酸盐氧化酶(SUOX)ELISA试剂盒
标记完后用紫外分光光度计在分别在280nm、及403nm处测定酶标记物的A值,计算免疫球蛋白量、摩尔比值、酶结合率以及标记率。
1.2 包被用缓冲液及最适包被抗原浓度的优化
1.2.1 包被缓冲液的优化
小鼠亚硫酸盐氧化酶(SUOX)ELISA试剂盒包被抗原时,为了得到最佳的包被效果,我们采用了碳酸盐缓冲液(50mM ph9.6 )、磷酸盐缓冲液(50mM ph7.6)、以及TRIS盐酸缓冲液(50 mM ph7.6)三种缓冲液作为包被液,抗原包被浓度为5ug/ml,及2.5ug/ml,酶标抗体工作浓度为1:400及1:300,用自动酶标仪分析,选择最佳的包被缓冲液系统。同时为了保证缓冲液能够长期保存,我们在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作为防腐剂。
临床考核血清盘的制备要求 1、 采用人的原血清; 2、 血清盘应具有相应的稳定性; 3、 血清盘中样本不含防腐剂,或只含极微量的、不影响检验结果的防腐剂; 4、 血清盘所包含的阴性样本和阳性样本约各占一半; 5、 阳性样本中,应有一定数量的强阳性和弱阳性样本; 6、 血清盘中应有一定数量的临界值上、下含量的样品,以检验试剂的灵敏度。 7、 血清盘中应包含与该项检验相关的病种样本和已积知具有干扰物质(RF因子)的样本, 以检验试剂的特异性。小鼠亚硫酸盐氧化酶(SUOX)ELISA试剂盒
正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。小鼠亚硫酸盐氧化酶(SUOX)ELISA试剂盒
HZA523Hu 人血小板衍生生长因子AA(PDGFAA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor AA (PDGFAA)
HZC450Hu 人细胞外基质蛋白1(ECM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Extracellular Matrix Protein 1 (ECM1)
HZB882Hu 人成纤维细胞生长因子10(FGF10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 10 (FGF10)
AEA268Hu 人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Anti-Smooth Muscle Antibody (ASMA)
HZA274Hu 人胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6 (IGFBP6)
HZA273Hu 人抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Inhibin Binding Protein (INHBP)
HZA272Hu 人转运蛋白1(TNPO1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transportin 1 (TNPO1)
HZA231Hu 人尿皮质素1(UCN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Urocortin 1 (UCN1)
HZD063Hu 人70kDa热休克蛋白8(HSPA8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 8 (HSPA8)
AED245Hu 人抗谷氨酸脱羧酶抗体(Anti-GAD)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Anti-Glutamic Acid Decarboxylase Antibodies (Anti-GAD)
HZA302Hu 人半乳糖凝集素2(GAL2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 2 (GAL2)
HZA304Hu 人半乳糖凝集素4(GAL4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 4 (GAL4)
HZA233Hu 人蛋白激酶Cη(PKCη)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protein Kinase C Eta (PKCh)
HZC319Hu 人芳香酶(ARO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aromatase (ARO)
HZA257Eq 人Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Procollagen II N-Terminal Propeptide (PIINP)
HZA308Hu 人半乳糖凝集素8(GAL8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 8 (GAL8)
HZC442Hu 人双肾上腺皮质激素(DCX)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Doublecortin (DCX)
HZD195Hu 人Ⅲ型胶原α1(COL3α1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type III Alpha 1 (COL3a1)
HZA312Hu 人半乳糖凝集素12(GAL12)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 12 (GAL12)
HZA321Hu 人半乳糖凝集素1(GAL1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 1 (GAL1)
HZA322Hu 人基质金属蛋白酶15(MMP15)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15)
HZA012Hu 人S100钙结合蛋白(S100)ELISA试剂盒 ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein (S100)
HZA492Hu 人角蛋白1(KRT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Keratin 1 (KRT1)
HZB897Hu 人胰岛素降解酶(IDE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin Degrading Enzyme (IDE)
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