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大鼠 (Rat) CD45分子 ELISA 检测试剂盒

上海信裕

2014/07/04 16:22

阅读:129

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大鼠 (Rat) CD45分子 ELISA 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用     

 

试验原理:

CD45试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知CD45浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将CD45和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CD45的浓度呈比例关系。

 

试剂盒内容及其配制

试剂盒成份(2-8℃保存)

    大鼠 (Rat) CD45分子 ELISA 检测试剂盒

96孔配置

   

48孔配置

   

配制

   

96/48人份酶标板

   

1块板(96T)

   

半块板(48T)

   

即用型

   

塑料膜板盖

   

1块

   

半块

   

即用型

   

标准品:80ng/ml

   

1瓶(0.6ml)

   

1瓶(0.3ml)

   

按说明书进行稀稀

   

空白对照

   

1瓶(1.0ml)

   

1瓶(0.5ml)

   

即用型

   

标准品稀释缓冲液

   

1瓶(4.0ml)

   

1瓶(2.0ml)

   

即用型

   

生物素标记的抗CD45抗体

   

1瓶(6.0ml)

   

1瓶(3.0ml)

   

即用型

   

亲和链酶素-HRP

   

1瓶(8.0ml)

   

1瓶(4.0ml)

   

即用型

   

洗涤缓冲液

   

1瓶(20ml)

   

1瓶(10ml)

   

按说明书进行稀释

   

底物A

   

1瓶(6.0ml)

   

1瓶(3.0ml)

   

即用型

   

底物B

   

1瓶(6.0ml)

   

1瓶(3.0ml)

   

即用型

   

终止液

   

1瓶(6.0ml)

   

1瓶(3.0ml)

   

即用型

   

标本稀释液

   

1瓶(12ml)

   

1瓶(6.0ml)

   

即用型

   

 

自备材料

1. 蒸馏水。

2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3. 振荡器及磁力搅拌器等。

 

安全性

1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

 大鼠 (Rat) CD45分子 ELISA 检测试剂盒

操作注意事项

1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

 大鼠 (Rat) CD45分子 ELISA 检测试剂盒

样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液

5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

试剂的准备

1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:

80 ng/ml

   

(6号标准品)

   

原倍浓度不用稀释直接加入50ul。

   

40 ng/ml

   

(5号标准品)

   

100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液

   

20 ng/ml

   

(4号标准品)

   

100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液

   

10 ng/ml

   

(3号标准品)

   

100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液

   

5.0 ng/ml

   

(2号标准品)

   

100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液

   

2.5 ng/ml

   

(1号标准品)

   

100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液

   

0 ng/ml

   

(空白对照)

   

原始浓度不用稀释直接加入50ul。

   

 

2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

 

 

操作步骤

1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。

3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5. 每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。

 大鼠 (Rat) CD45分子 ELISA 检测试剂盒

建议使用的实验方案

标准品浓度(ng/ml)

   

A

   

80

   

80

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

B

   

40

   

40

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

C

   

20

   

20

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

D

   

10

   

10

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

E

   

5.0

   

5.0

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

F

   

2.5

   

2.5

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

G

   

0

   

0

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

H

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

样品

   

 

 

局限

6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

 

试剂盒性能

1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性:不与其它细胞因子反应。

3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

 

结 果 判 断 与 分 析

1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的CD45标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的CD45含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

 

3、检测值范围:0-80ng/ml

 大鼠 (Rat) CD45分子 ELISA 检测试剂盒

4、敏感度: 0.1 ng/ml

 

人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒     Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒     Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒     Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒     Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒     Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒      Human Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA试剂盒     

人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒      Human Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA试剂盒     

人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA试剂盒      Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA试剂盒     

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒     Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4,TRAIL-R4 ELISA试剂盒    

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒     Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA试剂盒    

人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒     Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1,TRAIL-R1 ELISA试剂盒    

人肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒     Human Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA试剂盒     

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒      Human Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA试剂盒     

人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒     Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA试剂盒     

人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒     Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-ⅠELISA试剂盒     

人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒     Human Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA试剂盒     

人转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒     Human transforming growth factor α,TGF-α ELISA试剂盒    

人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒      Human Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA试剂盒    

人干细胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒     Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA试剂盒     

人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒     Human Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA试剂盒     

人可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒      Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand,sCD40L ELISA试剂盒     

人可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒      Human Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISA试剂盒     

人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒      Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA试剂盒     

人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒     Human P-Selectin/CD62P/GMP140 ELISA试剂盒     

人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒     Human Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA试剂盒     

人血血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒     Human Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA试剂盒     

人神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒     Human Neurotrophin 4,NT-4 ELISA试剂盒     

人神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒     人神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒    

人的神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒      Human Nerve growth factor,NGF ELISA试剂盒     

人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒     Human Macrophage Inflammatory Protein-3β,MIP-3β ELISA试剂盒     

人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒     Human Macrophage Inflammatory Protein-3α,MIP-3α ELISA试剂盒     

人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒      Human Macrophage Inflammatory Protein-1β,MIP-1β ELISA试剂盒    

人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒     Human Macrophage Inflammatory Protein-1α,MIP-1α ELISA试剂盒     

人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒     Human Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA试剂盒     

人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒     Human Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA试剂盒     

人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒     Human Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA试剂盒     

人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒     Human monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA试剂盒    

人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA试剂盒     Human monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISA试剂盒     

人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒     Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA试剂盒    

人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒     Human L-Selectin ELISA试剂盒     

人白介素9(IL-9)ELISA试剂盒     Human Interleukin 9,IL-9 ELISA试剂盒     

人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒      Human Interleukin 8,IL-8 ELISA试剂盒     

人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒      Human Interleukin 6,IL-6 ELISA试剂盒     

人白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒     Human Interleukin 5,IL-5 ELISA试剂盒     

人白介素4(IL-4)ELISA试剂盒     Human Interleukin 4,IL-4 ELISA试剂盒     

人白介素3(IL-3)ELISA试剂盒     Human Interleukin 3,IL-3 ELISA试剂盒     

人白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ )ELISA试剂盒     Human Interleukin 2,IL-2 ELISA试剂盒     

人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒     Human soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRα ELISA试剂盒     

人白介素2(IL-2)ELISA试剂盒      Human Interleukin 2,IL-2 ELISA试剂盒     

人白介素1α(IL-1α )ELISA试剂盒     Human Interleukin 1α,IL-1α ELISA试剂盒     

人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA试剂盒     Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1sRⅡ ELISA试剂盒     

人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒     Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sRⅠ ELISA试剂盒     

人白介素16(IL-16)ELISA试剂盒     Human Interleukin 16,IL-16 ELISA试剂盒     

人白介素13(IL-13)ELISA试剂盒     Human Interleukin 13,IL-13 ELISA试剂盒     

人白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒     Human Interleukin 12,IL-12/P70 ELISA试剂盒     

人白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒     Human Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA试剂盒     

人白介素11(IL-11)ELISA试剂盒     Human Interleukin 11,IL-11 ELISA试剂盒     

人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒      Human Interleukin 10,IL-10 ELISA试剂盒     

蛇床子素     A0127     Osthole     HPLC≥98%     20mg/支    

麝香酮     A0128     Muscone     GC≥98%     0.15ml    

山奈酚     A0129     Kaempferol     HPLC≥98%     20mg/支    

水杨苷     A0130     Salicin     HPLC≥98%     20mg/支    

水飞蓟宾     A0131     Silymarin     HPLC≥98%     20mg/支    

芸香柚皮苷     A0132     Narirutin     HPLC≥98%     10mg/支    

芍药苷     A0133     Paeoniflorin     HPLC≥98%     20mg/支    

鼠李糖     A0134     Rhamnose     HPLC≥98%     20mg/支    

甜菜碱     A0135     Betaine     HPLC≥98%     20mg/支    

盐酸甜菜碱     A0136     Betaine hydrochloride     HPLC≥98%     20mg/支    

甜菊苷     A0137     Stevioside     HPLC≥95%     20mg/支    

天麻素     A0138     Gastrodin     HPLC≥98%     20mg/支    

熊果酸     A0139     Ursolic acid     HPLC≥98%     20mg/支    

熊果苷     A0140     Arbutin     HPLC≥98%     20mg/支    

辛弗林     A0141     Synephrine     HPLC≥98%     20mg/支    

香豆素     A0142     Coumarin     HPLC≥98%     20mg/支    

对香豆酸     A0143     p-Coumaric acid     HPLC≥98%     20mg/支    

延胡索乙素     A0144     Tetrahydropalmatine     滴定法≥98%     20mg/支    

淫羊藿苷     A0145     Icariin     HPLC≥98%     20mg/支    

柚皮苷     A0146     Naringin     HPLC≥98%     20mg/支    

柚皮素     A0147     Naringenin     HPLC≥98%     20mg/支    

原花青素     A0148     Proanthocyanidins     UV≥95%     20mg/支    

岩白菜素     A0149     Bergenin     HPLC≥98%     20mg/支    

盐酸青藤碱     A0150     Sinomenine     HPLC≥98%     20mg/支    

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