昆虫谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）ELISA试剂盒操作方法

昆虫谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
0.2 U/mL - 9 U/mL
使用目的：
本试剂盒用于测定昆虫样本中谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）活性。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）水平。用
纯化的昆虫谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗
的微孔中依次加入谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX），昆虫谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）ELISA试剂盒再与HRP 标记的谷胱甘肽-过氧化物
酶（GSH-PX）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显
色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅
和样品中的谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸
光度（OD 值），昆虫谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）ELISA试剂盒通过标准曲线计算样品中昆虫谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）活性浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（16U/mL） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，昆虫谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）ELISA试剂盒用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
8U/mL 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
4U/mL 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2U/mL 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
1U/mL 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
0.5U/mL 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此
重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计
算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，昆虫谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）ELISA试剂盒洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月

GS-E20322     小鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒     Mouse Cyclosporine A,CsA ELISA试剂盒    

GS-E20323     小鼠对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒     Mouse para-aminobenzoic acid,PABA ELISA试剂盒     

GS-E20324     小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒     Mouse high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA试剂盒    

GS-E20325     小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA试剂盒     Mouse β2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M,β2-GP1 IgA/G/M ELISA试剂盒    

GS-E20326     小鼠T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒     Mouse Linker for activation of T cell,LAT ELISA试剂盒     

GS-E20327     小鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒     Mouse Endometrium Antibody,EMAb ELISA试剂盒    

GS-E20328     小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISA试剂盒     Mouse LDL-IC ELISA试剂盒    

GS-E20329     小鼠解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISA试剂盒      Mouse Ureaplasma urealyticum antibody,UU-Ab ELISA试剂盒     

GS-E20330     小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒     Mouse glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA试剂盒    

GS-E20331     小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒     Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA试剂盒    

GS-E20332     小鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA试剂盒     Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA试剂盒     

GS-E20333     小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒     Mouse 15-lipoxygenase,15-LO/LOX ELISA试剂盒    

GS-E20334     小鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒      Mouse Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA试剂盒     

GS-E20335     小鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒     Mouse Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA试剂盒    

GS-E20336     小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒     Mouse Serum amyloid A,SAA ELISA试剂盒    

GS-E20337     小鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒      Mouse anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA试剂盒     

GS-E20338     小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒     Mouse Haptoglobin,Hpt/HP ELISA试剂盒    

GS-E20339     小鼠16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA试剂盒     Mouse 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA试剂盒    

GS-E20340     小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒     Mouse α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA试剂盒    

GS-E20341     小鼠内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒     Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA试剂盒    

GS-E20342     小鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒     Mouse cholest erolester transfer protein,CETP ELISA试剂盒    

GS-E20343     小鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒     Mouse luteotropic hormone,LH ELISA试剂盒    

GS-E20344     小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒     Mouse angiotensinogen,aGT ELISA试剂盒    

GS-E20345     小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒     Mouse heat shock protein 60,hSP-60 ELISA试剂盒    

GS-E20346     小鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒     Mouse Chorionic Gonadotrophin,CG ELISA试剂盒    

GS-E20347     小鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒     Mouse malondialchehyche,MDA ELISA试剂盒    

GS-E20348     小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒     Mouse Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA试剂盒    

GS-E20349     小鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒      Mouse C-Peptide ELISA试剂盒    

GS-E20350     小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒     Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA试剂盒    

GS-E20351     小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒     Mouse 50% complement hemolysis,CH50 ELISA试剂盒    

GS-E20352     小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒     Mouse soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA试剂盒    

GS-E20353     小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒     Mouse Insulin,INS ELISA试剂盒    

GS-E20354     小鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒     Mouse hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA试剂盒    

GS-E20355     小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒     Mouse Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA试剂盒    

GS-E20356     小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒     Mouse Amylin ELISA试剂盒    

GS-E20357     小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒     Mouse Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA试剂盒    

GS-E20358     小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA试剂盒     Mouse Leukotriene C4,LT-C4 ELISA试剂盒    

GS-E20359     小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒     Mouse Cytochrome-C,Cyt-C ELISA试剂盒    

GS-E20360     小鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒     Mouse Free Thyroxine,FT4 ELISA试剂盒    

GS-E20361     小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒     Mouse angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA试剂盒    

GS-E20362     小鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒     Mouse melanocyte antibody,MC Ab ELISA试剂盒    

GS-E20363     小鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒     Mouse thyroxine,T4 ELISA试剂盒    

GS-E20364     小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒     Mouse dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA试剂盒    

GS-E20365     小鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒     Mouse Complement fragment 4a,C4a ELISA试剂盒    

GS-E20366     小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒     Mouse Tri-iodothyronine,T3 ELISA试剂盒    

GS-E20367     小鼠补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒     Mouse Complement fragment 5a,C5a ELISA试剂盒