兔α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒操作手册

兔α甘露糖苷酶(α Manase)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
3.0nmol/L - 80nmol/L
使用目的：
兔α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中α甘露糖苷酶(α Manase)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔α甘露糖苷酶(α Manase)水平。用纯化的兔
α甘露糖苷酶(α Manase)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入
α甘露糖苷酶(α Manase)，再与HRP 标记的α甘露糖苷酶(α Manase)抗体结合，形成抗体
-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化
成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的α甘露糖苷酶(α
Manase)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品
中兔α甘露糖苷酶(α Manase)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（160 nmol/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
80nmol/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
40nmol/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
20nmol/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
10nmol/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
5.0nmol/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 兔α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此
重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
兔α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计
算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．兔α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月

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兔乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒     Rabbit acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA试剂盒     

兔诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒     Rabbit inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA试剂盒     

兔热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒     Rabbit Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA试剂盒    

兔热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒     Rabbit Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA试剂盒    

兔热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒     Rabbit Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA试剂盒    

兔热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒     Rabbit Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA试剂盒    

兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒     Rabbit amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA试剂盒    

兔组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒     Rabbit Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA试剂盒    

兔白介素17(IL-17)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 17,IL-17 ELISA试剂盒    

兔乙酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒     Rabbit acetylcholine,ACH ELISA试剂盒    

兔去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒     Rabbit Noradrenaline,NA ELISA试剂盒    

兔子生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒     Rabbit Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA试剂盒     

兔子α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒      Rabbit Interferon α,IFN-α ELISA试剂盒     

兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒      Rabbit E-Selectin ELISA试剂盒     

兔子视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒     Rabbit Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA试剂盒     

兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA试剂盒     Rabbit major histocompatibility complex Ⅲ,MHCⅢ/RLAⅢ ELISA试剂盒     

兔淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒     Rabbit lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA试剂盒     

兔儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒Rabbit catecholamine,CA ELISA试剂盒      Rabbit catecholamine,CA ELISA试剂盒     

兔儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒     Rabbit catecholamine,CA ELISA试剂盒     

兔吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒     Rabbit pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA试剂盒     

兔吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒     Rabbit pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA试剂盒     

兔糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒     Rabbit Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA试剂盒     

兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒     Rabbit Cystatin C,Cys-C ELISA试剂盒     

兔子脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒     deoxypyridinoline,DPD ELISA试剂盒     

兔子组织因子(TF)ELISA试剂盒     rabbit Tissue factor,TF ELISA试剂盒    

兔子骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒     Rabbit Crosslaps,Cr ELISA试剂盒     

兔子组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒     rabbit Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISA试剂盒     

 兔子组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒      rabbit Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA试剂盒