兔 (Rabbit) 白细胞介素-1 (IL-1) ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用
试验原理:
IL-1试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-1浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-1和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。兔 (Rabbit) 白细胞介素-1 (IL-1) ELISA试剂盒产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-1的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存)
96孔配置
48孔配置
配制
96/48人份酶标板
1块板(96T)
半块板(48T)
即用型
塑料膜板盖
1块
半块
即用型
标准品:800pg/ml
1瓶(0.6ml)
1瓶(0.3ml)
按说明书进行稀稀
空白对照
1瓶(1.0ml)
1瓶(0.5ml)
即用型
标准品稀释缓冲液
1瓶(4.0ml)
1瓶(2.0ml)
即用型
生物素标记的抗IL-1抗体
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
亲和链酶素-HRP
1瓶(8.0ml)
1瓶(4.0ml)
即用型
洗涤缓冲液
1瓶(20ml)
1瓶(10ml)
按说明书进行稀释
底物A
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
底物B
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
终止液
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
标本稀释液
1瓶(12ml)
1瓶(6.0ml)
即用型
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
1. 兔 (Rabbit) 白细胞介素-1 (IL-1) ELISA试剂盒试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
1、 兔 (Rabbit) 白细胞介素-1 (IL-1) ELISA试剂盒血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,兔 (Rabbit) 白细胞介素-1 (IL-1) ELISA试剂盒不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
800 pg/ml
(6号标准品)
原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
400 pg/ml
(5号标准品)
100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
200 pg/ml
(4号标准品)
100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
100 pg/ml
(3号标准品)
100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
50 pg/ml
(2号标准品)
100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
25 pg/ml
(1号标准品)
100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 pg/ml
(空白对照)
原始浓度不用稀释直接加入50ul。
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
建议使用的实验方案
标准品浓度(pg/ml)
A
800
800
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
B
400
400
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
C
200
200
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
D
100
100
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
E
50
50
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
F
25
25
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
G
0
0
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
H
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
样品
局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-1标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-1含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
人钙腔蛋白(CALU)ELISA试剂盒
人载脂蛋白A5(apo-A5)ELISA试剂盒
人维生素D结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒
人硒蛋白1(SEP1)ELISA试剂盒
人血清淀粉样蛋白A3(SAA3)ELISA试剂盒
人鸟苷酸结合蛋白4(Gbp4)ELISA试剂盒
人细胞色素b561(cytb561)ELISA试剂盒
人脂质运载蛋白2(LCN2)ELISA试剂盒
人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(aFABP)ELISA试剂盒
人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA试剂盒
人葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)ELISA试剂盒
人视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒
人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒
人羟赖氨酸(Hyl)ELISA试剂盒
人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA试剂盒
人载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒
人糖磷脂酰肌醇(GPI)ELISA试剂盒
人美洲商陆素(PWM)ELISA试剂盒
人脂多糖/内毒素(LPS)ELISA试剂盒
人preptin ELISA试剂盒
人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒
人载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒
人成骨生长肽(OGP)ELISA试剂盒
人破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒
人羟基胶原吡啶交联(OH-PYD)ELISA试剂盒
人脱氧胶原吡啶交联(DPD)ELISA试剂盒
人胶原吡啶交联(PYD)ELISA试剂盒
人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA试剂盒
人刀豆素A(ConA)ELISA试剂盒
人游离原卟啉(FEP)ELISA试剂盒
人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒
人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒
人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒
人17-酮类固醇(17-KS)ELISA试剂盒
人17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒
人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒
人骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒
人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒
人蛋白脂质蛋白抗体(PLP)ELISA试剂盒
人垂草扁桃酸(VMA) ELISA试剂盒
人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)ELISA试剂盒
人血凝素(HA)ELISA试剂盒
人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒
人钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒
人钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒
人骨退化特异标志物(CTX-2)ELISA试剂盒
人钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒
人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒
人脂肪酸结合蛋白(FABP)ELISA试剂盒
人腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒
人羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA试剂盒
人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA试剂盒
人低密度脂蛋白(LDL)ELISA试剂盒
人花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒
人骨涎蛋白(BSP)ELISA试剂盒
人骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒
人环磷酰胺(CTX)ELISA试剂盒
人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA试剂盒
人1,5-脱水葡萄糖醇/1,5-脱水山梨(1,5-AG)ELISA试剂盒
人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒
人高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)ELISA试剂盒
人N端中段骨钙素(N-MID-OT)ELISA试剂盒
人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)ELISA试剂盒
人极低密度脂蛋白受体(VLDLR)ELISA试剂盒
人低密度脂蛋白受体(LDLR)ELISA试剂盒
人高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒
人α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)ELISA试剂盒
人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒
人游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒
人骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒
人叶酸(FA)ELISA试剂盒
人内毒素(ET)ELISA试剂盒
人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)ELISA试剂盒
更多
实战分享|小鼠淋巴细胞的提取和分选之经验小结
厂商
2023.08.21
实战分享 | 原生细胞的合成之经验分享
厂商
2023.07.28
实验常用人肝癌细胞株(HepG2/Hep3B,HuH-7,MHCC97H,PLC/PRF/5)怎么选
厂商
2023.07.03
原代细胞的培养方法及注意事项
厂商
2023.06.26