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细胞系(株)复苏基本技术

上海信裕

2014/05/28 12:16

阅读:151

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                   细胞系(株)复苏基本技术

(a)从液氮容器中取出细胞冻存管后,立即将细胞冻存管直接浸入37%水浴中,在1-2分钟内摇动细胞冻存管至冻存的细胞融化。

(b)用75%酒精消毒细胞冻存管后,小心打开盖子,用吸管吸出细胞悬浮液至15ml离心管中,缓慢加入5ml培养基后800rpm离心5分钟,弃上清,加3-5ml培养基重悬至细胞培养瓶中,然后放入5CO2、95%空气、37℃培养箱静置培养。

注:建议使用新鲜配制的培养体系

(c)另外,细胞计数,确定细胞数量

(d)24小时,更换一次培养液,继续在5%CO2,  95%空气、37℃培养箱静置培养。

注:建议使用新鲜配制的培养体系

 

  注意事项:

   1,将冻存管从液氮容器中取出时要做好防护工作,以免冻伤。

   2,取冻存管后立即放入37℃水浴中,缩短解冻时间

   3,复苏最好用新配制的细胞培养体系


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