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人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒

上海信裕

2013/11/18 09:29

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人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒
实验方法原理: 质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。提取质粒的基本步骤分为三步: ①细菌的培养和质粒的扩增 ②细菌菌体的裂解 ③质粒DNA的纯化
人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒
实验步骤:
1.  材料:大肠杆菌。
 
3.  试剂:
 
(2)Solution II :0.2 M NaOH, 1%SDS 现配现用。
(4)3 M NaAc PH5.2,高压灭菌,4℃保存。
(5)异丙醇,溶菌酶(8 mg/ml),酚/氯仿,无水乙醇,70%乙醇,LB培养基,电泳试剂。
 
1.  细菌繁殖:LB培养基,2 ml/20ml,37℃,200 rpm,摇一摇,过夜。
 
3.  沉淀(菌体细胞)预冷的TES缓冲液洗涤,离心10 min,5 000 rpm, 4℃,加入预冷的1 ml Solution I,冰浴10 min。
 
5.  加入1.2 ml Solution II, 冰浴5 min。
 
7.  加入1.5 ml异丙醇,-20℃冰箱内放置15 min。
 
9.  取沉淀,悬于400 ul TE缓冲液中。
 
11.  酚/氯仿,抽提,乙醇沉淀。
 
13.  取沉淀,冷冻干燥,再悬浮于50 ul TE缓冲液中。
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