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人层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒进口国产

上海信裕

2013/11/14 09:08

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实验方法原理:人层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒 
T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一。淋巴细胞转化试验有形态计数法、MTT 法和同位素法三种。MTT 法即四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法。MTT 是一种噻唑盐,化学名3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-
试剂、试剂盒:人层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒1. RPMI1640 培养液2. Hank’s 液3. 刀豆蛋白A(Concanvalin A, ConA),用RPMI1640 液配成1mg/ml,分装小瓶,冷冻保存4. MTT 1mg/ml5.
实验步骤:人层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒1. 小鼠脾细胞悬液的制备:取一个灭菌的平皿,加入5ml Hank’s液。颈椎脱臼法处死小鼠,取脾脏,放入平皿中,在钢网上研磨并过筛,制成细胞悬液。取出100μl用于计数。将其余细胞悬液移入一离心管中,离心1500rpm,7min,(或1000rpm,10min)弃去上清,用RPMI1640 培养液稀释,制成2.5×106 / ml的脾细胞悬液,然后加入ConA使每孔最终浓度为2μg/ml,同时做不加ConA的阴性对照孔。2. 将上述细胞悬液加入96 孔平底培养板中,每孔0.1ml。3. 将培养板放入含有5%CO2的37℃培养箱中培养48-72 小时,在培养结束前4-6 小时,于培养板各孔内加入1mg/mlMTT液,10μl/孔。37℃培养6 小时。4. 各孔内加入0.01M 盐酸—异丙醇110μl,30 分钟内(或加2%SDS 100ul/孔,过夜)用酶标测定仪测OD 值,测定波长570nm。5. 实验结果将实验组和对照组三个复孔的OD 值平均。转化值=实验组的平均OD 值-对照组的平均OD 值。 注意事项 1. 由于本实验需要培养3 天,才能观察结果。因此,在操作时应注意无菌操作,避免细菌污染,导致实验的失败。2. 细胞操作要轻柔、迅速,以免细胞损伤影响实验结果。
公司主营产品:ELISA 试剂盒,ELISA免费代测,中国标准品,生化试剂,科研抗体,美国ATCC细胞株,生物培养基等产品经营:兔子胶原酶I(Collagenase I)ELISA试剂盒  Rabbit Collagenase I ELISA试剂盒
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