人S100D蛋白(S-100D)酶联免疫分析试剂盒

本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：                                                          96T
15ng/L -450ng/L

使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中S100D蛋白(S-100D)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人S100D蛋白(S-100D)水平。用纯化的人S100D蛋白(S-100D)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入S100D蛋白(S-100D)，再与HRP标记的S100D蛋白(S-100D)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的S100D蛋白(S-100D)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人S100D蛋白(S-100D)浓度。
试剂盒组成
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（800ng/L） 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
400ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
200ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
100ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
50ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
25ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液


2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结：


计算
  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
人类白细胞抗原B27(HLA-B27)ELISA试剂盒 Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA试剂盒
人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒 Human Haptoglobin,Hpt/HP ELISA试剂盒
人血清总补体(CH50)ELISA试剂盒 Human 50% complement hemolysis,CH50 ELISA试剂盒
人过敏毒素/补体片断4(C4a)ELISA试剂盒 Human Complement fragment 4a,C4a ELISA试剂盒
人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒 Human Complement fragment 5a,C5a ELISA试剂盒
人补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒 Human Complement fragment 3a,C3a ELISA试剂盒
人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)ELISA试剂盒 Human coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA试剂盒
人凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA试剂盒 Human coagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA试剂盒
人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA试剂盒 Human coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISA试剂盒
人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒 Human von Willebrand Factor,vWF ELISA试剂盒
人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒 Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA试剂盒
人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒 Human thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA试剂盒
人抗凝血酶受体(ATR)ELISA试剂盒 Human anti-thrombin receptor,ATR ELISA试剂盒
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人第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒 Human Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA试剂盒
人血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒 Human Fibrinogen,Fbg ELISA试剂盒
人主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA试剂盒 Human major histocompatibility complex Ⅰ,MHCⅠ/HLAⅠ ELISA试剂盒
人抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒 Human Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA试剂盒
人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒 Human thrombus precursor protein,TpP ELISA试剂盒
人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒  Human lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA试剂盒
人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA试剂盒 Human major histocompatibility complex Ⅲ,MHCⅢ/HLA-Ⅲ ELISA试剂盒
人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA试剂盒 Human major histocompatibility complex Ⅱ,MHCⅡ/HLA-Ⅱ ELISA试剂盒
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人载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 Human apoprotein B100,apo-B100 ELISA试剂盒
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人免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 Human Immunoglobulin M,IgM ELISA试剂盒
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人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒  Human plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA试剂盒
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人组织因子(TF)ELISA试剂盒 Human Tissue factor,IF ELISA试剂盒
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人胰岛素受体底物2(IRS-2)ELISA试剂盒 human Insulin receptor substrate 2,IRS-2 ELISA试剂盒{试剂酶联网：www.shjgogo.com}