植物环磷酸腺苷(cAMP)酶联免疫分析试剂盒
2014-04-22 11:33
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资料摘要:
植物环磷酸腺苷(cAMP)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
10pg/ml - 320pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定植物组织,细胞及其它相关样本中环磷酸腺苷(cAMP)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物环磷酸腺苷(cAMP)水平。用纯化的植物环
磷酸腺苷(cAMP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入环磷酸腺
苷(cAMP),再与HRP 标记的环磷酸腺苷(cAMP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,
经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物环磷酸腺苷(cAMP)呈正相关。用酶标仪在
450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中植物环磷酸腺苷(cAMP)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(640 pg/ml) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
320pg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
160pg/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
80pg/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
40pg/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
20pg/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测
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