菊粉（Inulin）酶联免疫分析（ELISA）

菊粉（Inulin）酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 1 使用目的： 本试剂盒用于肉类组织，血清和尿样中菊粉（Inulin）残留的定量检测。 2 实验原理 本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有菊粉（Inulin）偶联抗原，加入菊粉（Inulin）标准品或样品，游离菊粉（Inulin）与微孔条上预包被的菊粉（Inulin）偶联抗原互相竞争抗菊粉（Inulin）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中菊粉（Inulin）含量成反比，通过标准曲线计算样品中菊粉（Inulin）的含量。 3 试剂盒组成 3.1 预包被的菊粉（Inulin）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。 3.2菊粉（Inulin）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是： 0 ppb，0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7 ppb,8.1 ppb。 3.3抗菊粉（Inulin）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。 3.4显色液A：1瓶（6ml）。 3.5显色液B：1瓶（6ml）。 3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。 3.7样本稀释液：1瓶（10×, 6ml），用于样品稀释用。 3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。 3.9说明书一份。 4 需要而未提供的材料 4.1 设备 4.1.1波长450nm酶标仪。 4.1.2粉碎机。 4.1.3量筒。 4.1.4振荡器。 4.1.5漏斗。 4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。 4.1.7微量移液器。 4.2 试剂 4.2.1去离子水或蒸馏水。 4.2.2 甲醇。 5 贮存 5.1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻 5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存 6 注意事项 6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。 6.2 不要使用过期试剂盒。 6.3 试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。 6.4 标准品中含有菊粉（Inulin），使用时应特别注意，操作时应带手套。 6.5 终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。 6.6 不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。 6.7 不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。 6.8 稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果 6.9 混合试剂时应避免起泡。 7 工作液准备 7.1 菊粉（Inulin）标准品溶液：0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb 7.2 浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用 7.3 样本稀释液：用蒸馏水按1:10(1+9)稀释备用 7.3 显色剂：已备用，避免光线直照 7.4 反应终止液：已备用 8 样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存） 8.1取10g粉碎的样品，加 20ml 70%甲醇溶液 8.2强力振荡3分钟 8.3用Whatman No 1滤纸过滤 8.4取25μl处理后的样品，加入25μl样本稀释液于反应孔中（样本稀释倍数为2） 9 酶免分析步骤 9.1 实验须知 9.1.1 实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（25±2℃），时间约2小时。回温至室温（25±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存