胃肠癌成纤维细胞CAF
2014-04-17 14:38
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资料摘要:
胃肠癌成纤维细胞CAF
资源编号3111C0001CCC000079
英文名称CAF
中文名胃肠癌成纤维细胞
形态特性成纤维细胞样
特征特性
探讨原代培养及纯化后的结肠癌相关成纤维细胞(cancer associatedfibroblast,CAF)对
胃肠癌细胞增殖及侵袭能力的影响,为研究癌细胞微环境在胃肠癌发生发展过程中
的作用,并进一步用于胃肠癌的预防及寻求新的治疗途径而奠定基础。[方法]采集
手术切除结肠腺癌及正常胃肠粘膜标本进行原代培养,电镜及免疫组化初步分析鉴
定,获得纯化的CAF 及胃肠粘膜正常成纤维细胞(Normalfibroblast,NF)进行传代培
养。分别利用CAF 及NF 条件培养基培养HCT-116细胞,用无血清培养基培养
HCT-116细胞作为对照,通过MTT 法检测HCT-116细胞株的增殖能力的变化(A 组);
利用Transwell 小室,建立CAF 及NF 与胃肠癌细胞HCT-116细胞株间接共培养模型,
同时用10%完全培养基培养HCT-116细胞作为对照,观测在CAF 及NF 作用后的
HCT-116细胞形态学改变,利用流式细胞仪分析HCT-116细胞的增殖周期(B 组);再以
Matrigel 胶模拟重建基底膜,观测CAF 对HCT-116细胞侵袭能力的影响(C 组)。
培养基DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)
血清10%FBS
其它因子无
传代方法1:3传代;3~4天1次。
传代情况P2
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测阴性
同工酶
染色体
使用权限A 类
实物状态可用
参考文献胃肠癌成纤维细胞株
图片
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