人重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）酶联免疫分析

试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 1pg/ml-40pg/ml 使用目的： 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）水平。用纯化的人重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2），再与HRP标记的重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（80pg/ml） 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 40pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 20pg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 10pg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 5pg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 2.5pg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。