来自用户的加替沙星有关物质分析的色谱柱筛选记录

用户的最终选择

    在经过色谱柱筛选和流动相摸索后，用户选择了大阪曹達CAPCELL PAK C18 MGII 3 μm 4.6×250 mm色谱柱，分析谱图及实验结果如下：

    流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 88 / 12

    流速：1.0 mL/min

国家药品标准WS1-XG-015-2014

加替沙星质量标准

推荐用柱 F92483

CAPCELL PAK C18 MGII S3; 4.6×250

色谱柱2：Uxxx C18 5 μm，4.6×250 mm

    流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 87 / 13

    流速：1.5 mL/min

    流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 88 / 12

    流速：1.5 mL/min

    流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 89 / 11

    流速：1.5 mL/min

    综上，从Uxxx C18 5μm，4.6×250 mm的实验结果判断，有机相比例的微小调整（1%~2%）会导致加替沙星出峰时间的大范围变化，在可调整的狭窄区间内，加替沙星（3）和加替沙星N-甲基物（4）分离度改善效果有限，达到标准中要求的4.0分离度有一定难度。

    流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 87 / 13

    流速：1.5 mL/min

    加替沙星出峰时间不符合要求，各峰之间分离度不符合要求，且加替沙星峰严重拖尾，加替沙星N-甲基物未出峰。

色谱柱4：Dxxx C18 5 μm，4.6×250 mm

    流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 87 / 13

    流速：1.5 mL/min

    加替沙星出峰时间不符合要求，各峰之间分离度不符合要求，且加替沙星主峰明显拖尾

色谱柱5：Cxxx C18 5 μm，4.6×250 mm

    流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 87 / 13

    流速：1.5 mL/min

    加替沙星出峰时间不符合要求，各峰之间分离度不符合要求，且加替沙星和加替沙星N-甲基物分离度差标准要求的4.0太多。

色谱柱6：大阪曹達SUPERIOREX ODSII C18 5 μm，4.6×250 mm

    流动相：三乙胺磷酸溶液 / 乙腈 = 87 / 13

    流速：1.0 mL/min

    加替沙星出峰时间（30.9min）符合要求，加替沙星和加替沙星N-甲基物分离度（4.0）符合要求；且8-羟基加替沙星、加替沙星分离度（6.4）符合要求。

    为提高加替沙星和加替沙星N-甲基物之间分离度，减少有机相比例，并选择了粒径3 μm的色谱柱，才有了本文开头的良好结果。