萃取操作 1. 将15 g搅匀的样品转移至50 mL的空试管中。 2. 加入内标物和标准品的混合物。 3. 在50 mL DisQuE™萃取管1中加入15 mL 1%乙酸/乙腈溶液。 4. 将DisQuE萃取管1中的所有物质转移到含有样品和溶剂的50 mL试 管中(步骤1的)。 5. 剧烈摇匀1分钟后，然后离心(大于1500 rcf)5分钟。 6. 吸取1mL上清液，移至干净的试管2中。 7. 摇匀30秒，然后离心(大于1600 rcf)5分钟。 8. 吸取100 mL的上清液，移至进样瓶中。 9. 加入萃取后的内标。 10. 如有必要，使用相应的缓冲液或溶剂稀释。 色谱柱： ACQUITY UPLC BEH C18, 2.1 x 100 mm, 1.7 μm 柱温： 40 °C 样品温度： 4 °C 流速： 0.3 mL/min 流动相A： 水+0.1%甲酸 流动相B： 甲醇+0.1%甲酸

色谱柱： ACQUITY UPLC® BEH Shield RP18, 1.7 μm, 2.1 x 100 mm 流速： 4 mL/min 流动相A： 0.1%甲酸水溶液 流动相B： 乙腈 梯度： 时间(min) A% B% 初始 85 15 2.00 60 40 2.50 40 60 3.00 10 90 4.50 10 90 4.60 85 15 5.50 85 15

色谱柱： ACQUITY UPLC CSH C18, 1.7 μm, 2.1 x 100 mm 流动相A： 0.1%甲酸水溶液 流动相B： 0.1%甲酸乙腈溶液 进样体积： 7 μL 进样模式： 部分定量环进样 柱温： 30 ?C 弱洗针液： 10:90乙腈/水(600 μL) 强洗针液： 50:30:20水/乙腈/异丙醇(200 μL) 密封清洗液： 10:90乙腈/水 梯度： 时间 流速 组成 曲线 (min) (mL/min) A% B% 初始 0.4 85 15 6 2.5 0.4 60 40 6 3.9 0.4 5 95 6 4.9 0.4 5 95 6 5.0 0.4 85 15 6 7.0 0.4 85 15 6

色谱柱： ACQUITY UPLC CSH™ C18, 1.7 μm, 2.1 x 100 mm 流动相A： 0.1%甲酸水溶液 流动相B： 0.1%甲酸的乙腈溶液 进样体积： 7 μL 进样模式： 部分定量环进样 柱温： 30 ?C 弱清洗液： 10:90乙腈/水(600 μL) 强清洗液： 50:30:40水/乙腈/IPA(200 μL) 密封清洗液： 10:90乙腈/水 梯度： 时间 流速 溶剂 A 溶剂 B 曲线 (min) (mL/min) (%) (%) 初始 0.4 85 15 初始 2.5 0.4 60 40 6 3.9 0.4 5 95 6 4.9 0.4 5 95 6 5.0 0.4 85 15 6 7.0 0.4 85 15 6

系统： ACQUITY UPLC® 色谱柱： ACQUITY UPLC BEH C18, 1.7 μm，1 x 50 mm 流速： 0.12 mL/min 流动相A： 1%甲酸水溶液 流动相B： 乙腈 梯度： 时间(min) A% B% 0.00 95 5 3.00 50 50 6.50 50 50 10.50 95 5 15.50 95 5 进样体积：10ul 温度：30℃

系统： ACQUITY® UPLC 色谱柱： XSelect® CSHTM C18 XP, 2.5 μm, 2.1×100 mm 部件号： 186006103 进样体积： 5 μL 温度： 50 ?C 流动相A： 5 mM醋酸铵水溶液 流动相B： 5 mM醋酸铵甲醇溶液 流速： 0.40 mL/min 梯度： 初始条件为70%的流动相B，在5 min内以线性梯 度增加至97%，保持8 min，在8.1 min时返回到 70%。保持并重新平衡系统10 min。 样品瓶： 最大回收样品瓶 部件号： 600000670CV

Oasis MCX 固相萃取柱：6 cc/150 mg 活化/平衡 A.5 mL甲醇 B.10 mL水 上样 加入制备样品 清洗 A.5 mL 2 %甲酸 B.5 mL 甲醇 洗脱 5 mL 5% 氨水甲醇溶液 50 ?C氮气吹干溶剂 加乙腈0.01 mol/L乙酸胺溶液1.0 mL 过0.2 μm 滤膜后，上机 色谱柱： Atlantis® T3, 150 x 2.1 mm, 3 μm 柱温： 35 ?C 流动相A： 乙腈 流动相B： 0.1 %甲酸水溶液 流动相C： 甲醇 流速： 0.2 mL/min 进样量： 20 μL 梯度： 时间(min)

Oasis HLB 6 cc/150 mg 活化 A.10 mL甲醇 B.10 mL水 C.10 mL 2 % 氯化钠溶液 D.2 mL 0.1 M磷酸盐缓冲溶液(pH 8.0) 上样 5 mL经均质处理的牛奶 清洗1 5 mL水 清洗2 5 mL 40 %甲醇水溶液 抽干小柱 5 min 洗脱 5 mL 95% 甲醇水溶液 氮气吹至近干，用1 mL流动相A溶解 色谱柱： XBridge C18, 2.1 x 50 mm, 3.5 μm 流动相A： 0.1% 甲酸/水 流动相B： 0.1% 甲酸/甲醇，梯度分析

仪器: 沃特世Alliance® 2695系统，2487 双波长紫外检测器 色谱柱: SunFire C18, 4.6 x 150 mm, 5 μm 自填PbO2 氧化小柱: 4.6 x 20 mm(PbO2:硅藻土=3:1)，两端覆以 2 μm的不锈钢筛板。氧化小柱连接在色谱柱与检测器之间。 流动相A: 125 mM乙酸铵，用乙酸调pH 4.5 流动相B: 乙腈 流速: 2 mL/min 梯度: 时间(min) A% B% 0.00 45 55 7.00 10 90 10.00 10 90 检测波长: 619 nm 进样量: 50 μL

1.液体样品类Oasis HLB Glass柱 5cc/200mg，Part No.186000683 含酒精液体，需将样品进行旋转蒸发后，加水稀释后过柱净化。 样品制备 活化/平衡 5mL 甲醇 /5mL 水 上样 5mL样品 清洗 5%甲醇水溶液 洗脱 5mL 甲醇 氮气挥干

液相色谱系统： 配备ACQUIT Y UP LC荧光检测器的沃特世 ACQUITY UPLC® H-Class系统 流通池： 大体积荧光流通池（部件编号205000609） 色谱柱： ACQUITY UPLC BEH C18柱2.1x100mm，1.7μm（186002352） 柱温： 30?C 流速： 400 μL/min 流动相： 水/甲醇/乙腈（体积比64:18:18） 进样体积： 20μL（使用50μL定量环） 运行时间： 4.0分钟 检测： 荧光 激发波长： 365nm 反射波长： 429nm，适用于M1、M2、B1和B2 455nm，适用于G1和G2

仪器： 沃特世ACQUITY UPLC系统 色谱柱： ACQUITY UPLC BEH HILIC，2.1×150mm，1.7μm 流动相 A： 10mM醋酸铵的水溶液 流动相 B： 溶于97/3乙腈/水（体积比）的10mM醋酸铵 弱洗针溶液： 甲醇 强洗针溶液： 水 进样针类型： PEEK 样品环： 10μL 进样类型： 满定量环 流速： 700μL/min 梯度洗提： 时间（分钟） %A %B 梯度曲线 0.00 0 100 6 1.00 0 100 6 3.20 6.0 94.0 6 3.50 50.0 50.0 6 4.00 50.0 50.0 8 4.10 0 100 6 6.00 0 100 6

仪器： 配备Xevo® TQ检测器的ACQUITY UPLC系统 色谱柱： ACQUITY UPLC HSS T3，2.1×50mm，1.8μm 柱温： 40?C 样品室温度： 4?C 流速： 0.6mL/min 流动相 A： 10mM甲酸铵的水溶液+0.1%甲酸 流动相 B： 10mM甲酸铵的甲醇溶液+ 0.1%甲酸 总运行时间： 5.0分钟 进样体积： 10μL，满定量环进样 进样针类型： 不锈钢（关键清洗）进样针

色谱柱： ACQUITY UPLC HSS T3柱，2.1×100 mm 1.8μm 柱温： 35℃ 样品温度： 20℃ 流动相 A: 0.1% 甲酸水溶液 流动相 B: 乙腈/甲醇（50/50 v/v） 流速： 300μL / min 进样体积： 10μL 梯度洗提： 时间（分钟） A% B% 曲线 0 68.0 32.0 4.20 55.0 45.0 6 5.00 0 100 6 5.70 0 100 1 6.00 68.0 32.0 6

系统： ACQUITY UPLC 系统配 ACQUITY PDA检测器。 色谱柱： ACQUITY UPLC BEH C18柱， 2.1×150 mm，1.7μm 柱温： 50℃ 流速： 0.5 mL/min 流动相 A： 98:2 水/甲醇（体积比） 流动相 B： 甲醇 进样体积： 10.0μL full loop 样品温度： 5℃ 弱洗： 600μL 98:2水/甲醇 强洗： 200μL 异丙醇（IPA） 检测波长： 450nm，或 PDA 250-500nm 梯度洗脱： 时间（分钟） %B 曲线 0.00 10 -- 2.00 10 6 2.01 0 6 12.00 0 6 12.10 10 6

色谱柱： UPLC HSS T3 柱，2.1×50mm，1.8μm 柱温： 40℃ 流动相： 乙酸钠缓冲溶液（10mM 乙酸钠/10mM 乙 酸）/无水乙醇（90/10体积比） 流速： 0.9mL/min 进样体积： 2uL 检测波长： 227nm

液相色谱柱为亚二微米 C18 ，2.1x50 mmx1.8um 流动相 A :水（含 0.1% 体积比的甲酸）， B:乙腈，柱温 30℃；进样量 4µL，流速为 0.3 mL/min，洗脱梯度见表1

色谱柱： DB-WAXETR, 30 m × 0.25 mm, 0.25 μm (260/280 °C) p/n 122-7332 进样体积：5 uL 衬管： 不分流超惰衬管（p/n 5190-2293） MMI 进样口温度：程序升温，60 °C (0.05 min)-600 °C/min-250 °C（冷不分流进样，空气泵*冷却，如无空气泵可自然冷却） 隔垫吹扫： 60 mL/min @1.2 min 载气节省： 20 mL/min @ 5 min 柱温： 50 °C (1 min)-10 °C/min-110 °C-15 °C/min-200°C-40 °C/min-250 °C (3.75 min) 共18min 柱流速： 1.2 mL/min 后运行流速：3 mL/min 后运行温度：250 °C

色谱柱：Poroshell 120 SB-AQ 4.6×100mm, 2.7μm，P/N. 685975-914 流速：1mL/min 柱温：40℃ 进样体积：10μL 流动相：0.02mol/L 的磷酸二氢钾水溶液 检测器：Agilent 1260 HPLC –DAD 检测器， 检测波长210nm 运行时间：6min

进样口温度:250℃ 进样方式:不分流进样 进样量:1ul, 吹扫时间0.75min 色谱柱;HP-5MS 30x0.32x0.25um 部件号：19091S-413 载气;氮气 1ml/min 柱温： 50℃（1min）-20℃/min-100℃-5℃/min-150℃（5min）-10℃/min-200℃(10min) 检测器：NPD,325℃，白色铷珠：部件号G1534-60570 组分：速灭威、异丙威、仲丁威、残杀威、克百威、抗蚜威、甲萘威

氮磷检测器测定食品中的有机磷农药残留

本实验采用中心切割方法，利用第一维色谱柱在分析 VA 和VE 的同时对 VD 进行净化，再将初步进化后的 VD 在线引入第二维色谱柱进行分离、测定，整个分析过程只需一次进样即可完成样品中 VA、VE 及微量 VD 的测定。该方法不仅可以节省大量的制备工作，而且稳定性良好. 整个 HPLC 方法为中心切割的二维液相方法 (heart-cutting 2DLC)，包含三个阶段：第一阶段为进样/分析维生素 A，此时阀的位置为 1-2；第二阶段为净化/捕获维生素 D，阀在维生素 D 出峰前切换到位置 1-6；第三阶段第一维继续分析维生素 E，第二维则分离检测维生素 D，阀在第一维维生素 D出峰结束后切回位置 1-2，具体见下图 1。本方法第一维采用高效短柱（Zorbax RRHT Extend-C18，4.6 × 50 mm ×1.8 μm）进行快速分析，第二维采用 PAH 专用柱（Zorbax Eclipse PAH，2.1 × 100 mm × 3.5 μm）以提高 VD2 和 VD3的分离.

GC/MS：采用安捷伦(Agilent Technologies, Santa Clara, CA) 6890N 气相色谱仪进行色谱分析，配以分流/不分流进样口和 HP-5MS 毛细管色谱住（交联的5%苯基甲基聚硅氧烷，30 m × 0.25 mm id × 0.25 μm）。 该气相色谱仪配置了安捷伦(Agilent Technologies) 5973 network MSD 质谱检测器（四极杆）。氦气作为载气，1.2 mL min-1恒定流速。色谱柱初始温度60 °C，保持1 min。以30 °C min-1 的速率升温至最终温度300 °C。采用分流/不分流进样口的不分流模式进样。传送管和离子源温度分别为280 和230 °C。电子轰击离子化的电子能量为70 eV.

衬管分流衬管（部件号5183-4647） 1, 色谱柱30 m x 0.25 mm ID，0.25 μm DB-Wax（J&W 122-7032） 试验条件GC-FID 进样口温度250 °C 进样体积1 μL 分流比1/50 载气氢气 柱头压力53 kPa 恒压（在50 °C，36 cm/s） 柱箱温度50 °C，1 min，25 °C/min 到200 °C，3 °C/min 到230 °C，18 min。 检测器温度280 °C 检测器气体氢气: 40 mL/min; 空气450 mL/min; 氦做尾吹气: 30 mL/min。 2, 色谱柱60 m x 0.25 mm ID，0.15 μm DB-23（J&W 122-2361) 试验条件GC-FID 进样口温度250 °C 进样体积1 μL 分流比1/50 载气氦气 柱头压力230 kPa 恒压（在50 °C，33 cm/s） 柱箱温度50 °C，1 min，25 °C/min 到175 °C，4 °C/min 到230 °C，5 min。 检测器温度280 °C 检测器气体氢气: 40 mL/min; 空气450 mL/min; 氦做尾吹气: 30 mL/min。 3, 色谱柱A 100 m x 0.25 mm ID，0.2 μm HP-88（J&W 112-88A7） 色谱柱B 60 m x 0.25 mm ID，0.2 μm HP-88（J&W 122-8867） 试验条件GC-FID 进样口温度250 °C 进样体积1 μL 分流比1/50 载气A 氢气 载气B 氦气 柱头压力恒流，2 mL/min 柱箱温度A 120 °C，1 min，10 °C/min 到175 °C, 10 min，5 °C/min 到210 °C，5 min 5 °C/min 到230 °C，5 min 柱箱温度B 175°C，10min，3°C/min，220°C, 5min 检测器温度280°C 检测器气体氢气: 40mL/min; 空气450mL/min; 氦做尾吹气: 30 mL/min。

GC/MS鍒嗘瀽鏂规硶 鑹茶氨绯荤粺锛?Agilent 7890 GC 杩涙牱鍙? 鍒嗘祦/涓嶅垎娴? 妫€娴嬪櫒: Agilent MSD transfer line 娓╁害:280°C, scan: 40-450 amu 绂诲瓙婧? EI 鑷姩杩涙牱鍣? Agilent 鑷姩杩涙牱鍣? 琛: 鍒嗘祦琛 鑹茶氨鏌? 60m x 0.25mm ID锛?.15μm DB-23锛圝&W 122-2361) 杩涙牱鍙ｆ俯搴? 250°C 杩涙牱浣撶Н: 1μL 鍒嗘祦姣? 1/50 杞芥皵: 姘︽皵 鏌卞ご鍘嬪姏: 230kPa 鎭掑帇锛堝湪50°C锛?3cm/s锛? 鏌辩娓╁害: 50°C锛? min锛?5°C/min 鍒?75°C锛?°C/min鍒?30°C锛?min銆? GC-FID鍒嗘瀽鏂规硶 鑹茶氨绯荤粺锛?Agilent 7890 GC 杩涙牱鍙? 鍒嗘祦/涓嶅垎娴? 妫€娴嬪櫒: 姘㈢伀鐒扮瀛愬寲妫€娴嬪櫒(FID) 鑷姩杩涙牱鍣? Agilent 鑷姩杩涙牱鍣? 琛: 鍒嗘祦琛 鑹茶氨鏌? 60m x 0.25mm ID锛?.15μm DB-23锛圝&W 122-2361) 杩涙牱鍙ｆ俯搴? 250°C 杩涙牱浣撶Н: 1μL 鍒嗘祦姣? 1/60 杞芥皵: 姘皵 鏌卞ご鍘嬪姏: 242.3kPa 鎭掑帇锛堝湪50°C锛?8cm/s锛? 鏌辩娓╁害: 50°C锛?min锛?5°C/min 鍒?75°C锛?.5°C/min 鍒?30°C锛? 5min銆? 妫€娴嬪櫒娓╁害: 280°C 妫€娴嬪櫒姘斾綋: 姘㈡皵: 40mL/min; 绌烘皵450mL/min; 灏惧惞姘? 30mL/min銆?url=PaperSolution_New.asp?sel=&keywords=&StartTime=&EndTime=&state=0&I_ClassID=&page=1

色谱柱：Poroshell 120 SB-AQ 4.6×100mm, 2.7μm，P/N. 685975-914 流速：1mL/min 柱温：40℃ 进样体积：10μL 流动相：0.02mol/L 的磷酸二氢钾水溶液 检测器：Agilent 1260 HPLC–DAD 检测器， 检测波长:210nm 运行时间：6min 时间 流动相B%** 0 0 3 0 3.5 80 6 80 6.5 0 10 0 * 20mMKH2PO4，pH 2.4 **甲醇

前处理 称取 混匀的火锅底料样品 2g （精确至 0.01g ）至 50mL 离心管中 ，依次加入已知浓度的标准 品和内标溶液 、5ml 0.1mol/L HCL 溶液 、5 ml 乙腈 ，涡旋 混合 2min ，加入 10ml 正己烷，漩涡 正己烷，漩涡 30s ，振荡提取 30 min 。以 10000r/min 转速离心 3min, 弃去正己烷层 ，过 Bond Elut Plexa PCX (60mg,3ml) 固相萃取柱净化. LC-MS/MS 液相色谱柱为 亚二微米 C18,2.1x50mm。流动相 A :水（含0.1%体积比的甲酸),B:乙腈,柱温30℃；进样量 4µL，流速为0.3 mL/min.

24种氨基酸分离 Zorbax eclipse AAA 4.6x150x5um A: 40mM Na2HPO4 PH 7.8, B: 乙腈:甲醇:水=45:45:10 流速2ml/min 时间(min) %B 0 0 1.9 0 18.1 57 18.6 100 22.3 100 23.2 0 26 0

IonPac AS14A阴离 子 交 换 分 离 柱 用CO32 -/HCO3作 淋 洗 液 ， 用 于 无 机 阴 离 子 的等浓度淋洗，快速分离，包括：F-，乙酸根，Cl-，NO-，Br-，NO-，PO3-和SO2-。适用于IonPac AS4A-SC和AS12A的典型分析，并改善峰的分离。CO32-/HCO-为推荐淋洗液。F-的保留时间离开水负峰。很好的分离F-，乙酸根，甘醇酸根和甲酸根。有机溶剂可匹配性方便柱子的清洗。 AS14A-5um（3×150mm）柱与AS14A-7um（4×250mm）柱的离子交换基相同，但树脂粒度不同，柱尺寸不同，因而AS14A-5um（3×150mm）较AS14A-7um（4×250mm）快速，流动相的消耗减少两倍，质量灵敏度增加两倍。

本应用报告描述了一个快速、简单、廉价、高效、耐用、安全的（QuEChERS）AOAC 样品制备方法，可用于菠菜中18 种适合于气相色谱分析的多种农药残留样品的萃取和净化。该方法包括在水/乙腈缓冲体系中的第一次萃取、加盐后的萃取/分离步骤和利用分散固相萃取（分散SPE）的净化步骤。为了解决分散固相萃取中石墨化碳黑（GCB）引起的平面结构分子显著损失的问题，对于平面结构的农药分子，添加甲苯进行改进。利用GC/MS联用，在选择性离子监控(SIM) 模式下对菠菜中目标农药萃取物进行了分析。进行了该方法的回收率和重现性考察。大多数农药的定量限(LOQ) 为10 ng/g；而菠菜中福尔培的定量限为50ng/g。本应用报告采用了Bond Elut QuEChER 试剂盒，所筛选的农药含量都大大低于最高允许残留限量（MRLs）。回收率实验的加标浓度为10,50和200ng/g。