大肠杆菌O157:H7的测试片检测方法
方法编号:5043
1 适用范围:用于各类食品以及人体体检样品中大肠杆菌O157:H7的检测。以及突发事件应急检测需要。
2 方法原理:采用选择性显色培养基作为主要原料,加入专一性酶显色剂,运用微生物测试片技术,做成一次性快速检验产品,通过接种、培养,如果样品中含有大肠杆菌O157:H7,即可在纸片上呈现紫红色的菌落。
3 操作方法
3.1 样品处理:无菌操作取25g(mL)样品放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,充分振摇或置均质器中制成样品匀液,静置片刻。
3.2接种:将测试片水平放在台面上,小心揭开上盖膜,用灭菌吸管吸取1 mL样品上清液或增菌液,均匀加到中央的滤纸片上,然后轻轻将上盖膜放下,静置5min。每个样品接种两片。
3.3培养:将加了样的测试片叠放在一起,放入原来的自封袋中,堆叠片数不超过12片,透明膜向上平放在37℃培养箱内培养15h~24h。
3.4结果观察:对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为大肠杆菌O157:H7;呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。
4附加说明
4.1 本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测,用取样棉签涂抹被测物体表面,放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中,摇晃10s,然后取1mL接种到测试片上。
4.2注意使用过的纸片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。
4.3出现阳性菌落的样本,最好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的话至少再取样重复检验一次。
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