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大肠杆菌stec的检测方法
大肠杆菌stec测试片使用说明
方法编号：CDC-5047
1.方法原理及适用范围
1.1大肠杆菌STEC，是肠出血性大肠杆菌的一种，能产生志贺毒素的非O157：H7大肠杆菌，包括了在日本出现的E.coli O111以及2011年在德国及欧洲其他国家出现的E.coli O104。这类大肠杆菌感染后，可引起自限性腹泻、出血性结肠炎和溶血性尿毒综合症（HUS）。一般寄生在牛、羊等家畜和其他反刍动物体内，人类主要是通过未经烹调或烹调不彻底的肉类和奶制品等被感染。
1.2另外有60种STEC血清型在世界各地的腹泻疾病中被发现，一些非O157的血清型已证明与在美国欧洲及亚洲发生的食源性疾病有关。因此，世界各地的监管部门呼吁食品行业，对这些微生物加以重视并采取监管措施。大肠杆菌STEC测试片采用进口高选择性培养基作为主要原料，加入特异性酶显色剂，运用微生物测试片专有技术，做成一次性快速检验产品，一步培养15-～24h就可确认，大大地简化了检测程序，非常适合各级检验部门和食品企业使用。
2操作方法
2.1样品处理：取样品 25 mL（g）放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液。
2.2接种：将大肠杆菌STEC测试片（BS211）置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置5 min使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下，每个样品接种两片。
2.3 培 养： 将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为37℃±1℃，培养15～24h。
3结果判读：对测试片进行观察，呈紫红色的菌落为大肠杆菌STEC；呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。出现阳性菌落的样本，最好用其他更为可靠的方法进行验证，没有条件的话至少再取样重复检验一次。
4附加说明
注意使用过的测试片上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。
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