HTX SublimatorTM高速化学纳米涂层系统,又名基质升华仪,基质喷涂过程中,跳过液态直接升华为气态,样品的更多空间信息被完整保留,是一款用于高分辨质谱成像中,能提供高速性、重现性及最小晶体(<1μm)的自动化MALDI基质喷涂系统。
HTX 基质升华仪真空室的设计具有快速处理基质、减少MALDI基质消耗的特点;基质喷涂过程中,跳过液态直接升华为气态,样品的更多空间信息被完整保留;智能控制和预先设定的基质喷涂方案确保样品处理的重现性和更佳的基质样品结合质量。这款独立的系统可以在2分钟内达到升华条件,5分钟内完成整个样品的制备,尤其适用于高通量实验。
和传统的玻璃器皿升华装置相比,该款系统尽可能的减少了指纹接触,HTX的基质升华仪的真空室具有防震、易操作、易清洁的特性,而且有一个特别的防水观察窗。标准的定位样品托盘可以匹配各种厚度的标准的25×75mm显微镜载玻片。
意大利卡梅里诺大学药理学系药理学科收集啮齿动物的大脑样本,进行动物实验,过程中使用HTX TM-Sprayer(基质喷雾仪)和SublimatorTM(基质升华仪)分别进行基质喷涂。
实验操作:
基质喷雾仪操作:使用HTX TM喷雾仪在载玻片上喷浓度(C)为7 mg/mL(2:1 v/v氯仿:甲醇)的norhamane(2-咔啉)。操作参数如下:
流速:0.120mL/min 氮气压力:10psi
喷嘴速度:1200mm/min 干燥时间:30s
喷嘴温度:30℃ 喷嘴高度:40mm
基质升华仪操作:将90 mg norhamane(2-咔啉)基质溶于2mL 甲醇中,将基质混合物移液到HTX基质升华仪真空室的槽中;将料槽预热至65oC,以蒸发所有的甲醇溶剂;然后抽真空,在140oC下,在HTX基质升华仪中升华180s。
图1. 使用(A) HTX TM喷雾仪和 (B) HTX升华仪制备的大鼠脑连续切片(12μm)的离子图像
比较这两种基质沉积方法对大鼠脑组织中小分子的MALDI MSI的影响时,发现使用HTX 升华仪制备的样品的图像分辨率稍高(图1)。 此外,与使用HTX TM-Sprayer制备的组织的光谱的相同峰相比,使用HTX 升华仪制备的组织的光谱的顶部峰的相对信号强度增加了10-20% (图2)。
图2.用HTX TM-Sprayer(蓝色光谱)和HTX Sublimator(红色光谱)制备的连续大鼠脑切片获得的总光谱
与典型的喷涂方法相比,通过升华实现的无溶剂基质沉积具有多个优势。 它通常可以提高图像分辨率,因为从未将溶剂引入表面样品中以引起分析物离域。使用升华法在低质量范围内进行样品制备,可以保持或稍微提高信号灵敏度,并且对于单个载玻片,升华方案也比喷涂基质要快得多。
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