液相色谱常见问题和解决方法（上）

1）流动相粘度过高、被污染，建议选择合适的流动相和比例，重新配置，用0.45微米滤膜进行过滤。

2）流动相内的缓冲盐引起单向阀堵塞，将流速设定在5mL/min，拧松排气阀并purge。

3）泵内有气体，将流速设定在5mL/min，拧松排气阀并purge。

4）高压密封垫变形，建议更换新的高压密封垫。

1）泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理。

2）比例阀失效，更换比例阀即可。

3）泵密封垫损坏，更换密封垫即可。

4）溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法。

5）系统检漏，找出漏点，密封即可。

6）梯度洗脱，这时压力波动是正常的。

柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因：

1）拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查。

2）把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查。

3）将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。这时，如果柱压仍不下降，再检查。只用于使用过的柱子。

4）更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题。

 5）进样器堵塞，用注射器抽取适量纯净水(多于定量环体积)，注入进样口，从废液瓶流出，重复5次。

平头峰：

1）检测池污染，清洗检测池。

2）紫外灯性能极限或故障，更换性能更强的紫外灯。

3）进样量过大，减少进样量。

分叉峰：

1）保护柱被污染，更换新的保护柱。

2）色谱柱被污染，对色谱柱冲洗过夜。

3）进样阀被污染，用注射器抽取适量纯净水（多于定量环体积），注入进样口，从废液瓶流出，重复5次。

4）检测池被污染，清洗检测池。

5）溶剂选择不合理，合理选择溶剂。

6）进样量过大，减少进样量。

 拖尾峰：

1）色谱柱被污染，更换新的色谱柱。

2）进样量过大，减少进样量。

3）流动相配比不合理，用合理的配比制造流动相。

4）流动相流速不合理，合理调节流动相流速。

5）色谱柱选择不合理，选择合适的色谱柱。

6）样品不纯，对样品进行纯化。

 伸舌峰：

1）柱温过低，合理调节柱温。

2）溶剂并非流动相，用流动相溶解样品。

3）流动相配比不合理，用合理的配比树造流动相。

4）流动相流速不合理，合理调节流动相流速。