非水反相色谱法应用案例及注意事项

非水反相色谱法（NARP）为反相色谱法的一种特殊模式，主要用来分离疏水性很强不溶于水的样品如脂类、合成聚合物等，这些样品的保留能力很强，流动相全部由有机溶剂组成，不使用强极性的水溶液。非水反相高效液相色谱法可做为脂溶性药物和非极性含氮有机化合物及其盐类药物的常规分析方法[1]，中药中的一大类有效成分脂溶性大，不溶于水，甚至也难溶于甲醇，因此非水反相色谱也常应用于中药质量控制[2]。

月旭科技色谱柱应用于某中药配方颗粒中甘油酯类样品分析案例如下：

非水反相色谱中的流动相是由极性较强的有机溶剂A和极性较弱的有机溶剂B组成。A溶剂常用乙腈或甲醇，B溶剂常用四氢呋喃、异丙醇、二氯甲烷、甲基叔丁基醚或者其他极性较弱的有机溶剂。

非水反相色谱法方法优化同反相色谱法，主要通过改变%B或B溶剂的极性来调节，等度或梯度都能使用，同时柱温对样品的分离也有影响。一般首选采用ACN（A）和THF（B）的混合溶剂为作为初始流动相。若用100%THF样品保留仍太强，可以用极性较弱B溶剂（如二氯甲烷或氯仿）来替换，但是要考虑使用二氯甲烷或氯仿的检测波长。

需注意，在使用非水反相色谱时，需要将整个系统和色谱柱中的水相彻底冲洗过渡，仪器系统应保证已升级到正相，避免硬件损伤。

非水反相色谱法知识点了解更多点击阅读<浅谈非水反相色谱法>

[1] 《非水反相高效液相色谱法在非极性药物分析中的应用研究》

[2]《非水反相液相色谱法在中药质量控制中的应用》