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离子对试剂对复杂中成药中生物碱检测的影响

月旭

2022/09/27 08:59

阅读:92

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做样目的:客户有原始方法,但杂峰多,分离不好,DAD纯度达不到要求。起始要求是筛选合适的色谱柱。

微信截图_20220927085650.png

存在问题:主成分与前相邻峰的分离度不是很好,浓度增大的情况下,分离度容易不合格。而原方法中,主成分保留弱,有机相的起始比例已经为0,为100%纯水相条件,除了筛柱子,方法没有优化空间。因此,确定进行完全的方法开发。


麦角硫因结构式:

微信截图_20220927085811.png

方法开发思路:

从结构看,物质应该偏碱性,原标准中,客户流动相pH6-7之间,且起始比例已为纯水相,麦角硫因出峰在纯水相段,方法已没有优化空间。与客户进行沟通,客户接受完全的方法开发。

结构中有羧基和氨基,增加保留能力可以选用加离子对的方式。羧基可以选用四丁基铵类的离子对,氨基可选择磺酸类的离子对或三氟乙酸,七氟丁酸等离子对试剂。考虑到为中药制剂,成分复杂,需要加后梯度用高比例有机相洗脱强保留杂质,磺酸类离子对和四丁基铵类离子对平衡慢,而且走梯度鬼峰的概率大,而三氟乙酸的离子对作用较弱,延长保留的能力有限,因此选用七氟丁酸做为添加剂,来增强麦角硫因的保留。

微信截图_20220927085817.png

由图可见,在流动相中增加一定比例的七氟丁酸后,麦角硫因保留明显增加,且前后都没有明显的杂质干扰。



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