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体积排阻色谱知多少？
体积排阻色谱（ size-exclusion chromatography，SEC）是快速分离不同分子量混合物的色谱方法，可以快速的确定样品混合物的复杂性，而且可以同时给出各个组分的大概分子量及分布。
分离原理：分子的体积排阻，样品组分和固定相之间原则上不存在相互作用，色谱柱的固定相是具有不同孔径的多孔凝胶，只让临界直径小于凝胶孔开度的分子进入（保留），其孔径大于溶剂分子，所以溶剂分子可以自由地出入。高聚物分子在溶液中呈无规则线团，线团的体积和分子量有一定的线性关系，对不同大小的溶质分子可以渗透到不同大小的凝胶孔内不同的深度，小的溶质分子，大孔小孔都可以进去，甚至可以渗透到很深的孔中。因此小的溶质分子保留时间长，洗脱体积大，而大的溶质分子保留时间短，洗脱体积小。
GPC色谱柱选择
按照样品所溶解的溶剂来选择柱子所属系列： THF，DMF，三氯甲烷。 按照样品分子量范围来选择色谱柱： 样品分子量应处在排阻极限和渗透极限的范围内，并且zui好是处在校正曲线线性范围内。 SEC中流动相仅起到在柱子中 运输溶质的作用 流动相选择： 能完全溶解样品，但不与试样反应，不与填料有任何相互作用，黏度低，沸点比柱温高20-50℃。 典型的流动相： 100mmol磷酸钾和氯化钾溶液。
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