去内毒素亲和填料常见问题解答
内毒素是一种常见的蛋白污染物,它的存在使得蛋白的活性研究变得十分复杂,并且内毒素是一种对人类有害的化学物质,它能引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等一系列不良症状,因此,检测和去除蛋白中的内毒素有着十分重要的意义。 月旭Endotoxin rem Tanrose 4FF 内毒素亲和填料以自制的琼脂糖凝胶为基质、多占菌素B为配基,用于去除生物源蛋白类产品(包括多肽、抗体、多糖等)中的内毒素,但多占菌素B只对部分内毒素有抑制作用,而不能抑制所有内毒素。
1. 内毒素去除效率低,应当怎么做? ①可能原因:样品pH值不在内毒素结合范围。 解决方法:用0.1M NaOH或0.1M HCl调节pH至7-8。 ②可能原因:样品与填料接触时间短。 解决方法:降低流速,增加样品接触时间。 ③可能原因:检测系统被内毒素污染。 解决方法:确保所有试验用品均为无热源产品。 ④可能原因:内毒素与目的蛋白结合较强。 解决方法:优化样品pH,使样品能够与内毒素分离。 2. 样品被污染,应当怎么做? 可能原因:该填料纯化过其他样品。 解决方法:增加接触时间;不要用使用过的填料来去除不同样品的内毒素。 3.样品回收率低,应当怎么做? ①可能原因:样品非特异性吸附在填料上。 解决方法:增加样品和平衡液中的NaCl浓度。 ②可能原因:目的蛋白与内毒素结合一起被去除。 解决方法:优化样品pH,使样品与内毒素分离。
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