液相色谱维护小贴士——心脏篇

WiSys5000高效液相色谱仪是月旭科技推出的一款配置灵活、操作便捷&智能合规的液相色谱系统，斩获德国IF设计奖和中国设计红星奖。

工欲善其事必先利其器，既然大家实验室有了WiSys5000，那咱们就来说一说维护的那些事儿吧。

一台性能良好的液相色谱仪就像一个身体健康的人一样：

● 泵——心脏；

● 流动相——血液；

● 进样器——口腔；

● 色谱柱——消化系统；

● 检测器——眼睛；

● 工作站——大脑；

● 样品——食物；

泵就像心脏一样将流动相源源不断的输送到系统的其他单元；进样器像我们的口腔一样把样品加入到系统中，流动相带着样品进入到色谱柱中，就像食物进入了消化系统，在胃肠中消化吸收，检测器类似我们的眼睛，吃的什么食物都会在大脑中做出相应的反射。

身体需要锻炼养生，液相色谱也需要维护。

泵维护

高压输液泵是液相色谱仪的核心，泵的密封圈是最易磨损的部件，密封圈的损坏可能引发漏液或压力波动；单向阀的正常工作至关重要，它若发生故障，将直接影响流速的稳定性。状态正常的高压泵是液相色谱准确分析的基础。高压输液泵由电机、凸轮组、柱塞杆和泵头等组成。

（WiSys5000泵头组件）

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（具有24个零件的WiSys5000泵头拆解图）

在高压状态下长时间的运行会逐渐磨损泵头的内部结构，尤其使用含盐或未过滤的色谱溶剂。流速最好逐渐升高，当压力稳定时再升高，直到升高到所需流速，既可以保护泵又避免了色谱柱头瞬时高压冲击。

日常维护应注意以下几点：

1、使用LC级的溶剂和试剂；

2、确保系统压力在正常范围；

3、使用完缓冲液体系后用高水相冲洗干净，防止盐沉积，系统不运行时应存储在有机溶剂中；

4、密封圈按照各个生产厂商的建议定期更换；

5、尽量不使用泵在线混合含盐缓冲盐和有机相；

6、泵设置最小压力，避免溶剂跑空，柱塞杆磨损；

7、吸滤头、单向阀、在线过滤器、过滤白头等过滤组件根据材质定期超声或浸泡清洗。

流动相过滤

泵的性能和使用情况很大程度上与流动相有关。流动相一定要过滤脱气后再上机。

（滤膜）

所有溶剂使用前都必须经0.45µm（或0.22µm）过滤，以除去杂质微粒。用滤膜过滤时，特别要注意分清有机相（脂溶性）滤膜和水相（水溶性）滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂，过滤水溶液时流速低或滤不动。水相滤膜只能用于过滤水溶液，严禁用于有机溶剂，否则滤膜会被溶解。对于混合流动相，可在混合前分别滤过，如需混合后滤过，选择适当的滤膜,选择时，可以参考滤膜化学兼容性表。

流动相脱气

常用脱气方法抽真空、超声、吹氦等。

超声脱气操作简单，成本低，10-20分钟的超声处理对许多有机溶剂或有机溶剂/水混合液的脱气是足够了（一般500mL溶液需超声20-30min方可），此法不影响溶剂组成。超声时应注意避免溶剂瓶与超声槽底部或壁接触，以免玻璃瓶破裂，容器内液面不要高出水面太多。离线脱气法不能维持溶剂的脱气状态，在你停止脱气后，气体立即开始回到溶剂中。在1-4小时内，溶剂又将被环境气体所饱和。

在WiSys5000系统中都标配有在线脱气机，值得注意得是在线脱气机脱除得是小气泡，所以尽量先用超声脱气将大气泡去除后再上机。

（WiSys5000脱气盒）

一般说来有机溶剂中的气体易脱除，而水溶液中的气体较顽固。在溶液中吹氦是相当有效的脱气方法，这种连续脱气法在电化学检测时经常使用。但氦气昂贵，难于普及。

慎用卤代有机溶剂

卤代溶剂可能含有微量的酸性杂质，能与HPLC系统中的不锈钢反应。卤代溶剂与水的混合物比较容易分解，不能存放太久。卤代溶剂（如，CCl4、CHCl3等）与各种醚类（如，乙M、二异丙醚、四氢呋喃等）混合后，可能会反应生成一些对不锈钢有较大腐蚀性的产物，这种混合流动相应尽量不采用，或新鲜配制。此外，卤代溶剂（如，CH2Cl2）与一些反应性有机溶剂（如乙腈）混合静置时，还会产生结晶。总之，卤代溶剂最好新鲜配制使用。如果是和干燥的饱和烷烃混合，则不会产生类似问题。