很多小伙伴对选择一根合适的制备柱而困扰,本文介绍了制备型色谱柱的一些选择要点。
什么是制备型色谱柱
制备的目的是从混合物中得到纯物质,即分离-纯化-目标物,制备柱则是完成这一过程的工具。制备柱固定相种类和分析柱类似,制备柱的特点是:
1、柱长短,内径大
为了加快分离时间和提高分离效率,制备色谱的进样品量会很大,一般制备柱柱长为50mm-250mm,而内径为10mm-50mm。
2、流速高
流动相流速一般在10-20ml/min,可以提高产率,降低生产成本。
如何选择一款合适的制备柱
第一步:选择合适的键合相
目前市场需求来看,蛋白质、多肽等类的物质分离纯化十分普遍,其中以C18、C8、C4的键合相居多,月旭科技提供完整的键合相产品线。
第二步:选择合适的填料粒径和孔径
根据化合物的性质来选择合适的填料粒径和孔径
由分子量选择合适的孔径
由压力耐受性和分离难度来选择合适的粒径
第三步:由上样量大小和样品特性选择合适的柱管
第四步:确定合适的流速和上样量
制备柱的流速一般与直径的平方成正比,举例:4.6mm分析柱流速为1ml/min,则10mm制备柱约为4.7ml/min。
上样量选择过载上样,特点是节约溶剂、节省时间、增加柱子的使用率,但是过载越多,分离度越差,一般以目标化合物与杂质分离度1.5为标准。上样量可以依据下式计算:
Ultimate®系列制备柱
采用与分析柱所用填料完全相同,保证了分析规模和制备规模的良好重现性,支持直线放大;独特的装柱技术和全不锈钢的modular柱管,保证了柱床的稳定性,经过测试10μm理论塔板数>35000/m,5μm理论塔板数>75000/m,峰的对称性值为0.95~1.20;还有上样量高、支持线性放大、制备时间短、节约溶剂等特点。
更好的柱效和封尾
更好的分离效率、易于线性放大
不同内径的柱子能得到同样完美分离
月旭科技拥有Sail 1000制备液相系统和Ultimate®,Xtimate® 制备色谱柱系列,小伙伴如果在选择制备色谱柱过程中有什么疑问,欢迎咨询月旭科技当地销售代表和经销商。
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