陈皮中黄曲霉毒素的检测方案

月旭

2013/12/20 15:15

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事件背景：

黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本方法是采用高效液相色谱法测定药材、饮片及制剂等基质中的黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，以陈皮药材中的检测为例，采用了柱后衍生法测定，灵敏度高，实验人员不需要直接接触更多有害的物质，更加绿色环保安全。

检测方案：
1. 适用范围

适用于药材、饮片及制剂等基质中的黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的检测

2. 方法条件
2.1 方法来源：2010版药典一部
2.2 色谱条件：

色谱柱：月旭Ultimate^? XB-C18 ，4.6×250mm，5μm；
流动相：水：甲醇：乙腈=46:40:14
流速：1mL/min
荧光检测器：激发光波长：360nm 发射光波长：450nm 增益：17
柱温：30℃
衍生方式：柱后光化学衍生（254nm）

2.3 混合对照品溶液的配置：

精密量取黄曲霉毒素混合标准品溶液0.5ml于10ml容量瓶中，用甲醇定容，为储备液，精密量取该储备液适量，分别制成不同浓度的混标溶液；

2.4 供试品溶液的配置：
取供试品粉末约15g (过二号筛），精密称定，加人氯化钠3g ，置于均质瓶中，精密加人70%甲醇溶液75ml，高速搅拌2分钟（搅拌速度大于11 000转/分钟），离心5 分钟（离心速度2500 转/ 分钟），精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，量取续滤液20.0ml,通过免疫亲合柱（Welchrom^? Aflatoxin G1 G2 B1 B2 货号：01140-00031 ），流速每分钟3ml，用水20ml洗脱，洗脱液弃去，使空气进人柱子，将水挤出柱子，再用适量甲醇洗脱，收集洗脱液，置2ml容量瓶中，甲醇定容，过滤即得。
2.5 加标回收样品溶液的配置：
精密称量均质样品25g，加入黄曲霉毒素混标溶液（浓度分别为：G2：0.75ng/ml G1：2.5ng/ml B2：0.75ng/ml B1：2.5ng/ml）1ml，照供试品溶液配置方法处理即得。
3. 谱图及数据
3.1 混标溶液线性及色谱图：

3.2 陈皮加标溶液色谱图：

3.3 回收率：