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磷酸盐缓冲溶液配制方法及优化案例

2023-11-09 16:54

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资料摘要:

缓冲液的作用是在一定的范围内缓冲调整溶液的pH值,使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。其中,磷酸盐缓冲液截止波长低于200nm,在较低分析波长下仍可使用,具有三个pKa值,可提供1.1~3.1,6.2~8.2,11.3~13.3三个pH缓冲范围,是HPLC在紫外检测条件下最常用的缓冲液之一。 配制磷酸盐缓冲液时,通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na+或K+的浓度,Na+或K+的作用是调节渗透压。

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目前,在实际工作中使用得较多的核壳型色谱填料,主要有亚-3μm及亚-2μm两种,下面我们将分别进行讨论。

SPP材料还有几个特点需要强调: 2.1 外壳较薄的多孔层缩短了孔隙的深度[12],从而改善了传质(公式11和12中的C项)。因此,在相同的流动相强度下,SPP柱的分离能力较为显著。

孔径(dpore)和孔体积(Vpv) 利用色谱填料的孔隙进行色谱分离的技术,可以追溯到20世纪50年代凝胶过滤色谱(gel-filtering)或体积排阻色谱(size-exclusive chromatography,SEC)[38,39,40]。此后,SEC在分离合成大分子和生物大分子样品等[41]方面得到了很好的发展。而孔体积(Vpv)是决定SEC分离效果的关键参数[42],它直接决定了分析物在SEC柱上的分离度。

目前,以高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱(UHPLC)为代表的液相色谱已成为制药[1,2,3]、食品[4]、环境[5]和法医学[6,7,8,9,10]等行业实现快速分离的主要分析手段。早在1903年Tswett博士就在华沙的一次当地会议上展示了他的色谱分离结果[11],但是,液相色谱花费了六十多年的时间、直到20世纪70年代,才以高效液相色谱(HPLC)技术走出了研究实验室的高墙[12]。

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