一些关于TisXell 3D细胞--组织生物反应器的应用

一 、TisXell介绍

3D培养下的骨组织修复技术，包括间充质干细胞的3D培养，硬骨修复，软骨修复等，为3D细胞，组织乃至器官培养修复领域的最前沿应用。能真正将生命科学技术临床化，医疗应用化，造福病患，服务人民。
传统细胞培养，伪3D细胞组织培养，多为各种3D结构耗材，单轴旋转，灌注式，培养体积小等，无法真实再现所模拟的细胞组织体内生存环境，无法培养接近人体组织尺寸的3D支架，应用效果和范围堪忧。
TisXell专利的3D骨细胞组织再生培养技术，通过创造性的X，Y双轴360度整体旋转，在线营养成分交互，个性化的3D支架固定方式，支持尺寸达10cm的硬骨软骨支架，给细胞组织甚至器官提供了一个非常接近体内内环境的培养体系，能真正富集到3D支架外层和内核，并保持高活性，低死亡率，真实再现出细胞组织原本的基因调控，蛋白表达，生长扩增，聚合形态，成器官趋势化等，为下游组织器官修复的临床应用，提供了最接近人体组织的3D替代物。是目前行业最先进的顶尖技术。

TisXell专利的3D骨细胞组织再生培养技术，最早为新加坡国立大学(NUS)开发，再被新加坡QuinXell公司技术实体化。近两年来，各国利用TisXell技术已经或正在开发如：美国完成人类颧骨和股骨体外培养修复工艺，和计算机辅助设计下小鼠乳房培养再生研究；法国开发磁固定下3D软骨培养修复方法；新加坡完成靶向治疗性T细胞扩增培养工艺；德国开发自体血管再生工艺；中国第四军医大学开发3D打印骨骼立体培养技术等。

目前，我国在3D骨细胞组织培养应用领域，离领先国家差距明显，缺失日重，需TisXell技术加以学习赶超，缓解高端3D骨细胞组织培养需求，早日服务广大骨组织修复病患，为国家社会创造价值。

二、TisXell应用范例

TisXell 适用于3D细胞的培养、组织和器官的培养、3D支架和微载体的培养、和规模级细胞扩增工艺的开发如：靶向T细胞， HFMSCs， pc3等。TisXell通过独特的双轴360度无剪切力培养，拟体内环境拟，使得3D细胞生长、增殖、分化和趋向形成组织器官性明显。
1、细胞球体培养： hfMSC细胞在50mL 的TisXell体系内,进行3D培养，经过两天无剪切力培养，形成细胞球体。

2、3D细胞组织趋向性： PC3细胞在超低粘附性24孔板（左）静态培养，和TisXell（右）3D培养下，同样经过4天。光学图像显示TisXell 3D培养下的PC3细胞，在扩增，聚集和成组织趋向性，都远优于传统培养。

3、干细胞诱导分化培养：hfMSC细胞在TisXell内，培养富集于3D聚合物支架，均匀同质化富集于支架，并显著提高细胞增殖总数，避免不想要的细胞分化方向，mRNA表达保持正常。

4、软骨修复: 通过有效磁性凝聚，在TisXell培养体系内，动态富集分化MSCs干细胞到3D多孔多糖支架上。软骨发生的标志物collagen II增长50倍，组织染色显示大量细胞富集，为软骨修复领域的重大进展。

5、3D支架培养：HFMSCs细胞富集于Polyactive支架，在24孔板中静置于培养3天，再于TisXell系统中3D培养6天后。 Confocal荧光三视图显示，HFMSCs细胞极好富集于支架。

6、微载体培养： 用Cytodex 3球形微载体，在TisXell 50ml气膜罐体内进行3D干细胞扩增培养，经过7天培养，微载体上均一分布HFMSC 细胞，3D培养培养效果极好。

7、心脏培养：HFMSCs 细胞富集于，整块小鼠去细胞心脏支架，经过7天TisXell 3D培养，趋向形成一个新的心脏器官。

8、乳房再造：3D乳房形支架接种人类脐带血管周细胞，在静态条件下培养4周，后在TisXell中培养2周。 再将体外构建体用GFP标记的HUVECs细胞接种，并皮下植入无胸腺裸鼠24周。所有时间点都观察到，构建体内血管生成和脂肪组织形成。

9、制备自体血管，适合于心脏搭桥手术，完全避免外源物质排斥（项目仍在研究阶段）。

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