头孢类药物杂质分析不犯难，G-10来帮忙

美瑞泰克

2022/06/17 10:59

阅读：50

头孢作为具有疗效高、抗菌活性强、副作用小的抗生素，在医疗领域被广泛使用，也逐渐进入到我们的日常生活中。

如今大家倾向于在身体出现“发炎”症状时选用头孢治疗，但头孢种类多、适应症也有所区别，近年来，因为药物选择不当、头孢滥用造成的悲剧也屡见不鲜。

那么在实验室中，面对众多的头孢类物质应该采取什么方法进行测定呢？

为此，我们查阅了《中国药典》中头孢类物质的相关资料，其中收录头孢菌素类抗生素26个品种， 48种制剂，已对其11个品种(如头孢他啶、头孢尼西钠等)采用Sephadex G-10系统制定了聚合物杂质的控制标准。新版《中国药典》(ChP2020)分别在有关物质检查项下增加了系统适用性溶液的配制方法。以头孢拉定为例，药典中写明了系统适用性溶液的配制及色谱条件。

头孢拉定聚合物　照分子排阻色谱法（通则0514）测定。临用新制。

供试品溶液　取本品约0.2g，精密称定，置10ml量瓶中，加2%无水碳酸钠溶液4ml使溶解，用水稀释至刻度，摇匀。

对照溶液　取头孢拉定对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含10μg的溶液。

系统适用性溶液（1）　取蓝色葡聚糖2000适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液。

系统适用性溶液（2）　称取头孢拉定约0.2g，置10ml量瓶中，加2%无水碳酸钠溶液4ml使溶解后，加0.6mg/ml的蓝色葡聚糖2000溶液5ml，用水稀释至刻度，摇匀。

色谱条件　

用葡聚糖凝胶G-10（40～120μm）为填充剂；玻璃柱内径1.0～1.4cm，柱长30～45cm；以pH8.0的0.2mol/L磷酸盐缓冲液［0.2mol/L磷酸氢二钠溶液-0.2mol/L磷酸二氢钠溶液（95：5）］为流动相A，以水为流动相B；流速为每分钟1.0～1.5ml；检测波长为254nm；进样体积100～200μl。

系统适用性要求

系统适用性溶液（1）分别在以流动相A与流动相B为流动相记录的色谱图中，按蓝色葡聚糖2000峰计算，理论板数均不低于400，拖尾因子均应小于2.0，蓝色葡聚糖2000的保留时间比值应在0.93～1.07之间。系统适用性溶液（2）在以流动相A为流动相记录的色谱图中，高聚体的峰高与单体和高聚体之间的谷高比应大于2.0。对照溶液色谱图中主峰与供试品溶液色谱图中聚合物峰与相应色谱系统中蓝色葡聚糖2000的保留时间的比值均应在0.93～1.07之间。以流动相B为流动相，精密量取对照溶液连续进样5次，峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%。（对照溶液进行测定前，先用含0.2mol/L氢氧化钠与0.5mol/L氯化钠的混合溶液200～400ml冲洗凝胶柱，再用水冲洗至中性。）

测定法　以流动相A为流动相，精密量取供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；以流动相B为流动相，精密量取对照溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。

限度　按外标法以头孢拉定峰面积计算，头孢拉定聚合物的量不得过0.05%。

色谱柱推荐

G-10葡聚糖凝胶色谱柱

多种规格可供选择

SephadexG-10凝胶色谱法, 实现了让药物分子可自由进入凝胶颗粒, 而所有高分子聚合物被排阻的设想, 有目的地利用药物分子和凝胶间的次级相互作用, 使得色谱过程中凝胶对药物分子的吸附作用大于对高分子聚合物的吸附作用, 进而实现了选择性提高分离度的设想。药物分子和凝胶介质之间的相互作用和药物的结构有关, 通过调节色谱过程中流动相组成、浓度、pH和流速等参数, 来调节药物分子和凝胶颗粒间的相互作用, 进而调节高分子聚合物和药物的分离度, 使凝胶色谱系统优化。实验证明该方法灵敏、准确、简便、专属性强。