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#液相色谱(LC)

Waters Acquity UPLC使用心得

Waters Acquity UPLC使用心得

Waters Acquity UPLC是单位于2009年购置的,第一次使用超高效液相色谱,被超快速的分析时间震撼了。例如原来牛奶中糠氨酸检测一直用Waters 2695,糠氨酸极性强,10min左右就出峰了,但梯度程序却要运行时间40 min,因为要把牛奶中保留性强的基质洗脱干净不然会影响下一针样品,还要加上几分钟平衡时间;而UPLC 8 min梯度程序就可以搞定,分离度比2695还要好一些,大大提高了工作效率,节省流动相试剂,特别适合大批量样品检测。

与传统HPLC相比,UPLC最大的优点就是快速、分离度好,以前建立、优化一个液相方法可能需要几天(多组分单针运行时间一般都需要几十分钟),UPLC多数半天就可以搞定(多组分梯度程序一般10 min都可以搞定),这主要得益于整个液相耐高压系统(该仪器可耐受15000 PSI)和亚2 um粒径填料色谱柱的高塔板数。但随之带来的问题是这种色谱柱特别容易堵,特别是像含蛋白、脂肪、磷脂等基质多的样品,有次接到几百批次大豆中大豆异黄酮检测任务,尽管前处理时样品已经经过C18 SPE小柱净化,然而进样不到一百次就发现系统压力超过15000 PSI,打开色谱柱前端发现筛板上存在明显油脂痕迹,应该是导致系统超压的主要原因,换新筛板后压力明显下降,但分离效果也出现一定程度下降,基本做完这几百个样品柱子就不能使用了,可见亚2 um色谱柱抗污染能力确实比普通5 um柱子差一些,而且UPLC单根色谱柱价格也要比HPLC贵不少。

所以对于预算充足、样品量很大的单位UPLC可以大幅提高工作效率,但从成本-效益角度考虑,普通HPLC更适合像企业内部实验室等需要严格核算投入-产出比例的实验室,因为UPLC能分析的组分普通HPLC也完全能够胜任,只不过需要的分析检测时间长一些、流动相消耗多一些。

发布时间:2022-11-16 06:35

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