流式/细胞样本前处理

分类小贴士

流式细胞术（Flow Cytometry）是一种通过激光散射和定量检测荧光信号来分析单个细胞的技术。在进行流式细胞术时，前处理步骤非常重要，可帮助研究者获得准确、可重复和可靠的数据结果。 流式/细胞样本前处理的主要步骤包括以下几个方面： 细胞溶解：通常使用生理盐水或其他的缓冲液将细胞样本转移到制备的离心管中，并进行细胞的离解。 过滤：这个步骤可以去除大块的细胞、组织碎片和其他的杂质，从而保证流式细胞仪检测到的信号来自于单一的细胞。 分离：对于混合的细胞群体，还需要进行细胞分离，以获取感兴趣的单种细胞。其中，流式细胞术中常用的细胞分离方法有磁珠分离、梯度离心和筛选等。 固定和渗透化处理：通常会在样本中添加一定的固定剂，如乙醛或甲醛，以稳定细胞并防止其在测量过程中发生变化。此外，渗透化处理可以加强样本中某些抗体的反应效果，提高检测灵敏度。 样品染色：根据需要选择特定颜色的荧光染料来标记细胞的表面或内部分子、细胞器等，以便通过流式细胞仪进行检测和分析。 调整离子强度和pH：在进行细胞样本前处理时还需要注意离子强度和pH值的调节。通常情况下，使用含有明确的缓冲剂（如FACS套件）的离心管和缓冲液来维持稳定的离子强度和pH值，以确保流式细胞仪检测的信号准确无误。 以上是流式/细胞样本前处理的主要步骤，总之，前处理的目的是为了提取单个细胞并稳定它们的状态，从而获得准确、可重复和可靠的数据结果。